单克隆抗体细胞选择骨髓瘤细胞

骨髓瘤细胞能产生并分泌大量的免疫球蛋白,这样的瘤细胞融合后,可能影响或降低所分泌抗体的滴度,所以必须选育出非分泌免疫球蛋白缺陷型的骨髓瘤细胞。选择骨髓瘤细胞的条件:①该瘤细胞系的来源应与制备脾细胞小鼠为同一品系,以便两者的组织相容性抗原一致;②骨髓瘤细胞必须是静息状态,不产生γ球蛋白或不分泌到细胞外;③骨髓瘤细胞生长需要一个较高的细胞密度,最好106个细胞/ml;④生长速度快,繁殖时间短。常用的Balb/c小鼠产生的骨髓瘤细胞株有:①S194/5XXO·BU·1;②SP2/0—Ag14(简称SP2);③P2—X­—Ag8·6·5·3(简称653);④FO以653最为常用,它是由矿物油4-甲基-15烷(Pristane,降植烷)诱发出来的一种浆细胞瘤(MinerolOilplasmacytoma,MOPC)并经过培育形成一株8-氮鸟嘌呤有抵抗力的亚系。骨髓瘤细胞一般由有关单位直接引入,保存于-195℃液氮罐中,试验时复苏、增殖、传......阅读全文

单克隆抗体细胞选择骨髓瘤细胞

骨髓瘤细胞能产生并分泌大量的免疫球蛋白,这样的瘤细胞融合后,可能影响或降低所分泌抗体的滴度,所以必须选育出非分泌免疫球蛋白缺陷型的骨髓瘤细胞。选择骨髓瘤细胞的条件:①该瘤细胞系的来源应与制备脾细胞小鼠为同一品系,以便两者的组织相容性抗原一致;②骨髓瘤细胞必须是静息状态,不产生γ球蛋白或不分泌到细胞外

单克隆抗体细胞选择饲养细胞

在体外的细胞培养中,单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖,必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖,加入的细胞称之为饲养细胞(Feedercell)。在细胞融合和单克隆的选择过程中,就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体,因此在这一过程中必须使用饲养细胞。许多种类的动物细胞都可以做饲养细胞,如

单克隆抗体细胞选择脾细胞

1.材料(1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。单克隆抗体制备流程(2)1640培养液(3)2.5%FCS-1640营养液2.操作方法(1)拉颈或用CO2处死小白鼠。(2)将小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在无菌条件下取脾。(3)把脾放入5ml含有2.5%FCS的1640液中,冰

单克隆抗体细胞的选择

实验概要本文介绍了单克隆抗体细胞的选择实验。实验原理在体外的细胞培养中,单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖,必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖,加入的细胞称之为饲养细胞(Feeder cell)。在细胞融合和单克隆的选择过程中,就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体,因此在这一

单克隆抗体技术:细胞的选择

脾细胞 1.材料 (1) 免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。 (2) 1640培养液 (3) 2.5%FCS-1640营养液 2.操作方法 (1) 拉颈或用CO2处死小白鼠。 (2) 将小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在无菌条件下取脾。 (3) 把脾放入5ml含有2.5%FCS的

单克隆抗体的细胞如何选择?

(一)脾细胞1.材料(1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。单克隆抗体制备流程(2)1640培养液(3)2.5%FCS-1640营养液2.操作方法(1)拉颈或用CO2处死小白鼠。(2)将小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在无菌条件下取脾。(3)把脾放入5ml含有2.5%FCS的16

单克隆抗体细胞的选择

实验概要本文介绍了单克隆抗体细胞的选择实验。实验原理在体外的细胞培养中,单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖,必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖,加入的细胞称之为饲养细胞(Feeder cell)。在细胞融合和单克隆的选择过程中,就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体,因此在这一

