启动子捕获的概念和方法

中文名称启动子捕获英文名称promoter trapping定 义用于确定基因组DNA启动子区域的一项技术。用做检测的载体含有报道基因可作表达的标记,但缺乏启动子,将拟检测的DNA序列克隆入这种载体的适当位置,导入细胞或个体,从报道基因表达的程度可分析出启动子的存在与否及其强弱。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)......阅读全文

启动子捕获的概念和方法

中文名称启动子捕获英文名称promoter trapping定  义用于确定基因组DNA启动子区域的一项技术。用做检测的载体含有报道基因可作表达的标记,但缺乏启动子,将拟检测的DNA序列克隆入这种载体的适当位置,导入细胞或个体,从报道基因表达的程度可分析出启动子的存在与否及其强弱。应用学科生物化学与

外显子捕获的概念和方法

外显子捕获(exon trapping) 是构建一种载体,从其插入片段中识别和回收外显子序列,从而克隆目的基因。捕获外显子的载体pETV—SD是一种反转录病毒穿梭载体,即可在不同种生物中如大肠杆菌和酵母,细菌和哺乳动物细胞等进行复制的载体。因为凡是有内含子和外显子的基因在转录后都要经过RNA剪接,这

启动子的的概念和特性

启动子是RNA 聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA 序列,它含有RNA 聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列,多数位于结构基因转录起始点的上游,启动子本身不被转录。但有一些启动子(如tRNA启动子)位于转录起始点的下游,这些DNA序列可以被转录。启动子的特性最初是通过能增加或降低基因转录速率

启动子封堵的概念

中文名称启动子封堵英文名称promoter occlusion定  义上游启动子对下游启动子的阻碍作用。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),基因表达与调控(二级学科)

启动子清除的概念

聚合酶转录时,首先结合到启动子上,找到特异结合位点,激活后起始转录。 特异性结合的聚合酶-启动子复合物连接紧密,如果转录要延长需要聚合酶的前进,只有脱离结合的启动子才可以。聚合酶离开结合的启动子以延伸转录产物的过程就叫启动子清除。

基因捕获技术的概念

基因捕获技术是最具应用前景的基因克隆方法之一。利用该技术建立的随机插入突变的突变体文库,可用于寻找、鉴定和研究大量未知功能和已知功能的活化基因,它是继自然突变、物理突变和化学突变之后发展起来的新的分子生物学方法。基因捕获载体是带有报告基因和/或选择标记基因的不完整的基因表达载体;这些载体所带的基因只

雄蛾捕获量的概念

中文名称雄蛾捕获量英文名称catches of male moths定  义诱捕器捕获雄蛾的数量。应用学科生态学(一级学科),化学生态学(二级学科)

克隆启动子的方法

随着基因工程的发展,常常需要构建一种能高水平表达异源蛋白质的表达载体。启动子对外源基因的表达水平影响很大,是基因工程表达载体的重要元件。因此研究启动子的克隆方法,对研究基因表达调控和构建表达载体至关重要。迄今为止,国外尚未见到有关启动子克隆方法的综述性报道,国内仅孙晓红等曾就启动子的结构、分类、克隆

克隆启动子的方法

随着基因工程的发展,常常需要构建一种能高水平表达异源蛋白质的表达载体。启动子对外源基因的表达水平影响很大,是基因工程表达载体的重要元件。因此研究启动子的克隆方法,对研究基因表达调控和构建表达载体至关重要。迄今为止,国外尚未见到有关启动子克隆方法的综述性报道,国内仅孙晓红等曾就启动子的结构、分类、克隆

加帽的概念和方法

加帽是在催化剂N-甲基咪唑(NMI)的催化下,通过脱水乙酸酐对5’羟基的乙酰化完成。当合成完成时,寡核苷酸通过琥珀酸酯仍连于固相载体上,碱基的环外基团仍携有保护基团。

