用含0.1%三氟乙酸的流动相走完样品后需要用不含三氟乙酸的流动相冲柱子吗?以及怎样冲洗?
本人用0.1%三氟乙酸和0.1%三氟乙酸-乙腈走的样品,请问样品走完后还需要用不含三氟乙酸的流动相冲洗柱子吗?需要用什么作为流动相怎样冲洗呢?谢谢各位......阅读全文
非极性毛细管色谱柱常见问题原因解析
非极性毛细管色谱柱的一些常识非常必要。使用过程中容易发生柱堵塞引起系统压力过高;柱效低引起峰拖尾、变宽;柱污染、损坏导致鬼峰等问题。引起这些问题的内在原因: 1.硅羟基的死吸附 非极性毛细管色谱柱的基材硅胶粒子表面存在硅胶羟基。任何物质在色谱柱中都存在双分配效应,即在流动相与固定相之间进行分配,
流动相和流量的选择
ESI和APCI分析常用的流动相为甲醇、乙腈、水和它们不同比例的混合物以及一些易挥发盐的缓冲液,如甲酸铵、乙酸铵等。HPLC分析中常用的磷酸缓冲液以及一些离子对试剂如三氟乙酸等要尽量避免使用,不得已时也要尽量使用低浓度。 流量的大小对LC-MS成功的联机分析十分重要。要从所用柱子的内径
如何清洗液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余?
液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有高效、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。在检测生物物质
液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余的清洗
液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有高效、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。 在检测
缓冲盐使用不当对色谱柱影响很大该注意什么?如何解决
柱压升高 原因:缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出,堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙,阻碍流动相传质,引起柱压升高; 相同化合物的保留时间发生变化 原因:如果没有冲洗干净就进行进样,色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化; 柱效下降 原因: i)有些缓冲
三氟乙酸酐衍生化羟基后用什么溶剂溶解
紫外衍生化试剂 、苯甲酰氯为衍生化试剂、羟基衍生化试剂 、 手性衍生化试剂、...用有机溶剂萃取富集后,在一定温度下蒸发、浓缩,再以甲醇或乙腈溶解或稀释
如何判断一只色谱柱的“退休”时间?
如何判断一只色谱柱的“退休”时间? 色谱工作者常会碰到这样的问题,色谱柱的塔板数能体现色谱柱的状态吗?如何确定一支色谱柱是否应该“退休”?新的色谱柱在使用前都要做什么?如何对柱子进行清洗?好的色谱柱应具备哪些性能?等等一系列问题,都是今天要和您探讨的! 色谱柱开启和安装推荐步骤
【干货】如何判断一只色谱柱的“退休”时间?
色谱工作者常会碰到这样的问题,色谱柱的塔板数能体现色谱柱的状态吗?如何确定一支色谱柱是否应该“退休”?新的色谱柱在使用前都要做什么?如何对柱子进行清洗?好的色谱柱应具备哪些性能?等等一系列问题,都是今天小萃要和您探讨的。 新色谱柱开启和安装推荐步骤 1.使用新鲜洁净的水与乙腈。冲洗系统,
一根色谱柱能用多久?
色谱柱使用常见问题 柱压升高 原因:缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出,堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙,阻碍流动相传质,引起柱压升高; 相同化合物的保留时间发生变化 原因:如果没有冲洗干净就进行进样,色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化; 柱效下降 原因: 1、有些
液相色谱仪注意事项
液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中.为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如,纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。 对液相色谱仪的要求 1.流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去
手性分析之流动相方法优化
1、 流动相 手性分析很关键的一项是流动相的选择,手性分析一般都采用正相,使用最多的流动相是正己烷、正庚烷、乙醇和异丙醇这四种,其中起洗脱作用的流动相是乙醇和异丙醇,正己烷和正庚烷用来调节流动相的洗脱强度。正己烷和正庚烷对于样品分离没有什么太大的影响,不会改变选择性和分离度,通常都可以混用,不过
液相色谱仪的的使用注意事项与故障解决方法
液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中,为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如,纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。 一、对液相色谱仪的要求 ⒈流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和
高效液相色谱的日常操作方法及故障维修处理
8 仪器设备的维护和保养 8.1 色谱柱日常维护 8.1.1 长期不使用HPLC应该将色谱柱从系统拆除拆除前应该充分平衡色谱柱一般为用甲醇或乙腈冲洗色谱柱40分钟以上。 8.1.2 每次开机时流速和柱压要逐渐加强突增压会使柱庆受到冲击引起紊乱产生空隙使柱头凹陷。 8.1.3 在注射样品
