原生质体培养的意义
①植物原生质体是细胞无性系变异和突变体筛选的重要来源;②植物原生质体是细胞融合工作的基础;③植物原生质体是植物遗传工程的理想受体和遗传饰变的理想材料;④在细胞生物学与遗传理论研究上的应用。......阅读全文
原生质体培养的意义
①植物原生质体是细胞无性系变异和突变体筛选的重要来源;②植物原生质体是细胞融合工作的基础;③植物原生质体是植物遗传工程的理想受体和遗传饰变的理想材料;④在细胞生物学与遗传理论研究上的应用。
原生质体的培养
原生质体(Protoplast):指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞。一、原生质体的应用 由于没有细胞壁,原生质体为作物遗传改良和植物学研究提供了极为有利的试验材料。原生质体可以用于下面几种研究。1. 用作细胞杂交服务于作物改良2. 用作遗传转化的对象3. 研究细胞壁的发生过程4. 筛选
原生质体培养技术的概念
原生质体(protoplast):脱去全部细胞壁的细胞叫原生质体,是一生物工程学概念。原生质体是由质膜所包围的具有生活力的”裸露细胞“。原生质体培养:对离体植物的原生质体进行培养,形成完整植株的培养技术。
原生质体培养的方法介绍
主要有液体浅层培养法、液体悬滴培养、固体平板法、固液双层培养法(应用最广泛)、琼脂糖珠培养法。
原生质体培养技术的主要来源
主要来源:植物的叶片,根尖,花粉,愈伤组织细胞等。
原生质体培养技术的定义和特征
定义是指用特殊方法脱去了植物细胞壁的、裸露的、 有生活力的原生质团。没有细胞壁,但具有活细胞的一切特征。特征①无细胞壁障碍,可以方便地进行有关遗传操作,并可以对膜,细胞器等进行基础研究。②具有全能性,并能进行人工培养发育成完整植株。③原生质体适合进行诱导融合形成杂种细胞。
原生质体的概念
原生质体(Protoplast):指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞。
原生质体培养的植株再生是怎样形成的
原生质体培养形成的愈伤组织转移到分化培养基中,可形成不定芽和不定根或形成胚状体结构后直接发育成植株。由植物器官形成的愈伤组织与由原生质体形成的愈伤组织的植株再生率是不同的。来自植物器官的愈伤组织常带有已发育的芽或有组织的结构,而这样的结构在起源于原生质体的愈伤组织中是没有的。
组织培养之原生质体相关知识介绍
原生质体活力测定:1、形态识别:形态上完整,呈圆形,含有饱满的细胞质,颜色鲜艳的即为存活的原生质体。2、染色识别:1)0.1%酚番红或Evans蓝染色:有活力的不被染色,死亡的被染上色。2)双醋酸盐荧光素(FDA)染色法:在荧光显微镜下有荧光的即为有活性的原生质体。原生质体培养方式:液体浅层培养;平
细菌原生质体融合
一、目的要求: 了解原生质体融合技术的原理. 学习并掌握以细菌为材料的原生质体融合技术. 二、基本原理: 原核微生物基因重组主要可通过转化、转导、接合等途径,但有些微生物不适于采用这些途径,从而使育种工作受到一定的限制.1978 年第三届国际工业微生物遗传学讨论会上,有人提出微
细菌原生质体融合
一、目的要求: 了解原生质体融合技术的原理. 学习并掌握以细菌为材料的原生质体融合技术. 二、基本原理: 原核微生物基因重组主要可通过转化、转导、接合等途径,但有些微生物不适于采用这些途径,从而使育种工作受到一定的限制.1978 年第三届国际工业微生物遗传学讨论会上,有人提出
原生质体的纯化方法
原生质体的纯化方法:沉降法、漂浮法、界面法。
概述原生质体的制备
原生质体是植物或微生物细胞去掉壁以后的内含物。原生质体的制备主要是在高渗压溶液中加入细胞壁分解酶,将细胞壁剥离,结果剩下由原生质膜包住的类似球状的原生质体,它保持原细胞的一切活性。 制备原生质体首先需要选择供融合的两个亲株。要求亲株的性能稳定并带有遗传标记,一般以营养缺陷型和抗药性等遗传性状为
植物原生质体的制备
植物原生质体的制备可以用于:(1)由于其具有再生细胞壁,进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力;(2)具有摄取外源大分子、细胞器,以及细菌,病毒的能力,因此是进行遗传操作,基因转移的好材料;(3)通过同种和异种植物的原生质体融合,可产生异核体,实现体细胞杂交,培育出新品种。实验方法原理去掉植物细胞
植物原生质体的制备
实验材料 油菜或菠菜或烟草试剂、试剂盒 氯化钙、蒸馏水、2蔗糖、酶解液仪器、耗材 显微镜、离心机、离心管、剪刀、镊子、吸管、培养皿、载玻片、盖玻片
原生质体融合的原理
两个具有不同遗传性状的细胞,采用适宜的水解酶溶解细胞壁后,在自发情况或融合剂作用下,两个原生质体接触,融合成为异核体,经过繁殖复制进一步核融合,形成杂合二倍体,再经过染色体交换产生重组体,达到基因重组的目的,并在适宜的条件下再生出细胞壁,对重组体进行生产性能、生理生化和遗传特性分析获得所需重组子。其
原生质体的活力测定
检验原生质体是活细胞还是死细胞染色法:①二乙酸荧光素(FDA)法:FDA本来没有荧光,当其进入细胞后被脂酶分解为具有荧光的极性物,不能透过质膜,而是留在细胞内发出荧光。因此能发出荧光的是具有活性的原生质体。②酚藏花红染料法:具有活性的原生质体均不着色,而死去的原生质体立即染成红色。③伊文思蓝染色法:
原生质体的应用介绍
由于没有细胞壁,原生质体为作物遗传改良和植物学研究提供了极为有利的试验材料。原生质体可以用于下面几种研究。1. 用作细胞杂交服务于作物改良2. 用作遗传转化的对象3. 研究细胞壁的发生过程4. 筛选突变体5. 膜的结构、运输、激素接受位点等的研究6. 用于分离细胞器和大分子7. 种质资源保存
