启动子捕获的概念和方法

中文名称启动子捕获英文名称promoter trapping定 义用于确定基因组DNA启动子区域的一项技术。用做检测的载体含有报道基因可作表达的标记,但缺乏启动子,将拟检测的DNA序列克隆入这种载体的适当位置,导入细胞或个体,从报道基因表达的程度可分析出启动子的存在与否及其强弱。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)......阅读全文

反乳化作用的概念和方法

乳状液的分散相小液珠聚集成团,形成大液滴,最终使油水两相分层析出的过程。破乳方法可分为物理机械法和物理化学法。物理机械法有电沉降、过滤、超声等;物理化学法主要是改变乳液的界面性质而破乳,如加入破乳剂。

物种丰富度的概念和检测方法

物种丰富度即系统中物种的数目,是最简单、最直观的群落物种多样性测度方法,进而反映生物多样性。在研究实践中,常用单位面积内的物种数目(密度)或一定数量的生物个体中(或生物量中)的物种数目。这两种方法的应用范围各有侧重,前者多用于植物群落物种多样性的调查,而后者则主要用于水域物种多样性的研究。除此之外,

诱导型启动子的定义和种类

已从动物、植物、病毒及微生物中分离到许多适用于植物的启动子。根据作用方式及功能可将启动子分为3 类:组成型启动子、诱导型启动子和组织特异型启动子。 植物基因工程中常采用的终止子是胭脂碱合成酶的nos终止子和Rubisco小亚基基因的3′端区域。

常用的分离方法萃取的概念和应用

萃取,又称溶剂萃取或液液萃取,亦称抽提,是利用系统中组分在溶剂中有不同的溶解度来分离混合物的单元操作。即,是利用物质在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使溶质物质从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中的方法。广泛应用于化学、冶金、食品等工业,通用于石油炼制工业。另外将萃取后两种互不相溶

启动子克隆方法研究进展(5)

2 讨论  以上介绍的几种方法基本代表了现有的启动子克隆方法,它们分别具有不同的特点和适用范围。  利用启动子探针载体筛选启动子时,不需要知道具体的基因序列,避免了引物设计,并能获得大量的启动子片段;其缺点是需要构建1个穿梭质粒,建库、转化、筛选,工作量大,费时费力,而且克隆、亚克隆的过程繁琐。因此

启动子克隆方法研究进展(3)

1.4 利用载体或接头的染色体步行技术克隆基因启动子   这类方法的第一步都是酶切基因组DNA,连接载体或接头,既可以用pUCl8等质粒载体,也可以使用λDNA等噬菌体载体,只要选用的载体带有合适的酶切位点;同样根据实验需要,接头既可以是双链也可以是单链,然后根据基因组DNA序列设计的特异引物和载体

启动子克隆方法研究进展(2)

 1.3 环状PCR  环状PCR包括I-PCR(Inverse-PCR)和P-PCR(Panhandle-PCR)。这2种PCR都是根据一端已知序列设计的嵌套式引物进行PCR。  1.3.1 I-PCR I-PCR是1988年由Triglia最早提出的一种基于PCR的改进的染色体步行方法。    

启动子克隆方法研究进展(4)

1.6 TAlL-PCR  很早就有用随机引物的PCR,但由于无法有效地控制由随机引物引发的非特异产物的产生,所以一直未能广泛应用。近年来由IJiu等设计的TAIL-PCR(Termal Asymmetric Interlaced PCR)又叫热不对称交错PCR,则解决了这个问题,后来有研究表明,经

启动子克隆方法研究进展(1)

随着基因工程的发展,常常需要构建一种能高水平表达异源蛋白质的表达载体。启动子对外源基因的表达水平影响很大,是基因工程表达载体的重要元件。因此研究启动子的克隆方法,对研究基因表达调控和构建表达载体至关重要。  迄今为止,国外尚未见到有关启动子克隆方法的综述性报道,国内仅孙晓红等曾就启动子的结构、分类、

