显微注射法的方法过程

一、采集受精卵(1)超数排卵:选取6~8周龄的雌性小鼠,先后腹腔注射5U孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonactotropin,PMSG)和2.5~5.0U人绒毛膜促性腺激素(humar chorionic gonactotropin,HCG),以促进排卵,然后与鼠龄为12周~l年的雄性小鼠按1:1交配。交配成功的标志是在雌性小鼠的阴道口发现白色的阴道栓。(2)取受精卵:与雄性小鼠合笼的次日上午,将确认有阴道栓的雌性小鼠用颈椎脱臼法剖杀,取出输卵管,置于培养液中,在体视显微镜下小心的切开输卵管膨大的壶腹部,用透明质酸酶溶液稍用力冲洗,使受精卵与输卵管分离,并流到培养液中,在体视显微镜下选择原核清晰的受精卵,移人装有培养液的胚胎培养皿中,然后在培养皿滴加矿物油使之覆盖在培养液表面,在CO2孵箱(37℃,5%CO2,95%空气)中培养5h左右(一般在上午10时左右取受精卵,培养至l3时可见雌、雄性原核......阅读全文

显微注射法的方法过程

一、采集受精卵(1)超数排卵:选取6~8周龄的雌性小鼠,先后腹腔注射5U孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonactotropin,PMSG)和2.5~5.0U人绒毛膜促性腺激素(humar chorionic gonactotropin,HCG),以促进排卵,然后与鼠龄

显微注射法方法简介

显微注射法(microinjection)是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组(rearrangement)、缺失(deletion)、复制(duplication)或易位(translocatio

显微注射法的技术特点

显微注射法(microinjection)是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组(rearrangement)、缺失(deletion)、复制(duplication)或易位(translocatio

显微注射法的基本介绍

  显微镜注射法是现代科学技术行业的一项新成果,利用极其精密的仪器完成。 它广泛应用于转基因技术上。  显微注射法(microinjection)是利用管尖极细(0.1至0.5μm)的玻璃微量注射针,将外源基因片段直接注射到原核期胚或培养的细胞中,然后藉由宿主基因组序列可能发生的重组(rearran

显微注射法技术要求

这种显微注射术的程序,需有相当精密的显微操作设备,制造长管尖时,需用微量吸管拉长器(micropipettepuller),注射时需有固定管尖位置的微量操作器。这种技术的长处为任何DNA在原则上均可传入任何种类的细胞内。此法已成功运用于包括小鼠、鱼、大鼠、兔子及许多大型家畜,如牛、羊、猪等基因转殖动

简述显微注射法的技术要求

  这种显微注射术的程序,需有相当精密的显微操作设备,制造长管尖时,需用微量吸管拉长器(micropipettepuller),注射时需有固定管尖位置的微量操作器。这种技术的长处为任何DNA在原则上均可传入任何种类的细胞内。此法已成功运用于包括小鼠、鱼、大鼠、兔子及许多大型家畜,如牛、羊、猪等基因转

显微注射法应用转基因方式

最常用来生产转基因动物的方式为:直接把重组过的 DNA 注入受精卵的原核(pronuleus) 中,也就是将从胚胎提供者的输卵管中取得的受精卵移到倒置显微镜上的微量注射台上,然后利用固定吸量管 (holdingpipette) 固定住,之后注射针则依序穿过 zona pellucida,ocyte

显微注射法的技术优势和缺陷

以显微注射法转外源基因没有长度上的限制,已证明数百kb之DNA片段均可以成功产制出转基因动物。其缺点是设备精密而昂贵、操作技术需要长时间的练习,以及每次只能注射有限的细胞。这些操作中所使用的微量移液管是用毛细管拉针器(pipettepuller)来制作的,先将玻璃毛细管加热到其融化的温度,再将其拉制

显微注射法应用转基因动物

以显微注射法转外源基因没有长度上的限制,已证明数百kb之DNA片段均可以成功产制出转基因动物。其缺点是设备精密而昂贵、操作技术需要长时间的练习,以及每次只能注射有限的细胞。这些操作中所使用的微量移液管是用毛细管拉针器(pipettepuller)来制作的,先将玻璃毛细管加热到其熔化的温度,再将其拉制

转基因技术核显微注射法简介

  核显微注射法是动物转基因技术中最常用的方法。它是在显微镜下将外源基因注射到受精卵细胞的原核内,注射的外源基因与胚胎基因组融合,然后进行体外培养,最后移植到受体母畜子宫内发育,这样分娩的动物体内的每一个细胞都含有新的DNA片段。-这种方法的缺点是效率低、位置效应(外源基因插入位点随机性)造成的表达

