化学转染法人工脂质体法应用
人工脂质体法采用阳离子脂质体，具有较高的转染效率，不但可以转染其他化学方法不易转染的细胞系，而且还能转染从寡核苷酸到人工酵母染色体不同长度的DNA，以及RNA,和蛋白质。此外，脂质体体外转染同时适用于瞬时表达和稳定表达，与以往不同的是脂质体还可以介导DNA和RNA转入动物和人的体内用于基因治疗。LipoFiterTM脂质体转染试剂(LipoFiterLiposomalTransfectionReagent)是一种适合于把质粒或其它形式的核酸,以及核酸蛋白复合物转染到培养的真核细胞中的高效阳离子脂质体转染试剂。它可以和带负电荷的核酸结合后形成复合物，当复合物接近细胞膜时被内吞成为内体进入细胞质，随后DNA复合物被释放进入细胞核内，至于DNA是如何穿过核膜的，其机理目前还不十分清楚。......阅读全文
脂质体介导的细胞转染实验
实验概要学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。实验原理外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂
贴壁细胞的脂质体转染
一、实验材料1、宿主细胞CHO（贴壁细胞）2、脂质体LIPOFECTAMINE 2000（invitrogen公司）3、6孔细胞培养版4、无血清培养基OPTI-MEM（GIBICO）5、转染级质粒二、实验步骤invitrogen的LIPOFECTAMINE 2000说明书上列举了24孔、12孔、6孔
关于物理转染法的基本介绍
①显微注射 ②电穿孔 ③基因枪 显微注射虽然费力，但是非常有效的将核酸导入细胞或细胞核的方法。这种方法常用来制备转基因动物，但却不适用于需要大量转染细胞的研究。电穿孔法常用来转染如植物原生质体这样的常规方法不容易转染的细胞。电穿孔靠脉冲电流在细胞膜上打孔而将核酸导入细胞内。导入的效率与脉冲
痘苗载体转染细胞实验——DOTAP－法
实验方法原理将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上，外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后，将重组质粒转染病毒感染的细胞，痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分发生同源重组。应用适当的筛选方案，经几轮噬斑纯化，从细胞裂解物中获得重组病毒。实验材料pSCll／pRB21／pSC65／pLW9
方案27.12－脂质体介导的瞬时转染
方案27.12 脂质体介导的瞬时转染 实验材料 靶细胞 DNA
脂质体介导的真核细胞转染实验
脂质体介导短暂表达 脂质体进行稳定转染 哺乳动物细胞的选择标记 实验材料 哺乳动物细胞
脂质体转染的几个实验方法
摘要： 本实验介绍了脂质体转染的几个方法。 实验原理 脂质 体(LR)试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物(1：1)。它适用于把 DNA 转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前条件下最方面的转染方法之一。转染率高，优于磷酸钙法，比它高5-
脂质体介导的真核细胞转染实验
实验材料 哺乳动物细胞试剂、试剂盒 质粒DNA完全培养基氯化铯DMEM仪器、耗材 培养皿培养箱聚苯乙烯管实验步骤 1. 按5×105细胞/孔的量在六孔板中接种指数期生长的细胞，在37℃ 5%CO2培养箱中 培养过夜，直至细胞80%汇片。（如果用100 mm 培养皿代替六孔扳，则培养细胞至80%汇片
脂质体转染的几个实验方法
实验原理 脂质 体(LR)试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物(1：1)。它适用于把DNA 转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前条件下最方面的转染方法之一。转染率高，优于磷酸钙法，比它高5-100倍，能把DNA和RNA转染到各种细胞。用LR进行转染时，首先需要优化转染条件，应找出该批LR对转