诱导型启动子的功能和应用特点

已从动物、植物、病毒及微生物中分离到许多适用于植物的启动子。根据作用方式及功能可将启动子分为3 类:组成型启动子、诱导型启动子和组织特异型启动子。 植物基因工程中常采用的终止子是胭脂碱合成酶的nos终止子和Rubisco小亚基基因的3′端区域。

动物细胞培养的概念和方法

动物细胞培养:从动物机体中取出相关的组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,生长,增殖。1、细胞或组织。2、常用方法物理:剪刀剪碎,化学法:胰蛋白酶,胶原蛋白酶3、制作细胞悬浮液,方法:加培养液。形成细胞悬浮液4、培养细胞株,原代培养,传代培养5、形成细胞系,传代培养,遗传物质的改变。

免疫学标记的概念和方法特点

免疫学标记(Immune Genetic Markers)是以动物的免疫学特征为遗传标记,主要指:红细胞抗原、白细胞抗原、胸腺细胞抗原等。早在1900年,Ehrlich和Morgenroth指出山羊红细胞表面存在抗原,并证明这些抗原具有个体差异;20世纪80年代初,人们转向白细胞抗原的研究,即主要组

界面张力仪的概念和测量方法

界面是指两相接触的约几个分子厚度的过渡区,如其中一相为气体,这种界面通常称作为表面。严格说表面应是液体和固体与其饱和蒸汽之间的界面,但习惯上把液体或固体与空气的界面称为液体或固体的表面。常见的界面有:气-液界面,气-固界面,液-液界面,液-固界面,固-固界面。与表面张力不同,处在界面层的分子,一方面

放射分析法的概念和主要方法

利用放射性核素及核射线对各种元素或化合物进行体外分析(主要是定量分析)的各种方法,统称放射分析。 主要方法有:放射分析法、放射化学分析、活性分析、激发X射线荧光分析法、穆斯堡尔共振谱、正电子堙没法、核磁共振法等。

分批补料式培养的概念和方法

分批补料式培养是指先将一定量的培养液装入反应器,在适宜的条件下接种细胞,进行培养,使细胞不断生长,产物不断形成,而在此过程中随着营养物质的不断消耗,不断地向系统中补充新的营养成分,使细胞进一步生长代谢,直到整个培养结束后取出产物。

环境温度的概念和测量方法

环境温度是表示环境冷热程度的物理量,测量方法有干球温度法、湿球温度法、黑球温度法。

界面张力仪的概念和测量方法

界面是指两相接触的约几个分子厚度的过渡区,如其中一相为气体,这种界面通常称作为表面。严格说表面应是液体和固体与其饱和蒸汽之间的界面,但习惯上把液体或固体与空气的界面称为液体或固体的表面。常见的界面有:气-液界面,气-固界面,液-液界面,液-固界面,固-固界面。与表面张力不同,处在界面层的分子,一方面

淀粉酶的概念和制备方法介绍

淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶类总称,通常通过淀粉酶催化水解织物上的淀粉浆料,由于淀粉酶的高效性及专一性,酶退浆的退浆率高,退浆快,污染少,产品比酸法、碱法更柔软,且不损伤纤维。淀粉酶的种类很多,根据织物不同,设备组合不同,工艺流程也不同,所用的退浆方法有浸渍法、堆置法、卷染法、连续洗等,由于淀粉酶退浆

形态学标记的概念和方法特点

形态标记(Morphological Markers)是指肉眼可见的或仪器测量动物的外部特征 (如毛色、体型、外形、皮肤结构等),以这种形态性状、生理性状及生态地理分布等待征为遗传标记,研究物种间的关系、分类和鉴定。形态学标记研究物种是基于个体性状描述,得到的结论往往不够完善,且数量性状很难剔除环境

秩和检验效能评估方法的概念和用途

秩和检验效能评估方法主要是用于评估秩和检验在特定条件下正确检测出差异的能力。以下是关于秩和检验效能评估方法的一些介绍:一、模拟研究法建立数据模型:根据实际问题设定数据生成模型,确定总体分布类型、参数取值、样本量大小以及处理效应等。例如,可以假设总体为偏态分布,设定不同的均值和标准差,同时确定两组数据

