蛋白质芯片技术应用于生化反应的检测
对酶活性的测定一直是临床生化检验中不可缺少的部分。Cohen用常规的光蚀刻技术制备芯片、酶及底物加到芯片上的小室,在电渗作用中使酸及底物经通道接触,发生酶促反应。通过电泳分离,可得到荧光标记的多肽底物及产物的变化,以此来定量酶促反应结果。动力学常数的测定表明该方法是可行的,而且,荧光物质稳定。Arenkov进行了类似的试验,他制备的蛋白质芯片片的一大优点,可以反复使用多次,大大降低了试验成本。......阅读全文
蛋白质芯片技术应用于生化反应的检测
对酶活性的测定一直是临床生化检验中不可缺少的部分。Cohen用常规的光蚀刻技术制备芯片、酶及底物加到芯片上的小室,在电渗作用中使酸及底物经通道接触,发生酶促反应。通过电泳分离,可得到荧光标记的多肽底物及产物的变化,以此来定量酶促反应结果。动力学常数的测定表明该方法是可行的,而且,荧光物质稳定。Are
蛋白质芯片对于生化反应的检测的应用
对酶活性的测定一直是临床生化检验中不可缺少的部分。Cohen用常规的光蚀刻技术制备芯片、酶及底物加到芯片上的小室,在电渗作用中使酸及底物经通道接触,发生酶促反应。通过电泳分离,可得到荧光标记的多肽底物及产物的变化,以此来定量酶促反应结果。动力学常数的测定表明该方法是可行的,而且,荧光物质稳定。Are
蛋白质芯片技术应用于抗原抗体检测
在CavinM.等人的实验中,蛋白质芯片上的抗原抗体反应体现出很好的特异性,在一块蛋白质芯片上10800个点中,根据抗原抗体的特异性结合检测到唯一的1个阳性位点。Cavin M.指出,这种特异性的抗原抗体反应一旦确立,就可以利用这项技术来度量整个细胞或组织中的蛋白质的丰富程度和修饰程度。其次利用蛋白
蛋白质芯片技术应用于药物筛选
疾病的发生发展与某些蛋白质的变化有关,如果以这些蛋白质构筑芯片,对众多候选化学药物进行筛选,直接筛选出与靶蛋白作用的化学药物,将大大推进药物的开发。蛋白质芯片有助于了解药物与其效应蛋白的相互作用,并可以在对化学药物作用机制不甚了解的情况下直接研究蛋白质谱。还可以将化学药物作用与疾病联系起来,以及药物
蛋白质芯片技术应用于疾病诊断
蛋白质芯片技术在医学领域中有着潜在的广阔应用前景。蛋白质芯片能够同时检测生物样品中与某种疾病或者环境因素损伤可能相关的全部蛋白质的含量情况,即表型指纹(phenomic fingerprint)。表型指纹对监测疾病的过程或预测,判断治疗的效果也具有重要意义。Ciphelxen Biosystems公
芯片生化反应概述
该过程指将从生物样品分离到的蛋白、DNA或RNA样品与生物芯片进行反应,从固定于芯片的探针阵列得到样品的序列信息。由于玻片本身的荧光本底很低,所以可用荧光标记的方法来对生物芯片实施检测和分析,同时具有快速、精确和安全等优点。而且,还可用多个荧光素进行标记以实现一次性分析多个生物样品[1]。玻片作为
蛋白质芯片技术生物分子反应
使用时将待检的含有蛋白质的标本如尿液、血清、精液、组织提取物等,按一定程序做好层析、电泳、色谱等前处理,然后在每个芯池里点入需要的种类。一般样品量只要2-10μL即可。根据测定目的不同可选用不同探针结合或与其中含有的生物制剂相互作用一段时间,然后洗去未结合的或多余的物质,将样品固定一下等待检测即可。
蛋白质芯片技术信号检测分析
直接检测模式是将待测蛋白用荧光素或同位素标记,结合到芯片的蛋白质就会发出特定的信号,检测时用特殊的芯片扫描仪扫描和相应的计算机软件进行数据分析,或将芯片放射显影后再选用相应的软件进行数据分析。间接检测模式类似于ELISA方法,标记第二抗体分子。以上两种检测模式均基于阵列为基础的芯片检测技术。该法操作
蛋白质芯片技术在肿瘤检测中的应用
【关键词】 蛋白质芯片;卵巢癌;前列腺癌;肿瘤;临床检验 蛋白质芯片技术在肿瘤研究领域中进展最快。随着肿瘤细胞的发生,肿瘤患者体内某些蛋白质会发生上调或下调,或产生新的与肿瘤关联的异常蛋白,而蛋白质芯片技术可以描绘出患者体液中所有蛋白质表达情况。根据正常与异常的蛋白质表达谱的差异,从而建立肿瘤的指
蛋白质芯片技术固体芯片的构建方法
常用的材质有玻片、硅、云母及各种膜片等。理想的载体表面是渗透滤膜(如硝酸纤维素膜)或包被了不同试剂(如多聚赖氨酸)的载玻片。外形可制成各种不同的形状。Lin,SR等人引采用APTS-BS3技术增强芯片与蛋白质的结合。
