蛋白挂在阳离子交换柱上洗脱不下来，怎么办
疏水层析目的蛋白结合太紧，一般需要降低疏水作用，可以考虑降低结合时中性盐的浓度。使用疏水力较弱的层析填料，比如丁基疏水、辛基疏水的填料。 洗脱时可以用蒸馏水直接洗脱，如果还是那以洗脱的话可以尝试添加低浓度乙醇......阅读全文
蛋白挂在阳离子交换柱上洗脱不下来，怎么办
疏水层析目的蛋白结合太紧，一般需要降低疏水作用，可以考虑降低结合时中性盐的浓度。使用疏水力较弱的层析填料，比如丁基疏水、辛基疏水的填料。 洗脱时可以用蒸馏水直接洗脱，如果还是那以洗脱的话可以尝试添加低浓度乙醇
蛋白质水解产物阳离子交换柱层析时的洗脱顺序
PI2．77。氨基酸与阳离子交换树脂作用力的大小次序是碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸。溶液的pH高于等电点时氨基酸带正电，低于等电点时氨基酸带负电。选项中Arg（pI为10．76）所带正电荷最多，与交换树脂亲和力最强，后被洗脱。Asp（pI为2．77）所带负电荷最多，与交换树脂亲和力最弱，先被洗
阳离子交换柱的使用原理
阳离子交换柱是在高纯度的惰性硅胶表面键合一种新型的聚合磺酸基阳离子交换配位体。这种独特的键合结构是一种稳定的聚合包膜结构，比普通的聚合物离子交换柱柱效更高，且具有更好的机械强度和重现性。 阳离子.jpg 原理 离子交换层析中，基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正
色谱柱的填料有哪些阳离子交换柱
阳离子是指功能基团，有很多选择，强阳弱阳；基质又有多种，主要可分为硅胶和聚合物，聚合物种类比较多，如PSDVB，聚甲基丙烯酸酯等。
阴离子交换色谱柱洗脱液的选择
阴离子交换色谱柱洗脱液的选择 阴离子交换色谱柱的选择： 离子交换色谱柱通常粗短，直径和长度比一般为1：10～1：50。 阴离子交换色谱柱装柱： 1、色谱柱安装要垂直。 2、装柱时要均匀平整，不能有气泡。 五、平衡缓冲液的选择： 平衡缓冲液是指装柱后和上样后用
阳离子交换柱用什么冲液冲洗
阳离子交换柱可用稀酸缓冲液冲洗，阴离子交换柱可用稀碱缓冲液冲洗，除去交换性能强的盐，然后用水、甲醇、二氯甲烷（除去吸附在固定相表面的有机物）、甲醇、水依次冲洗。
阳离子抗结垢柱树脂渗漏怎么办？
实验室纯水系统，通常会配置预过滤，包括聚丙烯深层过滤棉芯，活性炭柱和抗结垢柱。您收到抗结垢柱时，发现过下面图片中这种一塌糊涂的情况吗？这是怎么回事？想找到一个好的办法解决这个问题吗？其实上图所示情况有相当的普遍性！ 原因主要有二个:1. 抗结垢柱填充的钠型阳离子树脂的粒度平均在0.6 mm 左右，粒
阴阳离子交换色谱柱的特点及用途
阴阳离子交换色谱柱产品特点：1、可以在SAX和SCX柱上使用有机改性剂，如乙腈和甲醇。2、通过改变pH、离子强度和有机改性剂含量，可以控制样品的保留时间。3、pH适用范围为2.0–7.0。4、提供高柱效和快速分析。阴阳离子交换色谱柱产品用途： 1、超高速分离用色谱柱——蛋白质
硅胶柱上液—固色谱洗脱剂的溶剂序列
硅胶柱上液—固色谱洗脱剂的溶剂序列ε0ⅠⅡⅢ0.00戊烷戊烷戊烷0.0542%氯化异丙烷—戊烷3%二氯甲烷—戊烷4%苯—戊烷0.1010%氯化异丙烷—戊烷7%二氯甲烷—戊烷11%苯—戊烷0.1521%氯化异丙烷—戊烷14%二氯甲烷—戊烷26%苯—戊烷0.204%乙醚—戊烷26%二氯甲烷—戊烷4%乙酸
Hamilton阳离子交换高效液相色谱柱系列应用
Hamilton的PRP-X200阳离子交换高效液相色谱柱能快速、高分辨率分离碱金属和碱土金属。不到五分钟即可完全溶解碱金属和铵，不到四分钟即可分离出碱土阳离子。由于流动相状态各不相同，每种阳离子都单独成组，消除了组间的相互干扰。· 更改流动相中的甲醇含量，可以提高或者降低碱金属离子的分辨率。PR