基因捕获的方法原理

基因捕获的方法酷似以报告基因为诱饵来捕获基因。其基本过程是将一含报告基因的DNA 载体随机插入基因组,从而产生内源基因失活突变,并通过报告基因的表达激活提示插入突变的存在,及突变内源基因表达特点。通过筛选得到的插入突变的ES 细胞克隆经囊胚注射转化为基因突变动物模型,进而分析表型来研究突变基因功能。

脱核的概念和方法

又称脱核。是指人工将核从细胞中除去。(1)利用离心力使海胆卵的核或变形虫的核靠向一边,然后把细胞从中心部切成两段,再用微量吸管将核吸出;(2)用紫外线或射线照射核的部位,把核杀死;(3)对于伞藻(Acet-alularia)那种的大形细胞,因核位于细胞的一端,所以可把核所在的那一端的细胞部分切去。去

外植的概念和方法

中文名称外植英文名称explantation定  义把活组织从原生长处移植到体内其他部位或体外进行培养的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

细胞治疗的概念和方法

细胞治疗是指给机体输入细胞制剂,以激活或增强机体的特异性免疫应答。(1)细胞疫苗 包括肿瘤细胞疫苗(如灭活瘤苗、异构瘤苗等)、基因修饰的瘤苗和树突状细胞疫苗等。(2)干细胞移植 干细胞具有自我更新能力和多种分化潜能,在适当条件下可被诱导分化为多种细胞组织,如脐带血、外周血、骨髓等。(3)过继免疫细胞

启动子的特性和功能介绍

启动子是RNA 聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA 序列,它含有RNA 聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列,多数位于结构基因转录起始点的上游,启动子本身不被转录。但有一些启动子(如tRNA启动子)位于转录起始点的下游,这些DNA序列可以被转录。启动子的特性最初是通过能增加或降低基因转录速率

捕获包被法检测抗体和捕获包被法检测抗体

   捕获包被法(亦称反向间接法)ELISA,首要用于血清中某种抗体亚型成分(如IgM)的测定。以目前常用的IgM测定为例,因血清中针对某种抗原的特异性IgM和IgG同时存在,则后者可搅扰IgM的测定。因此先将一切血清IgM(包括异性IgM和非特异性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再测定特异性I

微萃取方法的概念和应用

微萃取是另一种形式的液 - 液萃取技术,采用0.001-0.01范围的相比率值(V)进行萃取过程。与传统的液 - 液萃取相比,它采用小体积有机溶剂。微萃取提供的回收率较差,但是在有机相中的欲测物质的浓缩大大地增高。此外,使用的溶剂量也大大地减少。在容量瓶中进行萃取,可以选择比水密度低的有机溶剂,结果

末端分析的概念和产业方法

中文名称末端分析英文名称terminal analysis定  义常指蛋白质肽链两端氨基酸的分析。对于N端分析有三种方法:桑格-库森法、丹璜酰法和埃德曼降解法,后者可连续测入,并可自动化操作;对于C端分析,主要用外肽酶,如一些羧肽酶,将肽链的羧基末端氨基酸切下分析。应用学科生物化学与分子生物学(一级

合成化学的概念和方法

合成化学是化学的一个重要分支,主要研究如何通过化学反应和方法,将简单的起始原料转化为具有特定结构和性能的复杂化合物。合成化学的重要性体现在多个方面:创造新物质:为人类提供了各种各样的新材料,如药物、高分子材料、催化剂等,推动了科技进步和社会发展。解决实际问题:例如合成新型药物来治疗疾病,研发高性能材

仪器分析方法的概念和种类

仪器分析方法:以物质的物理和物理化学性质为基础的分析方法称物理和物理化学分析法。这类方法都需要较特殊的仪器,通常称为仪器分析方法。最主要的仪器分析方法有以下几种:1、光学分析法根据物质的光学性质所建立的分析方法。主要包括:分子光谱法、分光分析法、分子荧光及磷光分析法;原子光谱法,如原子发射光谱法、原