脂质体转染的几个实验方法
实验概要本实验介绍了脂质体转染的几个方法。实验原理脂质体(LR)试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物(1：1)。它适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前条件下最方面的转染方法之一。转染率高，优于磷酸钙法，比它高5-100倍，能把DNA和RNA转染到各种细胞。用LR进行转染时，首先
【细胞生物学原创系列三】基因的导入
在完成了基本的细胞培养、使细胞达到较好的状态后，下一步就是将外源的核酸分子导入到细胞中，以观察、检测其对细胞状态产生的影响。 转染是细胞实验最常见的基因导入技术，是将外源核酸分子（DNA或RNA等）导入到哺乳动物细胞内的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核
磷酸钙介导的真核细胞转染实验——高效转染法
实验材料真核细胞试剂、试剂盒完全培养液TEBES仪器、耗材培养箱平板实验步骤1. 转染前一天接种呈指数生长的细胞，密度为5×105/10 cm 平板。加10 ml 完全培养液，在开始转染时细胞数应＜106/平板，以留足够供细胞扩增至少2倍的表面积。2. 用TE缓冲液稀释质粒DNA至1 μg/μ
LSCM荧光表达载体的导入
荧光表达载体的导入 将构建好的荧光表达载体进行大量扩增，并通过质粒抽提试剂盒大量纯化，得到不含有内毒素的纯化质粒。将表达载体导入到培养细胞中后，经过培养即可进行荧光蛋白的检测。而将基因导入哺乳动物培养细胞的方法有很多种，生化转染法是很常用的导入培养细胞方法。常用的转染方法有:磷酸钙转染法和脂质体介导
关于化学沉淀法的应用介绍
化学沉淀法经常用于处理含有汞、铅、铜、锌、六价铬、硫、氰、氟、砷等有毒化合物的废水。利用向废水中投加氢氧化物、硫化物、碳酸盐、卤化物等生成金属盐沉淀可以去除废水中的金属离子，向废水中投加钡盐可用于处理含六价铬的工业废水生成铬酸盐沉淀，向废水中投加石灰生成氟化钙沉淀可以去除水中的氟化物。
细胞转染
脂质体介导法 磷酸钙沉淀法 实验方法原理 外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的
阳离子脂质材料DOTMA和DOPE在脂质体转染实验的应用
本期AVT小编给大家分享一下DOTMA和DOPE在脂质体转染实验中的应用，在前段时间，AVT产品库新添了几款新型注射级阳离子脂质材料，包括DLin-MC3-DMA、DMG-PEG2000，DOTMA等，感兴趣的小伙伴可以去我们的产品图一睹究竟，让我们接着往下看脂质体转染的那些事！脂质体转染实验步骤脂
化学发光分析法的应用
化学发光分析的灵敏度高，是痕量分析的重要手段之一，在环境监测、临床分析、生物化学等领域里，例如污染物测定、酶分析、免疫测定法和痕量金属分析等方面得到广泛的应用。例如，致癌物亚硝胺经热解后产生亚硝酰自由基NO，后者与臭氧反应，产生激发态二氧化氮NO壗，最后成为二氧化氮而发光,可用于亚硝胺的检测,灵敏度
化学发光法的发光现象及应用
化学发光是物质在化学反应过程中，其物质分子吸收化学能产生光的辐射现象，如：REK-20N型化学发光定氮仪是兴化睿科采用化学发光检测原理，待测样品（或标样）被引入到高温裂解炉后，在1050℃左右的高温下，样品被完全气化并发生氧化裂解，其中的氮化物定量地转化为一氧化氮(NO)。样品气经过膜式干燥器脱去其
知识分享：细胞转染原理及常见转染方法的比较
实验原理： 转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。 常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染（永久转染）。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝
物理转染法的主要类型和技术特点
包括：①显微注射②电穿孔③基因枪等，显微注射虽然费力，但是非常有效的将核酸导入细胞或细胞核的方法。这种方法常用来制备转基因动物，但却不适用于需要大量转染细胞的研究。电穿孔法常用来转染如植物原生质体这样的常规方法不容易转染的细胞。电穿孔靠脉冲电流在细胞膜上打孔而将核酸导入细胞内。导入的效率与脉冲的强度