结合在镍柱上的蛋白可以放过夜第二天洗脱吗
一般情况下是不可以的，蛋白在柱上结合时间过长可能会影响其结构的稳定性。如果本身就是结构比较稳定的蛋白质，结合上镍柱后4度放置过夜第二天洗脱问题应该也不大，但是有可能洗脱收率会降低。
重组蛋白在10mm咪唑洗脱怎么办
以下几条路，可以走走：1. 用更低的咪唑浓度进行杂蛋白洗脱（估计会损失你的蛋白），而后洗脱获得你的蛋白；2. 可以试试Ni偶联磁珠，将蛋白从样品里面吸出来，更多信息可以在和我联系。3. 尝试用别的标签，例如GST，这个办法貌似耗时些。4. 是不是介质吸附力不强了，换一下新的试试？5. 其他……
阳离子交换层析介绍
中文名称阳离子交换层析英文名称cation exchange chromatography定 义利用不同分子在所设计的条件(如pH、离子强度等)下，携带电荷情况不同，与阳离子交换剂结合的强度不同，可以用不同的条件洗脱出不同的组分的一种层析法。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二
概述离子交换层析的洗脱
离子交换层析的洗脱会受到线性或分步盐梯度或置换展开的影响。一般最好先采用线性的盐梯度洗脱，维持梯度约10个柱体积。在最简单的情况下，梯度操作需两种缓冲液，平衡缓冲液（buffer A）和用于加载相反电荷离子所用缓冲液（buffer B）。大多数情况下，并不需要后半段的梯度，因为多数蛋白质都可以在
层析技术(Layeranalise－technique)
离子交换层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相，以蛋白质等样品为移动相，分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素和多糖等的一项技术。（一）原理在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基团，当结合阳离子基团时，可换出阴离子，则称为阴离子交换剂。如二乙氨乙基（Dicthylaminoethyl，
离子交换色谱
离子交换色谱 实验方法原理 离子交换色谱是将离子交换基因（CM、SP、Q、DEAE等）键合于一定的惰性载体（纤维素、交联葡聚糖，交联琼脂糖等）之上，并以此作
离子交换色谱
实验方法原理离子交换色谱是将离子交换基因（CM、SP、Q、DEAE等）键合于一定的惰性载体（纤维素、交联葡聚糖，交联琼脂糖等）之上，并以此作为固定相，依据样品所带电荷的不同，从而与固定相上的离子交换基团相互作用的程度不同而进行分离的一种色谱方法。离子交换色谱技术已广泛用于蛋白质、多肽、寡核苷酸、病毒
离子交换色谱（一）
实验方法原理 离子交换色谱是将离子交换基因（CM、SP、Q、DEAE等）键合于一定的惰性载体（纤维素、交联葡聚糖，交联琼脂糖等）之上，并以此作为固定相，依据样品所带电荷的不同，从而与固定相上的离子交换基团相互作用的程度不同而进行分离的一种色谱方法。离子交换色谱技术已广泛用于蛋白质、多肽、寡核苷酸、病
概述阳离子交换树脂的交换容量
离子交换树脂进行离子交换反应的性能，表现在它的“离子交换容量”，即每克干树脂或每毫升湿树脂所能交换的离子的毫克当量数，meq/g(干)或 meq/ml(湿)；当离子为一价时，毫克当量数即是毫克分子数(对二价或多价离子，前者为后者乘离子价数)。它又有“总交换容量”、“工作交换容量”和“再生交换容量
离子交换柱层析分离蛋白原理详解
1.离子交换与洗脱 所谓离子交换，是指溶液中的某一种离子与另一种靠静电力结合在惰性载体上的离子进行可逆交换的过程，即溶液中的离子结合到载体上而载体上的离子被替换下来。若惰性载体上以共价键结合着带正电荷的活性基团，则可交换阴离子，叫阴离子交换剂；若以共价键结合着带负电荷的活性基团，则可交换阳离子
