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影响表达杆状病毒表达的因素

在杆状病毒系统中,要获得蛋白质的有效表达,首先要选择合适的转染载体。依据表达的蛋白质属融合型或非融合型,选择单启动子型或多启动子型。另外目的基因的选择要注意以下因素:①该目的基因应不含内含子;②去除其mRNA 5′端非编码区的异源序列;③翻译启始密码子AUG应处于适当的序列之间(如Kozak 序列),通常认为其上游 -3位的碱基为A时最佳;④去除mRNA 3′端的非编码区的非必需序列;⑤若用非融合型转移载体,基因需含自身的ATG启始密码,若用融合型转移载体则不必带上;⑥转移载体中已含有多聚腺苷酸加尾信号,外源基因无需再带上这类信号;⑦如果表达产物的信号肽不能被杆状病毒表达体系有效去除时,可考虑去除这类信号肽;⑧若表达产物不能稳定表达时,可对其N端进行改造或表达融合蛋白。除此以外,细胞的种类和生理状态也是重组病毒繁殖的关键因素。蛋白质的低水平表达可能还与转录后加工、蛋白质转运、以及蛋白质本身的性质相关,可以采用融合表达来解决。......阅读全文

影响表达杆状病毒表达的因素

在杆状病毒系统中,要获得蛋白质的有效表达,首先要选择合适的转染载体。依据表达的蛋白质属融合型或非融合型,选择单启动子型或多启动子型。另外目的基因的选择要注意以下因素:①该目的基因应不含内含子;②去除其mRNA 5′端非编码区的异源序列;③翻译启始密码子AUG应处于适当的序列之间(如Kozak 序列)

影响杆状病毒表达系统的表达因素介绍

  在杆状病毒系统中,要获得蛋白质的有效表达,首先要选择合适的转染载体。依据表达的蛋白质属融合型或非融合型,选择单启动子型或多启动子型。另外目的基因的选择要注意以下因素:  ①该目的基因应不含内含子;  ②去除其mRNA 5′端非编码区的异源序列;  ③翻译启始密码子AUG应处于适当的序列之间(如K

杆状病毒表达系统的影响蛋白质表达的因素

在杆状病毒系统中,要获得蛋白质的有效表达,首先要选择合适的转染载体。依据表达的蛋白质属融合型或非融合型,选择单启动子型或多启动子型。另外目的基因的选择要注意以下因素:①该目的基因应不含内含子;②去除其mRNA 5′端非编码区的异源序列;③翻译启始密码子AUG应处于适当的序列之间(如Kozak 序列)

杆状病毒表达系统的应用

杆状病毒是近年来被广泛用于高效表达外源蛋白的载体系统,本文就杆状病毒表达系统的生物学特性、转染载体、重组病毒的筛选、基因表达调控及其发展应用等方面作一概述。

杆状病毒表达系统的应用

用杆状病毒做载体,可高效表达外源基因,到目前为止已有几百个包括动植物、病毒、细菌、真菌的基因在昆虫细胞或幼虫体内得到高效表达。这个表达体系的主要特点是可以获得大量抗原性、免疫原性较好的,与天然蛋白功能相似的可溶性重组蛋白。这一特点优于细菌、酵母和哺乳动物细胞表达体系。重组杆状病毒感染昆虫细胞后,可以

杆状病毒表达系统用于表达融合型蛋白的转染质粒

  是一类早期构建的转染质粒,它包括pAC系列[4],如pAC101、pAC311、pAC360等。在每个载体中,多角体蛋白基因启动子下游ATG启始密码后含有一个单一的BamHⅠ酶切位点,当外源基因和多角体基因的读码框架正确时,就可以获得含1个或几个多角体蛋白N端氨基酸的融合型外源基因。

杆状病毒系统蛋白质表达实验——小规模表达

实验方法原理分析方案依赖于表达蛋白的天然特性。实验材料草地夜蛾(Sf9)细胞高滴度的重组杆状病毒储液试剂、试剂盒PBS1×SDS样品缓冲液仪器、耗材含 10% 胎牛血清(FBS)的TNM-FH昆虫培养基60 mm 组织培养皿27℃ 培养箱(湿度可选)15 ml 聚丙烯离心管带有 GH-3.7 水平转

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤一、杆状病毒表达载体最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成,其位于病毒基因组多角体座位,替代了非必需的野生型多角体基因。在实验室中

关于杆状病毒表达系统的简介

  杆状病毒是近年来被广泛用于高效表达外源蛋白的载体系统,本文就杆状病毒表达系统的生物学特性、转染载体、重组病毒的筛选、基因表达调控及其发展应用等方面作一概述。  体外基因表达系统包括原核细胞系统和真核细胞系统。原核细胞系统主要是大肠杆菌细胞系统,它操作简便,周期短,收益大,表达产物稳定,但是表达基