DNA切口平移的定义
切口平移（nick translation）是切口产生3‘羟基和5’磷酸基团，DNA延伸合成3‘端，5’端被小片段降解，缺口位点沿着双链向3‘端移动，是在体外向DNA分子引入放射性标记核苷酸的技术。......阅读全文
DNA切口平移的定义
切口平移（nick translation）是切口产生3‘羟基和5’磷酸基团，DNA延伸合成3‘端，5’端被小片段降解，缺口位点沿着双链向3‘端移动，是在体外向DNA分子引入放射性标记核苷酸的技术。
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,用
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA 分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA 聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA
双链DNA探针切口平移法
当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'端补上核苷酸,从而使切口沿着DNA链移动,
切口平移法双链DNA探针标记法
切口平移法(nick translation) 当双链DNA分子的一条链上产生切口时,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可将核苷酸连接到切口的3'羟基末端。同时该酶具有从5'→3'的核酸外切酶活性,能从切口的5'端除去核苷酸。由于在切去核苷酸的同时又在切口的3'
切口平移的操作步骤
1、用DNase I处理双链DNA，使之随机产生单链断裂。2、DNA聚合酶I的5‘-3’外切酶活性从断裂处5‘除去一个核苷酸，同时5‘-3'聚合酶活性将一个放射性核素标记的单核苷酸引入到断裂的3'端。3、反应重复进行，结果标记的核苷酸代替了原来的核苷酸残基，形成了放射性的DNA分子。
切口平移法的缺点
切口平移法的缺点：1.放射物质摄入率较低；2.长时间反应后在DNA Pol I的外切酶活性的作用下，将已经掺入的放射性物质游离下来，降低了摄入率；3.必须有高纯度的模板DNA；4.反应后必须除去未反应的放射性dNTP。
切口平移的技术特点
切口平移（nick translation）是切口产生3‘羟基和5’磷酸基团，DNA延伸合成3‘端，5’端被小片段降解，缺口位点沿着双链向3‘端移动，是在体外向DNA分子引入放射性标记核苷酸的技术。
什么是切口平移法？
双链DNA探针的合成方法主要有下列两种:切口平移法和随机引物合成法。切口平移法(nick translation) 利用微量的DNA酶Ⅰ使待标记的双链DNA分子产生若干切口，然后利用DNA聚合酶Ⅰ的5'→3'外切酶活性从从切口的5'端除去核苷酸；同时DNA聚合酶Ⅰ还有5
切口平移法的操作步骤
1、用DNase I处理双链DNA，使之随机产生单链断裂。2、DNA聚合酶I的5‘-3’外切酶活性从断裂处5‘除去一个核苷酸，同时5‘-3'聚合酶活性将一个放射性核素标记的单核苷酸引入到断裂的3'端。3、反应重复进行，结果标记的核苷酸代替了原来的核苷酸残基，形成了放射性的DNA分子。
切口平移法的操作步骤
1、用DNase I处理双链DNA，使之随机产生单链断裂。2、DNA聚合酶I的5‘-3’外切酶活性从断裂处5‘除去一个核苷酸，同时5‘-3'聚合酶活性将一个放射性核素标记的单核苷酸引入到断裂的3'端。3、反应重复进行，结果标记的核苷酸代替了原来的核苷酸残基，形成了放射性的DNA分子。
切口平移法标记探针的步骤
(1)模板 DNA 的制备用限制性内切酶将载体上的外源 DNA 酶切并进行琼脂糖凝胶电泳回收纯化,琼脂糖残留可抑制切口平移反应,因此彻底清除琼脂糖至关重要。也可以用带有外源 DNA 克隆片段的重组载体为模板来切口平移制备探针。(2)切口平移标记将模板 DNA 水溶液、DNase Ⅰ、未标记的三磷酸单
常用DAN探针制备的方法介绍切口平移
切口平移(nick translation)是制备核酸探针的常用方法之一。该方法用 DNase Ⅰ在双链 DNA 内部切开若干个单链切口形成3'-OH 末端,而不打断 DNA 的双链结构;用大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ的5'→3'核酸外切酶活性,从游离5'端降解双链 D
生物素酰化探针的制备实验——切口平移法
在标准的切口平移实验体系中，生物素-11-dNTP取代了dNTP，DNA酶I 的浓度调整到可生成长100~500个核苷酸的范围，其他生物素酰化的核苷酸也可代替生生物素-11-dNTP。实验材料DNA试剂、试剂盒DNA聚合酶dNTP2-疏基乙醇生物素甘油NaClEDTASDS无水乙醇仪器、耗材注射器电