盐水输注试验检查过程

  1、受试者摄入120mEq钠饮食至少3天. 2、卧床过夜. 3、次晨8时采血测PRA、Aldo和皮质醇作为对照. 4、从8AM至12AM均匀滴注生理盐水1250ml. 5、输注结束时,再次采血测PRA、Aldo和皮质醇. 如果患者基础醛固酮水平较正常增高,肾素、血管紧张素受抑制,盐水输注后、醛固

紫外线消毒过程的注意注事项

  (1)在使用过程中,应保持紫外线灯表面的清洁,一般每两周用酒精棉球擦拭一次,发现灯管表面有灰尘、油污时,应随时擦拭。  (2)用紫外线灯消毒室内空气时。房间内应保持清洁干燥,减少尘埃和水雾,温度低于20℃或高于40℃,相对湿度大于60%时应适当延长照射时间。  (3)用紫外线消毒物品表面时,应使

显微注射法在转基因动物上的应用

  以显微注射法转外源基因没有长度上的限制,已证明数百kb之DNA片段均可以成功产制出转基因动物。其缺点是设备精密而昂贵、操作技术需要长时间的练习,以及每次只能注射有限的细胞。这些操作中所使用的微量移液管是用毛细管拉针器(pipettepuller)来制作的,先将玻璃毛细管加热到其熔化的温度,再将其

显微注射法在转基因方式上的应用介绍

  最常用来生产转基因动物的方式为:直接把重组过的 DNA 注入受精卵的原核(pronuleus) 中,也就是将从胚胎提供者的输卵管中取得的受精卵移到倒置显微镜上的微量注射台上,然后利用固定吸量管 (holdingpipette) 固定住,之后注射针则依序穿过 zona pellucida,ocyt

显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程

实验概要本实验详细介绍了显微注射法建立转基因小鼠模型的操作流程。实验原理转基因小鼠制备的基本原理是将改建后的目的基因(或基因组片段)用显微注射法注入供体小鼠的受精卵(或着床前胚胎细胞),然后将此受精卵(或着床前胚胎细胞)再植入受体动物的输卵管(或子宫)中,使其发育成携带有外源基因的转基因动物,通过分

透射法和散射法区别

通过气溶胶的透射光为橙红色,侧面散射光为淡兰色。透射光: 光源光穿过透明或半透明物体后再进入视觉的光线,称为透射光,透射光的亮度和颜色取决于入射光穿过被透射物体之后所达到的光透射率及波长特征。摄像上用来制造透明感和立体感。散射是指由传播介质的不均匀性引起的光线向四周射去的现象。如一束光通过稀释后的牛

稠油注蒸汽开采方法

由于蒸汽吞吐方法是单井作业,即每口井既是注汽井又是生产井,将一定量蒸汽注入油层后,关井数天后即开井回采,靠加热油层降低原油粘度来提高产量。这种方法的经济风险性较小,而且,虽然可以每口井进行5~8周期的吞吐作业,采油速度高达3%~8%,一般经济效益比蒸汽驱高数倍,但是原油采收率仅10%~20%,损失大

脑脊液免疫球蛋白的注检查过程

  (1)患者侧卧于硬板床上,背部与桌面垂直,头部尽量向前胸屈曲,两手抱膝紧贴腹部,使躯干尽可能呈弓形;或由助手在术者对面用一手挽患者头部,另一手挽双下肢腘窝处并用力抱紧,使脊柱尽量后凸以增宽椎间隙,便于进针。  (2)确定穿刺点,通常以双侧髂棘最高点连线与后正中线的交汇点为穿刺点,此处相当于第3-

探伤仪的检测方法反射法

 探伤仪检测这里主要介绍的是应用zui多的通过反射法来获取物体内部特性信息的方法。反射法是基于超声在通过不同声阻抗组织界面时会发生较强反射的原理工作的,正如我们所知道,声波在从一种介质传播到另外一种介质的时候在两者之间的界面处会发生反射,而且介质之间的差别越大反射就会越大,所以我们可以对一个物体发射

X射线衍射法的原理及方法

X射线衍射法是一种晶体结构的分析方法,而不是直接研究试样内含有元素的种类及含量的方法。当一束单色X射线入射到晶体时,由于晶体由原子规则排列成的晶胞组成,这些规则排列的原子间距离与入射X射线波长有相同数量级,故由不同原子散射的X射线相互干涉,在某些特殊方向上产生强X射线衍射。晶体衍射X射线的方向,与构