蛋白质芯片的技术原理
蛋白芯片技术的研究对象是蛋白质,其原理是对固相载体进行特殊的化学处理,再将已知的蛋白分子产物固定其上(如酶、抗原、抗体、受体、配体、细胞因子等),根据这些生物分子的特性,捕获能与之特异性结合的待测蛋白(存在于血清、血浆、淋巴、间质液、尿液、渗出液、细胞溶解液、分泌液等),经洗涤、纯化,再进行确认和生
细菌的生化反应检测
不同细菌由于所含的酶系统不完全相同,因而对营养物质的分解能力及代谢产物亦不一致,据此,可用以鉴别细菌的种类。 一、单糖发酵试验 【原理】 单糖发酵是将葡萄糖,乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内,使其最终浓度为0.75~1%。并加入一定量酚红指示剂及小倒管,制成单糖发酵管,接种细菌经37℃培养18
细菌的生化反应检测
不同细菌 由于所含的酶系统不完全相同,因而对营养物质的分解能力及代谢产物亦不一致,据此,可用以鉴别细菌的种类。 一、单糖发酵试验 【原理】 单糖发酵是将葡萄糖,乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内,使其最终浓度为0.75~1%。并加入一定量酚红指示剂及小倒管,制成单糖发酵管,接种细菌经37℃培养
细菌的生化反应检测
不同细菌 由于所含的酶系统不完全相同,因而对营养物质的分解能力及代谢产物亦不一致,据此,可用以鉴别细菌的种类。 一、单糖发酵试验 【原理】 单糖发酵是将葡萄糖,乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内,使其最终浓度为0.75~1%。并加入一定量酚红指示剂及小倒管,制成单糖发酵管,接种细菌经37℃培养
蛋白质芯片技术特点
⒈ 直接用粗生物样品(血清、尿、体液)进行分析⒉ 同时快速发现多个生物标记物⒊ 小量样品⒋ 高通量的验证能力⒌ 发现低丰度蛋白质⒍ 测定疏水蛋白质: 与“双相电泳加飞行质谱”相比,除了有相似功能外,并可增加测定疏水蛋白质⒎ 在同一系统中集发现和检测为一体 特异性高 利用单克隆抗体芯片,可鉴定未知抗原
蛋白质芯片技术简介
由于利用了DNA与互补的DNA或RNA结合的典型性质, DNA 芯片在短时间内就取得了成功. 然而, 已经有关于mRNA 和蛋白质之间数量关系上的争论, 而且实际上在细胞中参与各种不同反应的都是蛋白质. 因此, 如果能制造出蛋白质芯片而不是DNA芯片, 而且如果蛋白质表达强度和键合物能被发现, 就有
检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术简介
检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术 自身免疫性疾病是由异常免疫反应引起的慢性退行性或炎症性疾病。不同的自身免疫性疾病对机体的影响各有不同。例如,在多发性硬化症中,自身免疫反应的侵害对象是中枢神经系统,而在克罗恩病中则是肠道。此外,同种疾病对不同个体的组织和器官的影响程度不尽相同。 此类
蛋白质芯片的技术优势
⒈ 直接用粗生物样品(血清、尿、体液)进行分析⒉ 同时快速发现多个生物标记物⒊ 小量样品⒋ 高通量的验证能力⒌ 发现低丰度蛋白质⒍ 测定疏水蛋白质: 与“双相电泳加飞行质谱”相比,除了有相似功能外,并可增加测定疏水蛋白质⒎ 在同一系统中集发现和检测为一体 特异性高 利用单克隆抗体芯片,可鉴定未知抗原
检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术介绍(一)
自身免疫性疾病是由异常免疫反应引起的慢性退行性或炎症性疾病。不同的自身免疫性疾病对机体的影响各有不同。例如,在多发性硬化症中,自身免疫反应的侵害对象是中枢神经系统,而在克罗恩病中则是肠道。此外,同种疾病对不同个体的组织和器官的影响程度不尽相同。此类疾病的严重程度取决于患者的免疫系统情况。其人群患病率
检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术介绍(四)