带切口DNA的结构特点
中文名称带切口DNA英文名称nicked DNA定 义双链DNA分子中一条单链上带有一个或多个裂口。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
带切口环状DNA的结构特点
中文名称带切口环状DNA英文名称nicked circular DNA定 义双链环状DNA分子中一条单链上带有一个或多个裂口。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
细胞化学词汇带切口DNA
中文名称：带切口DNA英文名称：nicked DNA定 义：双链DNA分子中一条单链上带有一个或多个裂口。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
细胞化学词汇带切口环状DNA
中文名称：带切口环状DNA英文名称：nicked circular DNA定 义：双链环状DNA分子中一条单链上带有一个或多个裂口。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
缺口平移法为例介绍DNA探针的标记方法
缺口平移法是最常用的探针标记法，反应体系的主要成分有DNA酶I（DNase I）、大肠杆菌DNA聚合酶I（DNA polymerase I）、三种三磷酸脱氧核糖核苷酸、一种同位素标记的核苷酸（如dATP、dTTP、dCTP，”P—dGTP）。首先用适当浓度的DNA酶I在探针DNA双链分子上随机切开若
DNA包装的定义
中文名称DNA包装英文名称DNA packaging定 义常指对病毒的核酸核心用蛋白质外壳进行包裹形成成熟的病毒颗粒的过程。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
过客DNA的定义
中文名称过客DNA英文名称passenger DNA定 义重组在克隆载体中的外源DNA序列。应用学科遗传学（一级学科），分子遗传学（二级学科）
弯曲DNA的定义
中文名称弯曲DNA英文名称bent DNA定 义由于某些蛋白质的结合引起的DNA构象的变化而形成的一种扭曲的DNA分子。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
闭环DNA的定义
闭环DNA（closed circular DNA）没有断口的双链环状DNA，亦称为超螺旋DNA (DNA supercoil)。
接头DNA的定义
接头DNA（adaptor DNA）：一段短的含酶切位点并能与钝性末端或粘性末端匹配的人工合成DNA片段。
质体DNA的定义
中文名称质体DNA英文名称plastid DNA定 义真核生物细胞器质体中存在的DNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
重组DNA的定义
中文名称重组DNA英文名称recombinant DNA;rDNA定 义经人工手段对其序列进行了改造和重新组合的DNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
分支DNA的定义
中文名称分支DNA英文名称branched DNA定 义特指一种人工合成的、由于在结构上整合了带有被保护羟基的核苷衍生物而形成的分支状的寡脱氧核糖核酸。基于分支DNA信号放大的检测法可用于对感染病毒的个体进行病毒量试验，以定量检测RNA或DNA的水平。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸
变性DNA的定义
中文名称变性DNA英文名称denatured DNA定 义由于物理(如过热)或化学(如加入尿素)等因素的影响，使之失去生物活性的DNA分子。不再具有致密的、双链的螺旋结构，而成为松散的和单链的结构。去除变性因素，DNA一般可以复性。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
质体DNA的定义
中文名称质体DNA英文名称plastid DNA定 义真核生物细胞器质体中存在的DNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
松弛DNA的定义
中文名称松弛DNA英文名称relaxed DNA定 义呈非超螺旋状态的环状双链DNA分子。如质粒或病毒DNA基因组，通常是超螺旋结构，在酶或者物理化学因子的作用下双链核酸分子中一条单链出现断裂并导致超螺旋结构破坏，形成带切口的松弛DNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学