胶体金固相免疫测定法方法介绍

胶体金固相免疫测定法(1)斑点免疫金银染色法(Dot-IGS/IGSS)是将斑点ELISA与免疫胶体金结合起来的一种方法。将蛋白质抗原直接点样在硝酸纤维膜上,与特异性抗体反应后,再滴加胶体金标记的第二抗体,结果在抗原抗体反应处发生金颗粒聚集,形成肉眼可见的红色斑点,此称为斑点免疫金染色法(Dot-IGS)。此反应可通过银显影液增强,即斑点金银染色法(Dot-IGS/IGSS)。(2)斑点金免疫渗滤测定法(dot immuno-gold filtration assay,DIGFA)此法原理完全同斑点免疫金染色法,只是在硝酸纤维膜下垫有吸水性强的垫料,即为渗滤装置。在加抗原(抗体)后,迅速加抗体(抗原),再加金标记第二抗体,由于有渗滤装置,反应很快,在数分钟内即可显出颜色反应。此方法已成功地应用于人的免疫缺陷病病毒(HIV)的检查和人血清中甲胎蛋白的检测。......阅读全文

胶体金固相免疫测定法方法介绍

胶体金固相免疫测定法(1)斑点免疫金银染色法(Dot-IGS/IGSS)是将斑点ELISA与免疫胶体金结合起来的一种方法。将蛋白质抗原直接点样在硝酸纤维膜上,与特异性抗体反应后,再滴加胶体金标记的第二抗体,结果在抗原抗体反应处发生金颗粒聚集,形成肉眼可见的红色斑点,此称为斑点免疫金染色法(Dot-I

临床化学检查方法介绍固相酶免疫测定技术介绍

固相酶免疫测定技术介绍:  固相酶免疫测定主要是指ELISA,其基本原理是:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面(包被),并保持其免疫活性;用酶标记(另一种)抗原或抗体,保留其免疫活性和酶活性;在测定时,把待测标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应;用

固相团集素结合测定法

实验概要 本实验介绍了固相团集素结合测定法的原理及操作流程。 实验原理 团集素是牛血清中的一种蛋白质,它与结合在细胞表面和循环中的免疫复合物上的补体C3碎片有强烈的结合性。当把团集素包被在固相载体后,被检血清中结合有补体的免疫复合物就可与其结合,用同位素或酶标记的抗体即可检出。团集素无种属特

固相团集素结合测定法

实验概要本实验介绍了固相团集素结合测定法的原理及操作流程。实验原理团集素是牛血清中的一种蛋白质,它与结合在细胞表面和循环中的免疫复合物上的补体C3碎片有强烈的结合性。当把团集素包被在固相载体后,被检血清中结合有补体的免疫复合物就可与其结合,用同位素或酶标记的抗体即可检出。团集素无种属特异性,耐热,能

免疫学实验固相酶免疫测定技术介绍

  固相酶免疫测定技术介绍:   固相酶免疫测定主要是指ELISA,其基本原理是:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面(包被),并保持其免疫活性;用酶标记(另一种)抗原或抗体,保留其免疫活性和酶活性;在测定时,把待测标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起

固相萃取方法的相关介绍

  固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE)是从20世纪80年代中期开始发展起来的一种样品前处理技术。它是通过固体吸附剂的选择性吸附和洗脱将液体样品(固体样品也可制成液体样品)中的目标化合物与干扰化合物分离,以达到富集、分离净化样品的目的。SPE是一个包括液相和固相的物理

常用的固相杂交方法介绍

常用的固相杂交方法有斑点杂交法、夹心杂交法和原位杂交法等。下面简单介绍几种常用的核酸分子固相杂交方法。①斑点杂交法(dot blot hybridization):最常用的杂交模式.将样品DNA直接点在硝酸纤维素膜或尼龙膜上,在严格的条件下杂交后进行检测。斑点杂交法简单、迅速,不需要限制性核酸内切酶