溶菌酶分离纯化及酶活力、蛋白浓度测定2
2．加样蛋白浓度低于20 mg/mL，上样体积小于柱体积的1/3。3. 在整个实验过程中，流速必须得到一定的控制。过大，会使填料压缩紧密，导致流速过低，层析柱有可能堵塞而实验失败，流速过小，实验时间过长，引起酶的活性变化。对于CM Sepharose FF填料，最适流速在100cm/h以下。
镍柱纯化蛋白不挂住怎么办
有his标签么？要不就是beads的事？是你自己装的柱么？多长时间了？还有可能是你的蛋白构象变了，可能把his部分裹在里边了，找找别的条件，或者换NC端。
DEAE—离子交换剂纯化血清IgG
实验概要本文介绍了DEAE—离子交换剂纯化血清IgG的原理及操作步骤等。实验原理离子交换是指液相中的离子与固定相上可解离基团的可逆交换反应。利用这个反应先将要分离的混合物在一定pH的溶液中解离，而后流经固定相，使之与固定相上的可解离基团进行离子交换，吸附于固定相上，凡不能进行交换吸附的成分，则流出层
离子交换凝胶柱层析
原理 在植物生理生化的研究中，往往要从一个组分复杂的混合物中，将性质很相近的生物大分子分离，这是研究工作中一个很关键的问题，需要一种具有高度分辨力的技术，才能满足这一要求。离子交换层析就是这样的技术，能够分离只有很小差异的物质（例如仅有一个氨基酸不同的两种蛋白质），是分离生物大分子的一
DEAE—离子交换剂纯化血清IgG
（一）原理离子交换是指液相中的离子与固定相上可解离基团的可逆交换反应。利用这个反应先将要分离的混合物在一定pH的溶液中解离，而后流经固定相，使之与固定相上的可解离基团进行离子交换，吸附于固定相上，凡不能进行交换吸附的成分，则流出层析柱外。再根据交换吸附于固定相上的各组分解离度的差别，运用不同的pH值
离子交换层析(Ion－Exchange－Chromatography－,IEC)(4)
(2)平衡缓冲液离子交换层析的基本反应过程就是离子交换剂平衡离子与待分离物质、缓冲液中离子间的交换，所以在离子交换层析中平衡缓冲液和洗脱缓冲液的离子强度和pH 的选择对于分离效果有很大的影响。平衡缓冲液是指装柱后及上样后用于平衡离子交换柱的缓冲液。平衡缓冲液的离子强度和pH 的选择首先要保证
离子交换色谱（二）
其他 一、离子交换剂的选择 1. 剂型的选择 在决定选择离子交换剂的类别之前，先要了解所研究的生物大分子保持生物活性和可溶解性的pH范围，然后根据其等电点以及其在上述pH范围内的电泳行为观察大分子的带电情况，再据此选择合适的离子交换剂。具体方法是；在流动相pH条件下进行电泳，向阳极泳动的蛋白质，可
层析柱上柱子后压力大怎么办
19是什么单位？MPa？先试试空白运行，就是不经过柱子光走系统，看看压力是多少，检查是否系统压力过大。如果系统压力正常，则检查溶液是否澄清，有无沉淀或泛白。如果溶液没有问题，检查柱头是否堵塞，柱头前的滤膜是否需要清洗。然后检查下填料是否完整，有无被压碎的填料或者有无杂志吸附在填料上，参照说明书清洗再
层析柱上柱子后压力大怎么办
19是什么单位？MPa？先试试空白运行，就是不经过柱子光走系统，看看压力是多少，检查是否系统压力过大。如果系统压力正常，则检查溶液是否澄清，有无沉淀或泛白。如果溶液没有问题，检查柱头是否堵塞，柱头前的滤膜是否需要清洗。然后检查下填料是否完整，有无被压碎的填料或者有无杂志吸附在填料上，参照说明书清洗再
瘦不下来怎么办？减肥也可以看中医
每年的5月11日是中国肥胖日。随着生活水平的不断提高，现代社会肥胖的人群越来越多。《中国居民营养与慢性病状况报告（2020年）》显示，我国成年人超重率为34.3%、肥胖率为16.4%，6至17岁青少年和6岁以下儿童的肥胖率分别为 7.9%和3.6%。“肥胖的形成因素与遗传、环境、生活方式以及激素水平