动物的注射方法实验——腹腔注射法

实验材料小鼠试剂、试剂盒灭菌生理盐水仪器、耗材注射器(1 ml)7 号针头消毒煮沸器碘酒棉花75% 酒精棉花消毒干棉花实验步骤1. 注射器的准备与消毒(同「皮下注射法」)。2.腹腔注射2.1 抓取与固定方法同小鼠皮下注射实验。2.2 消毒下腹部皮肤,使鼠头部稍向下,以免针头刺入内脏(图 1,B)。2

干细胞输注或使心脏衰老过程逆转

  返老还童是许多老年人的梦想,亦是很多科学家的努力方向之一。美国加州洛杉矶雪松—西奈医疗中心的研究人员,8月14日在《欧洲心脏杂志》上发表研究报告称,他们通过实验证明,向老年大鼠输注心脏干细胞可能有助于逆转其心脏衰老过程。  在该项研究中,研究人员将取自实验室新生大鼠的一种特定类型的干细胞——心肌

动物的注射方法实验_静脉注射法

实验材料家兔试剂、试剂盒灭菌生理盐水仪器、耗材注射器(1 ml)7 号针头剪刀消毒煮沸器碘酒棉花75% 酒精棉花消毒干棉花放家兔用特制木箱实验步骤1. 注射器的准备与消毒(同「皮下注射法」)。2. 静脉注射2.1 将家兔固定于特制木箱(木箱的一端有一圆洞,使头部露出)中,或由助手按在桌上,一手轻按其

动物的注射方法实验——皮内注射法

实验材料豚鼠试剂、试剂盒灭菌生理盐水仪器、耗材注射器(1 ml)5 号针头剪刀消毒煮沸器碘酒棉花75% 酒精棉花消毒干棉花实验步骤1. 注射器的准备与消毒(同「皮下注射法」)。2. 皮内注射2.1 助手用左手从背面夹持豚鼠颈部,将动物提起,并使大拇指钩住下颌部,其他几个手指将另一边的前腿固定,右手在

盐水输注试验的注意事项及检查过程

  注意事项  不合宜人群:暂时不明  检查前注意:注意正常的饮食,注意正常的作息,防止内分泌混乱。  检查时要求:积极配合医生的要求。  检查过程  [方法]  (1) 受试者摄入120mEq钠饮食至少3天。  (2) 卧床过夜。  (3) 次晨8时采血测PRA、Aldo和皮质醇作为对照。  (4

流动注射法检测肥料中磷的方法原理

在一定酸度下,试剂溶液中的磷酸根离子与偏钒酸和钼酸反应形成黄色三元杂多酸。在一定磷浓度范围内,吸光度与含磷量呈正比例关系。

动物的注射方法实验——皮下注射法

很多微生物学与免疫学实验均需利用动物,例如各种抗体,包括单克隆抗体的制备、药物对免疫功能的影响,菌苗与疫苗的安全试验以及各免疫机理的研究等都要通过注射方式在动物体内进行。实验方法原理实验材料小白鼠试剂、试剂盒灭菌生理盐水仪器、耗材注射器(1 ml)6 号针头消毒煮沸器碘酒棉花75% 酒精棉花消毒干棉

脱敏注射法的简介

  注射脱敏,即应用会对机体造成超敏反应的药物时实行的一种尽可能减轻患者过敏反应的一种实验性药物注射治疗方案。最常见的脱敏注射法是破伤风抗毒素(TAT)脱敏注射法,将所需的TAT剂量分次少量注射进体内。TAT对于人体是一种异种蛋白,具有抗原性,注射后可引起过敏反应。主要表现为发热、速发型或迟缓型血清

单晶衍射法的概述

  单晶X 射线衍射分析的基本方法为劳埃法与周转晶体法。  劳埃法  劳埃法以光源发出连续X 射线照射置于 样品台上静止的单晶体样品,用平板底片记录产生的衍射线。根据底片位置的不同,劳埃法可以分为透射劳埃法和背射劳埃法。背射劳埃法不受样品厚度和吸收的限制,是常用的方法。劳埃法的衍射花样由若干劳埃斑组

热折射法的概念

中文名称热折射法英文名称thermorefractometry定  义在程序控温下,测量试样折射率与温度关系的方法。应用学科机械工程(一级学科),分析仪器(二级学科),热学式分析仪器-热学式分析仪器分析原理(三级学科)