痘苗载体转染细胞实验——CaCl2－法
实验方法原理将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上，外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后，将重组质粒转染病毒感染的细胞，痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分发生同源重组。应用适当的筛选方案，经几轮噬斑纯化，从细胞裂解物中获得重组病毒。实验材料pSCll／pRB21／pSC65／pLW9
细胞转染原理及常见转染方法的比较（一）
实验原理：转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染（永久转染）。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的
细胞转染快准狠GeneCopoeia转染试剂的适用细胞
细胞转染是指将外源基因如DNA，RNA等导入细胞内的一种技术。根据哺乳动物细胞蛋白表达流程，细胞培养完成后需进行细胞转染，根据不同的实验目的可选择不同的转染方法。目前，常用的细胞转染方法主要分为三类途径：物理介导（电穿孔法，基因枪法、显微注射法）、化学介导（脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物
细胞转染快准狠GeneCopoeia转染试剂的适用细胞
细胞转染是指将外源基因如DNA，RNA等导入细胞内的一种技术。根据哺乳动物细胞蛋白表达流程，细胞培养完成后需进行细胞转染，根据不同的实验目的可选择不同的转染方法。目前，常用的细胞转染方法主要分为三类途径：物理介导（电穿孔法，基因枪法、显微注射法）、化学介导（脂质体转染法、磷酸钙共沉淀法、阳离子聚合物
脂质体载体用于直接体内基因转染实验
试剂、试剂盒 氯仿 DC-Chol 储存液DOPEDOTAP胆固醇储存液葡萄糖仪器、耗材 透紫外灯玻璃离心管氮气桶真空干燥器水浴超声破碎仪水浴锅挤压机聚碳酸酯膜滤器实验步骤 1.用氯仿将 30.0ml 的透紫外灯玻璃管漂洗 3 次。2.混匀用于准备脂质体的在透紫外灯玻璃管中的适当的脂质。（1）对于
脂质体载体用于直接体内基因转染实验
试剂、试剂盒氯仿DC-Chol 储存液DOPEDOTAP胆固醇储存液葡萄糖仪器、耗材透紫外灯玻璃离心管氮气桶真空干燥器水浴超声破碎仪水浴锅挤压机聚碳酸酯膜滤器实验步骤1.用氯仿将 30.0ml 的透紫外灯玻璃管漂洗 3 次。2.混匀用于准备脂质体的在透紫外灯玻璃管中的适当的脂质。（1）对于 DC-C
化学测序法实验
化学测序的重要性始终表现在：得到寡核苷酸的序列，转录调控信号功能分析（甲基化干涉分析，Carey and Smale 2000), 以及这些信号在活细胞中的鉴定（基因组印记，Church and Gilbert 1984)。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D
化学测序法实验
试剂、试剂盒 醋酸 无水乙醇 硫酸二甲酯 DMS DMS 缓冲液 DMS 终止液 EDTA 甲酰胺
化学测序法实验
试剂、试剂盒 醋酸无水乙醇硫酸二甲酯DMSDMS 缓冲液DMS 终止液EDTA 甲酰胺甲酰胺上样缓冲液肼 肼终止液NaClNaOH-EDTA 溶液哌啶水溶液哌啶甲酸乙酸钠聚丙烯酰胺测序凝胶鲑鱼精 DNA放射标记的目标 DNA 酵母 tRNA仪器、耗材 干冰-乙醇浴切仑科夫（Cerenkov) 记数
关于细胞转染－你知道多少？
细胞转染是指将外源分子如 DNA RNA 等导入真核细胞的技术。可分为瞬时转染，稳定转染等瞬时转染是指外源 DNA/RNA 不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞可存在多个拷贝数，产生高水平的表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其他调控元件的分析。一般来说，超螺旋质粒 DNA 转染效率