半缩酮的基本概念和制备方法

半缩醛醛和醇在酸的催化下,醛的羰基被醇的羟基加成,原有的羰基碳上连接有一个醇羟基和一个醚键。一般来说半缩醛都是不稳定的,要么继续生成缩醛,要么分解重新回到醛和醇。半缩醛是一类同一碳上连有一个羟基,一个烷氧基和一个氢的有机化合物。半缩醛由醛与醇发生亲核加成反应生成,烷氧基来自醇,其它部分来自醛。一般的

基因共转染的概念和方法介绍

基因工程中将两个以上的基因同时导入感受态真核细胞的方法,称作共转化(cotransformation,也称共转染)。将目的基因表达载体DNA 和标记基因表达载体DNA 混合后共同转移到靶细胞中,分别使用标记基因与目的基因对应的选择剂进行两次筛选,最后可得到复合转导的转化子。在磷酸钙沉淀物中,两种物理

免疫组化的概念和常用方法

概念和常用方法介绍1、定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。2、原理根据抗原抗体反应和化学显色原

细胞学标记的概念和方法特点

细胞遗传标记(Cytological Genetic Markers )是指对处理过的动物个体染色体数目和形态进行分析,主要包括:染色体核型和带型及缺失、重复、易位、倒位等。一个物种的核型特征即染色体数目、形态及行为的稳定是相对的,故可作为一种遗传标记来测定基因所在的染色体及在染色体上的相对位置,染

关于核酸疫苗的质粒载体和启动子的选择

  真核表达质粒是核酸疫苗的主体,表达载体表达抗原蛋白的能力越强,诱发宿主产生的免疫应答能力越强。不同类型的启动子/增强子、内含子序列、翻译起始序列、转录终止序列、mRNA的稳定性等调控元件可直接影响基因表达效率,其中启动子是影响核酸疫苗表达的最重要因素。RSV启动子/增强子的表达水平比SV高100

激光首次用于抛掷和捕获单原子

据英国《新科学家》杂志网站近日报道,韩国科学家首次使用激光来抛掷和捕获极冷的单原子,这项技术将来可用于组装量子计算机。相关研究刊发于预印本杂志网站。 为将几乎与绝对零度(零下273.15℃)一样冷的原子排列成不同形状,研究人员通常会使用光镊来抓取和携带它们。韩国高级科学技术研究院研究人员希望找到

柱色谱法的概念和试验方法

柱色谱法是最原始的色谱方法,这种方法将固定相注入下端塞有棉花或滤纸的玻璃管中,将被样品饱和的固定相粉末摊铺在玻璃管顶端,以流动相洗脱。常见的洗脱方式有两种,一种是自上而下依靠溶剂本身的重力洗脱,一种是自下而上依靠毛细作用洗脱。收集分离后的纯净组分也有两种不同的方法,一种方法是在柱尾直接接受流出的溶液

光谱分析的概念和技术方法介绍

根据物质的光谱来鉴别物质及确定它的化学组成和相对含量的方法叫光谱分析.其优点是灵敏,迅速.历史上曾通过光谱分析发现了许多新元素,如铷,铯,氦等.根据分析原理光谱分析可分为发射光谱分析与吸收光谱分析二种;根据被测成分的形态可分为原子光谱分析与分子光谱分析。光谱分析的被测成分是原子的称为原子光谱,被测成

生物化学标记的概念和方法特点

生化遗传标记(Biochemical Genetic Markers )是以动物体内的某些生化性状为遗传标记,主要指血型、血清蛋白及同工酶。 20世纪60年代以来,蛋白电泳技术作为检测遗传特性的一种主要方法得到了广泛的应用。蛋白电泳所检测的主要是血浆和血细胞中可溶性蛋白和同工酶中氨基酸的变化,通过对

目镜测微尺的概念和使用方法

目镜测微尺,是指配装在显微镜目镜中的刻有尺度对比线的玻璃片,经校正后用于测量被观测物体的大小。校正目镜测微尺时,把目镜的上透镜旋下,将目镜测微尺的刻度朝下轻轻地装入目镜的隔板上,把镜台测微尺置于载物台上,刻度朝上。先用低倍镜观察,对准焦距,视野中看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺与镜台测