固相萃取技术的方法介绍

  1.选择SPE 小柱或滤膜首先应根据待测物的理化性质和样品基质, 选择对待测物有较强保留能力的固定相。若待测物带负电荷, 可用阴离子交换填料, 反之则用阳离子交换填料。若为中性待测物, 可用反相填料萃取。SPE 小柱或滤膜的大小与规格应视样品中待测物的浓度大小而定。对于浓度较低的体内样品, 一般

胶体金标记技术在免疫学中的应用

胶体金标记技术由于标记物的制备简便,方法敏感、特异,不需要使用放射性同位素,或有潜在致癌物质的酶显色底物,也不要荧光显微镜,它的应用范围广,除应用于光镜或电镜的免疫组化法外,更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。1.液相免疫测定:将胶体金与抗体结合,建立微量凝集试验检测相应的

免疫胶体金技术的应用

胶体金标记技术由于标记物的制备简便,方法敏感、特异,不需要使用放射性同位素,或有潜在致癌物质的酶显色底物,也不要荧光显微镜,它的应用范围广,除应用于光镜或电镜的免疫组化法外,更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。1.液相免疫测定:将胶体金与抗体结合,建立微量凝集试验检测相应的

免疫胶体金技术的应用

  胶体金标记技术由于标记物的制备简便,方法敏感、特异,不需要使用放射性同位素,或有潜在致癌物质的酶显色底物,也不要荧光显微镜,它的应用范围广,除应用于光镜或电镜的免疫组化法外,更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。  1.液相免疫测定:将胶体金与抗体结合,建立微量凝集试验检

免疫胶体金技术介绍

一、免疫胶体金技术的基本知识1、胶体金的概念氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。2、免疫金标记技术胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质

固相萃取正压固相萃取装置介绍

常见的固相萃取设备可分为自动固相萃取仪和手动固相萃取装置。手动固相萃取装置又可分为负压型和正压型两大类。传统的固相萃取装置是以真空负压为动力源使载入固相萃取柱的液体通过固相萃取柱。负压型固相萃取装置简单,但由于这种装置难以控制液体通过固相萃取柱的流速,而且平行操作时柱与柱之间的流速差异较大。与之相反

免疫胶体金技术的测试原理及应用

  测试原理  层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式,相比ELISA试剂,除标记物不同外,同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点:  *方便使用,体现在操作简单,不需经过特殊培训。  *短时间获得检测结果,一般10-15分钟即可得出

关于固相萃取方法的选择介绍

  固相萃取技术的分离模式有多种,具体使用哪种方法,主要取决于待处理样品的相对分子质量(Mr)及样品的性质。  1.选择固相萃取应考虑的问题:  (1)待测物的化学性质:功能基团、能否离子化,是水溶性还是脂溶性。  (2)基质的性质:pH值、离子强度、是水还是有机溶剂。  (3)类似干扰物的性质。 

固相免疫测定的概念

中文名称固相免疫测定英文名称solid-phase immunoassay定  义将抗原或抗体包被在固相载体上进行免疫测定的技术。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

蛋白质定量检测方法——胶体金测定法

  胶体金(colloidal gold)是氯金酸(chloroauric acid)的水溶胶,呈洋红色,具有高电子密度,并能与多种生物大分子结合。  胶体金是一种带负电荷的疏水胶体遇蛋白质转变为蓝色,颜色的改变与蛋白质有定量关系,可用于蛋白质的定量测定。

免疫组化方法免疫胶体金技术

  免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶,它能迅速而稳定地吸附蛋白,对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此,用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针,就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位,甚至定量研究。由于胶

免疫胶体金技术3

为了得到颗粒均一的免疫金试剂,可将上述初步纯化的结合物再进一步用10%~30%蔗糖或甘油进行密度梯度离心,分带收集不同梯度的胶体金与蛋白的结合物。(2)凝胶过滤法:此法只适用于以BSA作稳定剂的胶体金蛋白结合物的纯化。将胶体金蛋白结合物装入透析袋,在硅胶中脱水浓缩至原体积的 1/5~1/10。再