色谱柱相关的100个问题
89、我用的是C18柱,后面黑色的是我以前跑的图,前面是我现在跑的图形,完全一样的东西,只是流动相不是一批配的(流动相的成分没变),中间柱子别人用过了,峰型怎么发生了这么大的变化啊?可能的原因是什么啊?是不是柱子出了问题啊? 答:从两个图对比很明显可以看出是柱效严重下降,且伴有肩峰。不同时间配
液相色谱仪流动相盐份高怎么冲洗系统
脱气之后的10%的甲醇水,或者10%的乙腈水(根据你流动相的有机相决定是哪一个)冲洗10倍的柱体积,大约也就是250mm*4.6mm*4.6mm的色谱柱,1.0ml/min的流速冲洗40min的时间。然后在用纯的甲醇或者乙腈,1.0ml/min流速冲洗30min。冲洗色谱柱的时候也就冲洗了系统,这样
液相流动相走光了柱子进去了空气怎么办
偶尔一次没关系的,不过这样对柱子的危害确实很大,要坚决杜绝。出现这种情况首先要让仪器purge充满流动相,然后用甲醇水低流速过柱子1-2小时冲洗
液相流动相走光了柱子进去了空气怎么办
偶尔一次没关系的,不过这样对柱子的危害确实很大,要坚决杜绝。出现这种情况首先要让仪器purge充满流动相,然后用甲醇水低流速过柱子1-2小时冲洗
液相流动相走光了柱子进去了空气怎么办
偶尔一次没关系的,不过这样对柱子的危害确实很大,要坚决杜绝。出现这种情况首先要让仪器purge充满流动相,然后用甲醇水低流速过柱子1-2小时冲洗
液相流动相走光了柱子进去了空气怎么办
偶尔一次没关系的,不过这样对柱子的危害确实很大,要坚决杜绝。出现这种情况首先要让仪器purge充满流动相,然后用甲醇水低流速过柱子1-2小时冲洗
液相流动相走光了柱子进去了空气怎么办
偶尔一次没关系的,不过这样对柱子的危害确实很大,要坚决杜绝。出现这种情况首先要让仪器purge充满流动相,然后用甲醇水低流速过柱子1-2小时冲洗
液质联用须知道这些事
液质联用(LC-MS)又叫液相色谱-质谱联用技术,在药物分析、食品分析和环境分析等许多领域得到了广泛的应用。那么,你对液质联用(LC-MS)了解有多深,知道液质联用接口技术有哪些吗,知道什么是基质效应吗?想要玩儿转液质联用仪,让小编为你总结些经验吧!LC-MS的接口技术有哪些液—质联用接口技术发展分
不要用纯水清洗色谱柱
请不要用纯水清洗色谱柱,样品分析时,流动相中有机溶剂的含量应保持在4%以上。具有大表面积、高机械强度、化学纯度高、优化的表面性质、规则的孔结构、较高的碳链覆盖率是今后HPLC柱新一代填料发展的方向;Kromasil就是这种新一代填料的代表,具有耐高压、宽PH范围、峰形对称、高负载等特点;已被广大分析
液相色谱C18柱堵塞后如何冲洗柱子
C18柱子不能用纯水冲洗,再说本来就堵了,压力很高应该选择压力低的溶剂。如果你确定是堵塞了,就用纯乙腈反冲,先用低一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过1.的流速,如果是真的堵了,可能会压力慢慢降下来的。如果上面方法不行,那还有可能是盐析堵的,
液相色谱C18柱堵塞后如何冲洗柱子
C18柱子不能用纯水冲洗,再说本来就堵了,压力很高应该选择压力低的溶剂。如果你确定是堵塞了,就用纯乙腈反冲,先用低一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过1.的流速,如果是真的堵了,可能会压力慢慢降下来的。如果上面方法不行,那还有可能是盐析堵的,
液相色谱C18柱堵塞后如何冲洗柱子
C18柱子不能用纯水冲洗,再说本来就堵了,压力很高应该选择压力低的溶剂。如果你确定是堵塞了,就用纯乙腈反冲,先用低一点的流速,比如01ml/min,看压力情况,不要超过200bar,再慢慢提高流速,但不要超过1.的流速,如果是真的堵了,可能会压力慢慢降下来的。如果上面方法不行,那还有可能是盐析堵的,
正相色谱法流动相配比选择的原则
正相色谱选择原则与反相色谱相仿,正己烷相当于是在反相色谱中的水相,而乙醇、四氢呋喃或氯仿等相当然于反相色谱中的乙腈或甲醇,三氟乙酸和三乙胺也是用来调节PH值的,但有一个问题要注意,一般 正相色谱不用缓冲盐,因为正相色谱一般只用有机溶剂,不用水相,所以与缓冲盐不溶解。而通常正乙烷的量都是超过50%的。
手性分析之流动相方法优化
1、 流动相 手性分析很关键的一项是流动相的选择,手性分析一般都采用正相,使用zui多的流动相是正己烷、正庚烷、乙醇和异丙醇这四种,其中起洗脱作用的流动相是乙醇和异丙醇,正己烷和正庚烷用来调节流动相的洗脱强度。正己烷和正庚烷对于样品分离没有什么太大的影响,不会改变选择性和分离度,通常都可以混用,
哪些因素会影响色谱柱的使用寿命?
色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。 一、注意流动相因素 1.流动相pH 不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mg·L-1,且在pH 1~
与色谱柱相关的问题汇总(十)
91.流动相中加入四氢呋喃对柱子有损害吗?我现在分析一样品流动相中用到20%的四氢呋喃才能把峰分到基线.但柱子只能用一个星期分离效果就不好了.请问是四氢呋喃损坏了柱子吗? 答:四氢呋喃(THF)是反相色谱中洗脱能力极强的溶剂,比甲醇和乙腈都强很多。在流动相中加入THF能改善某些难分离的物
手性柱分析流动相方法优化
手性分析很关键的一项是流动相的选择,手性分析一般都采用正相,使用zui多的流动相是正己烷、正庚烷、乙醇和异丙醇这四种,其中起洗脱作用的流动相是乙醇和异丙醇,正己烷和正庚烷用来调节流动相的洗脱强度。正己烷和正庚烷对于样品分离没有什么太大的影响,不会改变选择性和分离度,通常都可以混用,不过正庚烷比正己