重组DNA的定义
中文名称重组DNA英文名称recombinant DNA;rDNA定 义经人工手段对其序列进行了改造和重新组合的DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)......阅读全文
DNA螺距的定义
中文名称DNA螺距英文名称DNA pitch定 义DNA分子中双螺旋沿螺旋轴旋转一周所平移的直线距离。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
变性DNA的定义
中文名称变性DNA英文名称denatured DNA定 义由于物理(如过热)或化学(如加入尿素)等因素的影响,使之失去生物活性的DNA分子。不再具有致密的、双链的螺旋结构,而成为松散的和单链的结构。去除变性因素,DNA一般可以复性。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
互补-DNA的定义
中文名称互补 DNA英文名称complementary DNA;cDNA定 义利用反转录酶以mRNA为模板合成的DNA。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞化学(二级学科)
体外DNA重组技术4
(二)质粒的大量制备:1.将5ml转化菌种接种于500ml LB培养液(含用于筛选的抗生素)中,37℃以225rpm速度振荡培养12~16小时;2.10,000rpm,4℃离心15min收集菌体;3.将细菌悬浮于100ml预冷的STE(0.1M NaCl,10mM Tris.Cl,pH8.0,1mM
体外DNA重组技术2
【注意事项】基因组DNA分子量大,所有操作必须轻柔,酚/氯仿对皮肤有腐蚀作用,应该戴手套操作。二、RNA的制备【实验目的】1.理解生物细胞中RNA制备方法的原理。2.熟悉组织细胞中RNA制备的基本操作。(一)细胞总RNA的提取1.异硫氰酸胍法【实验原理】异硫氰酸胍法提取细胞总RNA是目前常用的提取方
体外DNA重组技术5
(三)DNA酶切片段的回收【实验方法与步骤】1.冻融法:(1)在UV灯下,用手术刀片将含DNA片段的琼脂糖凝胶切下,-70℃冷冻至少 15min,然后在65℃水浴中使胶融化;(2)加入等倍体积TE-饱和酚,剧烈振荡30秒钟,然后-70℃冷冻 15min;(3)室温融化后,12,000rpm离心5mi
体外DNA重组技术1
在体外将两个或多个来源相同或不相同的DNA片段连接成新的重组DNA分子,再转到特定宿主细胞中进行自主复制并表达。这是分子生物学中的基本技术。DNA重组技术的基本程序包括:(1)获得外源DNA:外源DNA是进行DNA重组的目的DNA片段,一般采用 DNA聚合酶链式反应(PCR)或逆转录-DNA聚合酶链
细胞化学词汇DNA重组
中文名称:DNA重组外文名称:DNA recombination类 型:同源重组、位点重组和转座重组作 用:是基因工程中的关键步骤本 质:两个不同姐妹染色体间遗传物质的交换应 用:疫苗开发等
体外DNA重组技术6
六、重组质粒的转化【实验目的】学习和掌握感受态细胞的制备方法和转化实验的基本操作。【实验原理】将重组质粒转入大肠杆菌的过程称为转化。转化所用的大肠杆菌需要用物理或化学方法特殊处理,使重组DNA分子容易进入细胞内,被处理后易于接纳DNA分子的细胞称作感受态细胞。下面介绍感受态细胞的制备。【实验试剂与器
体外DNA重组技术3
【实验试剂与器材】(1)Oligo(dT)纤维素(2)层析柱装置(3)1×上样缓冲液:20mM Tris.Cl (pH7.6),0.5M NaCl,1 mM EDTA.Na2 (pH8.0),0.1%十二烷基肌氨酸钠(SLS)配制方法: 用Tris.HCl、NaCl和EDTA母液,加入各成分确切
DNA重组实验方法
[实验原理]DNA重组是将外源DNA与载体分子连接,这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。DNA重组的方法主要有粘端连接法和平端连接法。 重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2+、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。常用的DNA连接酶是T4噬
DNA重组技术-酶切
实验概要 通过酶切获得可进行体外重组的载体和外源DNA实验原理 DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开,经分离纯化后,用链接酶将其连接,构成新的DNA分子。 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DN
关于重组蛋白的定义介绍
其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。当前重组蛋白的生产主要有四大系统;1.原核表达系统:最常用的大肠杆菌蛋白表达,真核表达系统如酵母,哺乳动物
关于重组人溶菌酶的定义综述
1、名词释义 重组人溶菌酶是一种广谱抗菌、抗病毒药物, 能够杀死毒性微生物并保护自身不受损害, 同时与其他药物相互作用无交叉反应。 2、生物学定义 人源溶菌酶(Human lysozyme,HLZ)属于C型溶菌酶,是一种由130个氨基酸组成的,分子量约为14.7 kD的单体蛋白。其氨基酸
重组活化基因的定义和作用
中文名称重组活化基因英文名称recombination activating gene;RAG定 义参与激活V(D)J DNA重组作用的基因。在V(D)J重组中重组活化基因的产物可调节依赖于重组信号序列的切割作用。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
重组蛋白质的定义
根据其定义,重组蛋白质的产生是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而获得的蛋白质。
重组蛋白的定义是什么?