免疫胶体金技术的方法原理

免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶,它能迅速而稳定地吸附蛋白,对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此,用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针,就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位,甚至定量研究。由于胶体金

固相免疫测定的技术特点

中文名称固相免疫测定英文名称solid-phase immunoassay定  义将抗原或抗体包被在固相载体上进行免疫测定的技术。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)

固相微萃取介绍

固相微萃取概述 由液固萃取和柱液相色谱技术相结合发展而来。SPE是一个柱色谱分离过程,在分离机理、固定相和溶剂的选择等方面与高效液相色谱(HLPC)有许多相似之处。SPE的填料粒径(>40μm)要比HLPC(3~10μm)。因此,SPE只能用于分离保留性质有很大差别的化合物。分离效率较低的SPE技术

固相萃取(SPE)介绍

概述 由夜固萃取和柱液相色谱技术相结合发展而来。SPE是一个柱色谱分离过程,在分离机理、固定相和溶剂的选择等方面与高效液相色谱(HLPC)有许多相似之处。SPE的填料粒径(>40μm)要比HLPC(3~10μm)。因此,SPE只能用于分离保留性质有很大差别的化合物。分离效率较低的SPE技术主要应用于

胶体金免疫层析(GICA)技术介绍

胶体金免疫层析(GICA)技术是20世纪90年代初在免疫渗滤技术基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术,由Beggs等最先用于人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定。GICA是以NC膜为载体,利用微孔膜的毛细管作用,使滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移,如同层析一般。免疫金复合物干片粘连在近NC膜条

固相萃取正相固相萃取

正相固相萃取所用的吸附剂都是极性的.取决于目标化合物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间相互作用,其中包括了氢键,π—π键相互作用,偶极-偶极相互作用和偶极-诱导偶极相互作用以及其他的极性-极性作用。

放射免疫测定法介绍

放射免疫测定法是用放射性核素标记抗原或抗体进行免疫学检测的技术。该法结合了放射性核素高灵敏性和抗原抗体反应的特异性,使检测的灵敏度达到pg水平。常用于标记的放射性核素为125碘和131碘,分为液相和固相两种方法。该法常用于胰岛素,甲状腺素,生长激素和IgE等微量物质的测定。

固相萃取仪安全方法

固相萃取仪安全方法:   1.向该装置提供的真空压力不应大于0.1Mpa。   2.固相萃取柱与接头应安装配合好,当发现系统总是达不到设定压力时,请检查各接头是否拧紧,气压盖密封垫是否平整。   3.玻璃器件在操作过程中请一定放置平当。   4.系统配有12支流量阀开关,当某一路不使用时,

固相萃取技术的方法

固相萃取技术的方法1.选择SPE 小柱或滤膜 首先应根据待测物的理化性质和样品基质, 选择对待测物有较强保留能力的固定相。若待测物带负电荷, 可用阴离子交换填料, 反之则用阳离子交换填料。若为中性待测物, 可用反相填料萃取。SPE 小柱或滤膜的大小与规格应视样品中待测物的浓度大小而定。对于浓度较低的

固相萃取方法的优点

固相萃取仪具有无可比拟的优势:优点:无需特殊装置和材料优点:操作简单,无需特殊装置优点:1.集样品富集及净化与一身,提高检测灵敏度的方法2.比液液萃取更快,节省溶剂3.可自动化批量处理4.重现性好 三、固相萃取装置及基本操作步骤:1.固相萃取柱(1)SPE小柱关于固相萃取小柱:a.常见的固相萃取柱分

固相萃取反相固相萃取

反相固相萃取反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合物通常是非极性的或极性较弱的,主要是靠非极性-非极性相互作用,是范德华力或色散力。