凯氏定氮法实验的注意事项
(1) 样品应是均匀的。固体样品应预先研细混匀,液体样品应振摇或搅拌均匀。(2) 样品放入定氮瓶内时,不要沾附颈上。万一沾附可用少量水冲下,以免被检样消化不完全,结果偏低。(3) 消化时如不容易呈透明溶液,可将定氮瓶放冷后,慢慢加入30%过氧化氢(H2O2)2-3ml,促使氧化。(4) 在整个消化过程中,不要用强火。保持和缓的沸腾,使火力集中在凯氏瓶底部,以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下,使氮有损失。(5) 如硫酸缺少,过多的硫酸钾会引起氨的损失,这样会形成硫酸氢钾,而不与氨作用。因此,当硫酸过多的被消耗或样品中脂肪含量过高时,要增加硫酸的量。(6) 加入硫酸钾的作用为增加溶液的沸点,硫酸铜为催化剂,硫酸铜在蒸馏时作碱性反应的指示剂。(7) 混合指示剂在碱性溶液中呈绿色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈红色。如果没有溴甲酚绿,可单独使用0.1%甲基红乙醇溶液。(8) 氨是否完全蒸馏出来,可用pH试纸试馏出液是......阅读全文
凯氏定氮法公式
凯氏定氮法计算公式:X=*F*100%。式中,X表示样品中蛋白质的百分含量,V1表示样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积,V2表示试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积,N表示硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度,0。014表示1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数,m表示样品的质量或体积,F表示氮换算为蛋白质的
凯氏定氮法详解
凯氏定氮法(英语:Kjeldahl method,全称凯耶达尔定氮法,简称凯氮法)是分析化学中一种常用的确定有机化合物中氮含量的检测方法。这种方法是由凯耶达尔于在1883年发明。凯 氏定氮法是分析有机化合物含氮量的常用方法。要测定有机物含氮量,通常是设法使其转变成无机氮,再进行测定。一、原理: 凯氏
凯氏定氮法原理
凯氏定氮法原理是:蛋白质是含氮的有机化合物。蛋白质与浓硫酸和催化剂一同加热硝化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,并换算成蛋白质含量。含氮量*6.25=蛋白含量。凯氏定氮法的注意事项:1、样品应是均匀
凯氏定氮法详解
凯氏定氮法(英语:Kjeldahl method,全称凯耶达尔定氮法,简称凯氮法)是分析化学中一种常用的确定有机化合物中氮含量的检测方法。这种方法是由凯耶达尔于在1883年发明。凯 氏定氮法是分析有机化合物含氮量的常用方法。要测定有机物含氮量,通常是设法使其转变成无机氮,再进行测定。一、原理:凯氏定
凯氏定氮法原理
凯氏定氮法原理:即在有催化剂的条件下,用浓硫酸硝化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨。随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收,再以标准酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法。从凯氏定氮原理可以知道:凯氏定氮法
凯氏定氮法的应用原理
凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定
凯氏定氮法的相关介绍
凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1833年建立的,现已发展为常量、微量、平微量凯氏定氮法以及自动定氮仪法等,是分析有机化合物含氮量的常用方法。 凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右(12%~一19%),因此,通过测定物质中的含氮量便可估算出物质中的总蛋白质含量(假设测
凯氏定氮法的原理简介
蛋白质是含氮的有机化合物。蛋白质与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,并换算成蛋白质含量。含氮量*6.25=蛋白含量 1.有机物中的胺根在强热和CuSO4,浓H2SO4
凯氏定氮法的操作介绍
1、样品处理:精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml液体样品(约相当氮30-40mg),移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸铜,6g硫酸钾及20毫升硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上,小火加热,待内容物全部
凯氏定氮法的应用特点
凯氏定氮法的普遍适用性、精确性和可重复性已经得到了国际的广泛认可。它已经被确定为检测食品中蛋白质含量的标准方法。但是,这种方法并不能给出真实的蛋白质含量,因为所测定的氮可能不仅仅是由蛋白质转化来的。这可以从2007年美国宠物食品污染事件和2008年中国毒奶粉事件等食品安全事件中被体现:三聚氰胺,一种
凯氏定氮法的换算系数
蛋白质中的氮含量一般为15~17.6%,按16%计算乘以6.25即为蛋白质。乳制品6.38面粉5.70玉米、高粱6.24花生5.46米5.95大豆及其制品5.71肉与肉制品6.25大麦、小米、燕麦、裸麦5.83芝麻、向日葵5.30
凯氏定氮法的操作步骤
1、样品处理:精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml液体样品(约相当氮30-40mg),移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中,加入0.2g硫酸铜,6g硫酸钾及20毫升硫酸,稍摇匀后于瓶口放一小漏斗,将瓶以45度角斜支于有小孔的石棉网上,小火加热,待内容物全部炭化
实验求证常规凯氏定氮法的不足之处和改进方法
以经典的微量凯氏定氮法为基础,对消化装置进行了一定的研究和改进,使消化时间大大缩短;并针对混合指示剂必须现用现配且滴定终点不易判断的不足,选用酸度计代替混合指示剂判断滴定的终点,使测定结果的准确度提高。实验表明,改良后的蛋白质含量测定方法不仅操作简便,而且污染减少,结果更加准确。 1 试验材料
凯氏定氮法是什么
凯氏定氮法蛋白质测定的国标规定方法——凯氏定氮法介绍【GB/T 5009.5—1985】食品中蛋白质的测定方法本标准适用于各类食品中蛋白质的测定。1 原理蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或
凯氏定氮法所需仪器
定氮蒸馏装置:1.安全管2.导管3.汽水分离管4.样品入口5.塞子6.直型冷凝管7.吸收瓶8.隔热液套9.反应管10.蒸汽发生瓶
凯氏定氮法结果偏高
凯氏定氮法以0.01N硫酸或0.01N盐酸标准溶液定至灰色或蓝紫色为终点。凯氏定氮法过去是将有机氮破坏,转变为铵盐,加苛性碱将氨蒸出,用标准酸吸收,再用标准碱回滴。此法手续麻烦,造成误差机会也多。用标准次溴酸在碱性溶液中破坏有机物不需蒸出氨,但结果偏高,现在介绍用硒为分解有机物的催化剂,并且不用蒸出
凯氏定氮法是什么
1、凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1883年建立的,现已发展为常量、微量、平微量凯氏定氮法以及自动定氮仪法等,是分析有机化合物含氮量的常用方法。 凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右(12%~一19%),因此,通过测定物质中的含氮量便可估算出物质中的总蛋白质含量(假设测
凯氏定氮法是什么
1、凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1883年建立的,现已发展为常量、微量、平微量凯氏定氮法以及自动定氮仪法等,是分析有机化合物含氮量的常用方法。 凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右(12%~一19%),因此,通过测定物质中的含氮量便可估算出物质中的总蛋白质含量(假设测
凯氏定氮法是什么
蛋白质测定的国标规定方法——凯氏定氮法介绍【GB/T 5009.5—1985】食品中蛋白质的测定方法本标准适用于各类食品中蛋白质的测定.1 原理蛋白质是含氮的有机化合物.食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵.然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶
什么是凯氏定氮法?