方法多样化在一项研究自身抗体图谱能否预测小鼠对1型糖尿病的耐受性或易感性的试验中,研究人员将一组共266种抗原点样在玻璃芯片上。抗原中的肽分别来自热休克蛋白、组织抗原、免疫系统成分、结构抗原、激素、酶、血浆蛋白、合成寡核苷酸及细菌抗原。在这组266种原始抗原中,研究人员发现一个27种抗原的组合可以将
检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术介绍(三)
微球芯片具有显著的优势:每个微球装置均以最佳方式单独加工,随后将不同的小球装置组合起来制备最终的多路复用小球试剂。芯片检测中可以容纳大量的分析物,因此可以使用多个内部对照以确保测定系统的预期性能。自身抗体的多路复用分析中可能需要不同的对照(表II)。相对荧光是芯片技术中常用的输出信号。可以使用荧光内
检测自身免疫抗体的蛋白质芯片技术介绍(二)
芯片技术多路复用蛋白质分析技术最近研制成功,主要包括两种子技术:平板芯片和球形芯片。平板芯片:该技术采用一块二维微芯片,芯片内含针对各种分析所定义的反应位点。通过可溶阶段的配合基,平板芯片可以对蛋白质、代谢物及其他分子组成的混合物中的几种固定化蛋白进行同时检测。几年前,某研究小组制造了一种内置115
生物芯片技术的杂交反应
该过程指将从生物样品分离到的蛋白、DNA或RNA样品与生物芯片进行反应,从固定于芯片的探针阵列得到样品的序列信息。由于玻片本身的荧光本底很低,所以可用荧光标记的方法来对生物芯片实施检测和分析,同时具有快速、精确和安全等优点。而且,还可用多个荧光素进行标记以实现一次性分析多个生物样品。玻片作为支持
生物芯片技术杂交反应
该过程指将从生物样品分离到的蛋白、DNA或RNA样品与生物芯片进行反应,从固定于芯片的探针阵列得到样品的序列信息。由于玻片本身的荧光本底很低,所以可用荧光标记的方法来对生物芯片实施检测和分析,同时具有快速、精确和安全等优点。而且,还可用多个荧光素进行标记以实现一次性分析多个生物样品。玻片作为支持物还
蛋白质芯片技术探针的制备方法
低密度蛋白质芯片的探针包括特定的抗原、抗体、酶、吸水或疏水物质、结合某些阳离子或阴离子的化学集团、受体和免疫复合物等具有生物活性的蛋白质。制备时常常采用直接点样法,以避免蛋白质的空间结构改变。保持它和样品的特异性结合能力。高密度蛋白质芯片一般为基因表达产物,如一个cDNA文库所产生的几乎所有蛋白质均
凝集素芯片技术应用于肿瘤侵袭研究
肿瘤的发生、发展以及转移与糖链的表达密切相关。一些肿瘤细胞糖基化修饰的改变能够影响细胞的周期调控和细胞的增殖能力,促进肿瘤的发展,但具体分子机制尚不清晰。来自美国纽约大学医学院的科研小组借助糖基化研究新工具——凝集素芯片,发现肿瘤转移相关驱动因子,进而找到其上游调控因子以及下游靶向因子,揭开了黑
凝集素芯片技术应用于肿瘤侵袭研究
肿瘤的发生、发展以及转移与糖链的表达密切相关。一些肿瘤细胞糖基化修饰的改变能够影响细胞的周期调控和细胞的增殖能力,促进肿瘤的发展,但具体分子机制尚不清晰。来自美国纽约大学医学院的科研小组借助糖基化研究新工具——凝集素芯片,发现肿瘤转移相关驱动因子,进而找到其上游调控因子以及下游靶向因子,揭开了
生化检测技术原理
自1957年世界上第一台全自动生化分析仪诞生后,随着科学技术的发展出现了许多不同的检测技术,但其原理核心都是光谱技术中的吸收光谱法,目前主流的生化分析仪应用的便是基于吸收光谱法的分光光度法。分光光度法究竟有多神秘,让我们一起来揭开它的面纱。科学发现的过程往往与现实生活有紧密的联系,例如万有引力定律的
LncRNA芯片应用于胃癌研究
研究背景 在全世界分范围内,每年因肝癌死亡的病例超过50万人,是主要的致死恶性肿瘤之一。在过去的十年中,随着影像学的进步以及健康体检的普及,越来越多的肝癌病人在患病早期被发现。但由于肝脏捐赠者的短缺,外科肝脏切除术仍然是治疗早期肝癌病人的最主要方法。目前对于术后患者缺乏准确
LncRNA芯片应用于胃癌研究
上海交通大学附属仁济医院房静远教授主要从事消化系统肿瘤发生的分子机制、早期诊断和分子治疗等相关研究。近期,该课题组应用美国Arraystar公司的lncRNA芯片分析了胃癌组织的lncRNAs表达情况,筛选到可预测胃癌发生的分子标志物GClnc1,并且阐明了GClnc1在胃癌的发生和发展中是如何发挥