重组蛋白的产生是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而获得的蛋白质。体外重组蛋白的生产主要包括四大系统:原核蛋白表达,哺乳动物细胞蛋白表达,酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统,提高表达成功率。
DNA疫苗定义
DNA疫苗(DNA vaccine),又称“裸”DNA疫苗(naked DNA vaccine)、基因疫苗(genetic vaccine),亦有核酸疫苗(nucleic acid immunizaiton)、多核苷酸疫苗(poly nucleotide vaccine)等相关名称,是近年来基因治疗
DNA重组的基本信息简介
DNA重组(DNA recombination)实质上指的是遗传重组(genetic recombination),也称为遗传改组(genetic reshuffling),是指两个不同姐妹染色体间遗传物质的交换。DNA重组导致后代产生不同于任一亲本的新性状。真核生物减数分裂期间的DNA重组产生
DNA重组技术的组成部分
上游技术:基因重组、克隆和表达的设计与构建(即DNA重组技术);下游技术:基因工程菌(细胞)的大规模培养、外源基因表达产物的分离纯化过程。广义的基因工程概念更倾向于工程学的范畴。广义的基因工程是一个高度的统一体:上游重组DNA的设计必须以简化下游操作工艺和装备为指导思想;下游过程则是上游重组蓝图的体
重组质粒(dna-recombinant-plasmid)的连接
质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA 片段( <10kb) 且结构简单,质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆,从原理上说是很简单的,先用限制性内切酶切割质粒DNA 和目的DNA 片段,然后体外使两者相连接,再用所得到重组质粒转化细菌,即可完成。但在实际工作中,
DNA-同源重组的关键分子机制
蛋白质与植物基因研究国家重点实验室研究团队揭示 DNA 同源重组的关键分子机制 作为三大DNA代谢途径(DNA 复制、重组、损伤修复)之一,DNA同源重组(Homologous Recombination)是生命体的基本生物事件。它在细胞生长、减数分裂、配子形成、物种进化、DNA双链断裂修复、
重组DNA蛋白制品的特性分析
研发阶段以物理、化学和生物学方法对重组DNA蛋白制品的理化特性、生物学活性、免疫学特性、纯度和杂质等进行严格的特性分析鉴定是确保产品安全有效,建立并确定制品质量标准的基础。需采用广泛的分析技术来展示目标分子的理化性质(分子大小、电荷、等电点、氨基酸组成、疏水性等),以及对糖基化等各种翻译后修饰进
重组PCR技术的定义和原理介绍
1.定义:使两个不相邻的DNA片段重组在一起的PCR称为重组PCR(recombinant PCR)。Mullis等于1986年报道了由PCR扩增的两个DNA片段通过重组合后再经延伸而制备出新的DNA分子。2. 其基本原理:将突变碱基,插入或缺失片段,或一种物质的几个基因片段均设计在引物中,先分段对
生物安全与重组DNA技术
重组DNA技术涉及到组合不同来源的遗传信息,从而创造自然界以前可能从未存在过的遗传修饰生物体(genetically modified organisms,GMOs)。最初,在分子生物学家中有人担心这些生物体可能具有不可预测的不良性状,一旦从实验室逸出将带来生物学危害。这种担心在 197
DNA重组技术:酶切、连接
实验原理: DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开,经分离纯化后,用链接酶将其连接,构成新的DNA分子。限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的粘性末端。 5’…G↓A
丰余DNA的定义
中文名称丰余DNA英文名称redundant DNA定 义在真核生物基因组中具有多个拷贝数的重复DNA序列。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
高度重复DNA的定义
中文名称高度重复DNA英文名称highly repetitive DNA;hyperreiterated DNA定 义真核生物基因组中存在的拷贝数可达数千以上的短核苷酸重复序列,不负责编码蛋白质或RNA,它们在基因组中发挥着各种不同的功能。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级
常居DNA的定义
中文名称: 常居DNA英文名称: resident DNA定义:同一细胞内不同类型DNA的总称。包括细胞核DNA、质粒DNA和噬菌体DNA。
DNA错折叠的定义
中文名称错折叠英文名称misfolding定 义在特定条件下,包括一些病理的条件,线性的长链生物大分子形成没有活性和仅有部分活性的立体结构的折叠过程。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),总论(二级学科)