关于单克隆抗体制备骨髓瘤细胞的介绍

  骨髓瘤细胞能产生并分泌大量的免疫球蛋白,这样的瘤细胞融合后,可能影响或降低所分泌抗体的滴度,所以必须选育出非分泌免疫球蛋白缺陷型的骨髓瘤细胞。  选择骨髓瘤细胞的条件:  ①该瘤细胞系的来源应与制备脾细胞小鼠为同一品系,以便两者的组织相容性抗原一致;  ②骨髓瘤细胞必须是静息状态,不产生γ球蛋白

关于单克隆抗体制备脾细胞的选择介绍

  1.材料  (1)免疫过的血清抗体滴度高的Balb/c鼠。  单克隆抗体制备流程  单克隆抗体制备流程  (2)1640培养液(3)2.5%FCS-1640营养液  2.操作方法  (1)拉颈或用CO2处死小白鼠。  (2)将小鼠放于70%酒精中浸泡消毒,取出固定于板上,在无菌条件下取脾。  (

脾细胞和骨髓瘤细胞的融合

1、脾细胞和骨髓瘤细胞一般按2:1-5:1的密度混合,有的报道可以到10:1,不过总体来说我们常选3:1-5:1,记住,原则是脾细胞的数量比骨髓瘤的多。2、融合前,一般用HAT培养基做饲养细胞铺板,这是融合前的准备工作,因为饲养细胞分泌的某些细胞因子有助与融合的杂交瘤细胞生长,并且提供一定的细胞密度

骨髓瘤细胞的特点介绍

  骨髓瘤细胞是B-淋巴浆细胞系统恶性增殖所致一种肿瘤。其特点是骨髓中出现异常的浆细胞 (称为骨髓瘤细胞)的恶性增殖,并分泌某 种体液因子,使破骨细胞异常激活,造成溶 骨性病变,引起骨痛和骨质破坏,贫血、肾 功能损害、免疫功能异常。骨髓瘤细胞具有 以下几个特点:  ①稳定,易培养;  ②自身不 分泌

单克隆抗体的杂交细胞

  克隆化的细胞可以在体外进行大量培养,收集上清液而获得大量的单一的克隆化抗体。不过体外培养法得到的单克隆抗体有限,其不能超过特定的细胞浓度,且每天要换培养液。而体内杂交瘤细胞繁殖可以克服这些限制。杂交瘤细胞具有从亲代淋巴细胞得来的肿瘤细胞的遗传特性。如接种到组织相容性的同系小鼠或不能排斥杂交瘤的小

小鼠骨髓瘤细胞知识点

1.细胞株稳定,易于传代培养。2.细胞株自身不会产生免疫球蛋白或细胞因子。3.目前最常用的骨髓瘤细胞是NS-1和SP2/O细胞株。4.该细胞是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)或胸腺嘧啶激酶(TK)的缺陷株。

小鼠骨髓瘤细胞知识点

1.细胞株稳定,易于传代培养。2.细胞株自身不会产生免疫球蛋白或细胞因子。3.目前最常用的骨髓瘤细胞是NS-1和SP2/O细胞株。4.该细胞是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)或胸腺嘧啶激酶(TK)的缺陷株。

单克隆抗体治疗后巨噬细胞清除循环肿瘤细胞

  直接针对肿瘤抗原的单克隆抗体已被证明有效,能用于治疗某些形式的癌症。尽管越来越多地使用单克隆抗体用于癌症治疗,但目前尚不清楚这些抗体是如何推动肿瘤的清除。   发表在Journal of Clinical Investigation杂志上的一则研究中,VU大学医学中心Marjolein van

单克隆抗体的细胞融合

  融合剂  细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如灭活的仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1000时,呈乳白色蜡状固体,能溶于水、乙醇及其他许多有机溶剂,对热稳定

单克隆抗体的细胞融合

  融合剂  细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如灭活的仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1000时,呈乳白色蜡状固体,能溶于水、乙醇及其他许多有机溶剂,对热稳定