植物原生质体的制备
原生质体是指植物细胞去掉细胞壁的裸露部分。它在培养条件下,①具有再生细胞壁,进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力;②具有摄取外源大分子、细胞器,以及细菌,病毒的能力,因此是进行遗传操作,基因转移的好材料;③通过同种和异种植物的原生质体融合,可产生异核体,实现体细胞杂交,培育出新品种。 实验原理
原生质体融合的原理
定义:原生质体融合就是将两个亲株的细胞壁分别通过酶解作用加以剥除,使其在高渗环境中释放出只有原生质膜包被着自球状原生质体。然后将两个亲株的原生质体在高渗条件下混合,由聚乙二醇助融,使它们相互凝集,通过细胞质融合接着发生两次基因组之间的接触、交換、遗传重组,在再生细胞中获得重组体原生质体融合技术简介.
怎样利用原生质体融合与培养技术制造新物种
首先,用酶解或其它方法,制作不同植物的原生质体,然后采用特定的技术将这两种(或更多种)原生质体融合,再利用细胞培养技术使其增值、分化为小苗,然后移栽,成为健壮的正常植株。这样,这个植株就是一个新物种。举例嘛,由于没有见过,就随便说说啦,不要当真哈。采用马铃薯和番茄的细胞制作原生质体,融合,细胞培养、
什么叫原生质体融合
原生质体是去掉细胞壁的植物细胞,原生质体融合就是植物细胞的融合。常用的方法有振动,电击,离心,聚乙二醇(PEG)处理等。先用纤维素酶和果胶酶处理原植物细胞,得到原生质体再在培养液中使用上述方法进行融合。这种方法的原理是细胞的流动性。当细胞核完成融合,并且重组细胞重生出细胞壁后,就表明杂种细胞已成功得
酵母原生质体制备
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD酵母消解缓冲液山梨醇抽提缓冲液贮存缓冲液液氮仪器、耗材 摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤 将酵母菌接种于YPD培养基(100 ml 到20 L),剧烈摇动或强制通气条件下培养至对数中期(OD600≈1~5)。培养物在预称重的离心瓶中于4℃, 1 500 g 离
原生质体融合的技术分类
根据融合时细胞的完整程度,原生质体融合可分为两大类:对称融合(symmetric fusion)-即两个完整的细胞原生质体融合。非对称融合(asymmetric fusion)-利用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活后再进行融合,它可以分为几种:用于细胞核或细胞质失活的方法分为物理和化学两大
原生质体发生融合的介绍
由于在自然条件下,原生质体发生融合的频率非常低,因此在实际育种过程中要采用一定方法进行人为诱导融合。两株出发菌株制备好的原生质体可以通过化学因子或电场诱导的方法进行融合。 [3] 化学因子诱导是把两个亲株的原生质体混合在一起,加入融合剂聚乙二醇( polyethylene glycol,PEG
植物原生质体的特点介绍
植物原生质体具有以下的特点: ①无细胞壁的物理障碍; ②能获得遗传性状和生理性状较一致的细胞群体; ③植物原生质体同样具有全能性; ④用组织培养方法可进行大量繁殖。 这些有利的特征决定了原生质体是一个极好的实验体系,在植物育种上有广泛用途。
原生质体融合的基本介绍
植物体细胞杂交(plant somatic hybridization),又称原生质体融合(Protoplast fusion )是指将植物不同种、属,甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合,然后进行离体培养,使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁,未脱壁的两个细胞是很难融合的,植物细胞只有
关于原生质体的基本介绍
原生质体是细胞壁以内各种结构的总称,也是组成细胞的一个形态结构单位,活细胞中各种代谢活动均在此进行。原生质体包括细胞膜(cell membrane)、细胞质(cytoplasm)、细胞核(nucleus)和细胞器(organelle)等。原生质体化学成分十分复杂,其组分也随着细胞不断的新陈代谢活
简述原生质体融合的过程
将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理,得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B,运用物理方法或是化学方法诱导融合,形成杂种细胞,再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。 杂交时间:植物细胞杂交是从细胞融合开始,到培育成的新植物体结束。 a.原生质体制备:用酶解法去除细胞壁(
简述原生质体融合的原理
植物体细胞杂交(plant somatic hybridization),又称原生质体融合(Protoplast fusion )是指将植物不同种、属,甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合,然后进行离体培养,使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁,未脱壁的两个细胞是很难融合的,植物细胞只有