简单地说,凯氏定氮法是一种检测物质中“氮的含量”的方法。蛋白质是一种含氮的有机化合物,食品中的蛋白质经硫酸和催化剂分解后,产生的氨能够与硫酸结合,生成硫酸氨,再经过碱化蒸馏后,氨即成为游离状态,游离氨经硼酸吸引,再以硫酸或盐酸的标准溶液进行滴定,根据酸的消耗量再乘以换算系数,就可以推算出食品中的蛋白
凯氏定氮法是什么
凯氏定氮法蛋白质测定的国标规定方法——凯氏定氮法介绍【GB/T 5009.5—1985】食品中蛋白质的测定方法本标准适用于各类食品中蛋白质的测定.1 原理蛋白质是含氮的有机化合物.食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵.然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或
凯氏定氮法-详细步骤
根据凯氏定氮原理测定需要三个步骤,即消解、蒸馏、滴定。化学方程式有:[1].(NH4)2SO4+2NaOH高温蒸气Na2SO4+2H2O+2NH3↑[2].NH3+H3BO3→NH4H2BO3
凯氏定氮法常用试剂
所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。1 硫酸铜。2 硫酸钾。3 硫酸。4 2%硼酸溶液。5 混合指示液:1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份0.1%甲基红乙醇溶液与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。6 30%氢氧化钠溶液。7 0.025mol/L硫酸标准溶
凯氏定氮法的计算方法
X:样品中蛋白质的百分含量,g;V1:样品消耗硫酸或盐酸标准液的体积,ml;V2:试剂空白消耗硫酸或盐酸标准溶液的体积,ml;N:硫酸或盐酸标准溶液的当量浓度;0.014:1N硫酸或盐酸标准溶液1ml相当于氮克数;m:样品的质量(体积),g(ml);F:氮换算为蛋白质的系数。
凯氏定氮法的反应式
蛋白质是含氮的有机化合物。蛋白质与浓硫酸和催化剂一同加热硝化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,并换算成蛋白质含量。含氮量*6.25=蛋白含量凯氏定氮法1.有机物中的氨在强热和CuSO4,浓H2SO4
粗蛋白的测定——凯氏定氮法
凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收,再以标准盐酸滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,蛋白质含量=含氮量*
mtt实验法注意事项
加药时间主要看你的实验目的、细胞的生长速度以及你的铺板密度。MTT最好还是吸出来,因为倒的力度太小,溶液倒不干净;力度太大又可能把结晶也倒掉了。如果用枪头吸取,可以倾斜30度慢慢地吸,一定不要把结晶吸出来,也可以用注射器吸取。总的原则就是既要把MTT溶液吸干净,又不能让结晶有所损失,否则都将影响最后
实验室分析设备自动凯氏定氮法的操作方法
1)称取0.50-1.00g样品,置于消化瓶内,加入硫酸铜与硫酸钾制成的片剂两片,加入浓硫酸10ml,将消化瓶置于消化炉中,消化瓶放入消化炉后,用连接管连接密封住消化瓶,开启抽气装置,开启消化炉电源,消化液完全澄清并呈蓝绿色后,再消化30min,样品消化完毕。2)取出消化瓶,移装于自动凯氏定氮仪中,
实验室分析设备微量凯氏定氮法的操作方法
将消化完全的消化液冷却后,完全转入100ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀。按图装好微量定氮装置,准确移取消化稀释液10ml于反应管中,经漏斗再加入10ml、400g/l氢氧化钠溶液使呈强碱性,用少量蒸馏水洗漏斗数次,夹好漏斗夹,进行水蒸气蒸馏。冷凝管下端预先插入盛有10ml、40g/l(或20g/
DNA印迹法的实验的注意事项
1,操作时戴手套,严禁用手接触凝胶和硝酸纤维素膜,2,转移时,滤纸与膜、膜与凝胶、凝胶与滤纸桥之间均不能有气泡,否则影响DNA转移,3,凝胶易碎,操作时应格外小心,4,硝酸纤维素膜上的DNA固定非常重要,固定不好时DNA·在杂交过程中会脱落下来,烤膜温度过高,膜脆性增加,易碎,5,大片段DNA转移效