单克隆抗体技术:细胞融合

融合剂 细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳白色蜡状固体,能溶于水、乙醇及其他许多有机溶剂,对热稳定,与

单克隆抗体技术:细胞融合

实验概要本文介绍了单克隆抗体技术——细胞融合实验的操作流程。实验原理细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳

单克隆抗体细胞融合

单克隆抗体细胞融合(一)融合剂 细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳白色蜡状固体,能溶于水、乙醇及其他许多有机

单克隆抗体技术:细胞融合

实验概要本文介绍了单克隆抗体技术——细胞融合实验的操作流程。实验原理细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳

单克隆抗体技术:饲养层细胞

在体外的细胞培养中,单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖,必须加入其它活的细胞才能使其生长繁殖,加入的细胞称之为饲养细胞(Feeder cell)。在细胞融合和单克隆的选择过程中,就是在少量的或单个细胞的基础上使其生长繁殖成群体,因此在这一过程中必须使用饲养细胞。许多种类的动物细胞都可以做饲养细

单克隆抗体技术:细胞融合

实验概要本文介绍了单克隆抗体技术——细胞融合实验的操作流程。实验原理细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳

骨髓瘤细胞是B的功能特点

骨髓瘤细胞是B-淋巴浆细胞系统恶性增殖所致一种肿瘤。其特点是骨髓中出现异常的浆细胞 (称为骨髓瘤细胞)的恶性增殖,并分泌某 种体液因子,使破骨细胞异常激活,造成溶 骨性病变,引起骨痛和骨质破坏,贫血、肾 功能损害、免疫功能异常。骨髓瘤细胞具有 以下几个特点:①稳定,易培养;②自身不 分泌免疫球蛋白或

Neoplasia:靶向巨噬细胞可以治疗骨髓瘤

  阿德莱德大学的研究人员正在寻找治疗恶性血癌--多发性骨髓瘤的新靶点。  阿德莱德大学SAHMRI骨髓瘤研究实验室的研究成果发表在Neoplasia,首次证明了一种叫做巨噬细胞的白细胞对这种疾病的形成和增殖能力的重要性。  该研究的主要作者、阿德莱德医学院的博士生Khatora Opperman说

骨髓瘤细胞的基本内容介绍

  哺乳动物感染抗原后,其体内会形成相应的B淋巴细胞,B淋巴细胞能分泌相应的抗体凝聚或杀死这些抗原。动物在免疫反应的过程中,每一种B淋巴细胞能分泌一种特异性抗体,要想获得大量的特异性抗体,必须使能分泌该单一抗体的B淋巴细胞大量增殖。B淋巴细胞具有产生单一抗体的能力,但不能在体外增殖;骨髓瘤细胞是一种

细胞计数仪选择

细胞计数仪的选择应遵循几点:要考虑细胞计数仪的性价比:如果您的目的只是代替手工计数,节省操作者的时间,操作简便,完全没有必要花几十万买一台仅能进行细胞计数的仪器,花大钱办小事。要考虑细胞计数仪的稳定性和重复性:如果您对细胞计数的准确性和重复性要求高,那仪器的高性能和稳定性是首要考虑因素,仪器的硬件以

单克隆抗体细胞融合剂

  细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。   聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳白色蜡状固体,能溶于水、乙醇及其他许多有机溶剂,对热稳定,与许

关于骨髓瘤的细胞学检查介绍

  肿瘤血运丰富呈暗红色或深红色,较脆软。骨髓穿刺找到大量异常浆细胞可确诊。血清蛋白增高,A/G倒置,蛋白电泳异常,显示β和r球蛋白升高。并可出现白血病血象。40%以上的病人尿中Bence-Jones蛋白阳性。另外有血钙增高,尿蛋白电泳异常等。 镜下可见瘤体主要由大量密集的瘤细胞组成,间质极少。瘤细

人骨髓细胞和骨髓瘤的分析

                                                                                                       骨髓(人体内的造血组织)骨髓(bone marrow)存在于骨松质腔隙和