分子标记的概念和方法特点

分子标记(Molecular Genetic Markers)是以个体间遗传物质内核苷酸序列变异为基础的遗传标记,是 DNA 水平遗传多态性的直接的反映。与其他几种遗传标记——形态标记、同工酶标记、细胞标记相比,DNA 分子标记具有的优越性有:大多数分子标记为共显性,对隐性的农艺性状的选择十分便利;

翻滚启动子的功能和应用特点

中文名称翻滚启动子英文名称flip-flop promoter定  义可颠倒的启动子。最早见于沙门氏菌的两种鞭毛蛋白基因的交替表达。这些基因都受一个可以颠倒的DNA片段控制,在一个顺式作用因子的调节下,这个片段从不同的方向驱动不同基因的表达,后来发现奇异变形杆菌的氯霉素抗性基因和珠蛋白基因等基因的表

信使RNA的启动子和转录因子

  一定义:酶识别、结合、开始转录的一段DNA序列。强启动子2秒钟启动一次转录,弱启动子10分钟一次。  二原核生物:大肠杆菌在起点上游约-10碱基对处有保守序列TATAAT,称为pribnow box,有助于局部解链。在其上游还有TTGACA,称为-35序列,提供RNA聚合酶识别的信号。  三真核

增强子捕获的方法特点

中文名称增强子捕获英文名称enhancer trapping定  义用于确定DNA序列中是否包含增强子功能的一项技术。用做检测的载体含有启动子和报道基因可作表达的标记,但缺乏增强子,将拟检测的DNA序列克隆入这种载体的适当位置,导入细胞或个体,从报道基因表达的程度可分析出增强子的存在与否及其强弱。应

细胞培养概念和方法

细胞培养(英语:cell culture)是一种现代生物学技术,是将真核生物或原核生物细胞培养在受控制的状态下,使其生长。这项技术的发展与方法,与组织培养或器官培养关系密切。细胞培养的例行步骤包括解冻细胞、换盘、分盘、换细胞培养液、结冻细胞等步骤。细胞培养分为两大类:贴壁培养(adherent cu

检验仪器的基础概念和维护方法

    检验技术在人类生产生活中有着广泛的应用,是各行各业进行检测、诊断的重要工具。现代化检验仪器的诞生和使用,更是大大提高了工作效率,保证了检验质量。不过,人们的日常使用和保养影响着检验仪器的度和寿命,因此使用者需要掌握检验仪器相关的基础知识,并了解一些保养维护方面的知识。   检验仪器的基础概念

非组蛋白的概念和检测方法

非组蛋白主要是指与特异DNA序列相结合的蛋白质,所以又称序列特异性DNA结合蛋白(sequence specific DNA binding protein)。利用凝胶延滞实验(gel retardation assay),可以在细胞抽提物中进行检测。首先制备一段带有放射性标记的已知特异序列的DNA

免疫的概念和种类及获得方法

免疫(Immunity), 所谓“免疫”,顾名思义即免除瘟疫(古代的瘟疫指各种疫病)。免疫是指机体免疫系统识别自身与异己物质,并通过免疫应答排除抗原性异物,以维持机体生理平衡的功能。1、天然免疫:个体与生俱有,一般为非特异性免疫,如吞噬细胞的作用。2、获得性免疫1)自动获得性免疫:一般免疫时间长。可

酶免疫测定的概念和方法

酶免疫测定(enzyme immunoassay,EIA),是将酶催化作用的高效性与抗原抗体反应的特异性相结合的一种微量分析技术。酶标记抗原抗体后形成的酶标记物,既保留抗原或抗体的免疫活性,又保留酶的催化活性。当酶标记物与待测样品中相应的抗原或抗体相互作用时,可形成酶标记抗原抗体复合物。利用复合物上

反乳化作用的概念和方法

乳状液的分散相小液珠聚集成团,形成大液滴,最终使油水两相分层析出的过程。破乳方法可分为物理机械法和物理化学法。物理机械法有电沉降、过滤、超声等;物理化学法主要是改变乳液的界面性质而破乳,如加入破乳剂。