酶联免疫吸附试验的效果测定

测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。⑴ 酶与抗体的活性 常用琼脂扩散或免疫电泳法,使抗原与抗体形成沉淀线,经PBS漂洗1天,再以蒸馏水浸泡1小时,将琼脂凝胶片浸于酶底物溶液中着色,如果出现应有的颜色反应,再用生理盐水浸泡,颜色仍然不褪,表示结合物既有酶的活性,也有抗体活性。良好的结合物在显色后,琼扩滴度应在1:16以上。另一个测定方法是用系列稀释的酶标抗体直接以ELISA方法进行方阵滴定,此法不仅可以测定标记效果,还可以确定酶标抗体的使用浓度。⑵ 结合物的定量测定 一般是对结合物中的酶和IgG进行定量测定。常用紫外分光光度计于403nm和280nm进行测定,然后按下列公式计算:酶量(mg/ml)=OD403×0.42IgG量(mg/ml)=(OD280-OD403×0.4)×0.94×0.62对于过碘酸钠氧化法制备的标记抗体量,按下列公式计算:IgG量(mg/ml)=(OD280-......阅读全文

酶联免疫吸附试验的效果测定

测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。⑴ 酶与抗体的活性 常用琼脂扩散或免疫电泳法,使抗原与抗体形成沉淀线,经PBS漂洗1天,再以蒸馏水浸泡1小时,将琼脂凝胶片浸于酶底物溶液中着色,如果出现应有的颜色反应,再用生理盐水浸泡,颜色仍然不褪,表示结合物既有酶

关于酶联免疫吸附试验的效果测定介绍

  测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG 摩尔比值以及结合率。  ⑴ 酶与抗体的活性  常用琼脂扩散或 免疫电泳法,使抗原与抗体形成沉淀线,经PBS漂洗1天,再以 蒸馏水浸泡1小时,将 琼脂凝胶片浸于酶底物溶液中着色,如果出现应有的 颜色反应,再用生理盐水浸泡,颜色仍然不

关于酶联免疫吸附试验的效果测定介绍

  酶联免疫吸附试验测定内容包括酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。  ⑴ 酶联免疫吸附试验— 酶与抗体的活性  常用琼脂扩散或免疫电泳法,使抗原与抗体形成沉淀线,经PBS漂洗1天,再以蒸馏水浸泡1小时,将琼脂凝胶片浸于酶底物溶液中着色,如果出现应有的颜色反应,再

酶联免疫吸附试验

酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immune sorbent aay, ELISA)是Engvall和Van weemen于1971年提出的。该法是以固相载体吸附技术和免疫酶技术相结合建立的一种检测方法,其操作简便,无需特殊设备,并具有高度的敏感性和准确性,所以受到大家的广泛重视,

酶联免疫吸附试验(ELISA)测定伤寒杆菌“O”抗体

酶联免疫吸附试验是用酶标记的抗体(或SPA)检测未知抗原或抗体的方法。此法敏感性高,特异性强。常用的是ELISA方法,间接法,双抗体法和抗原法。本次试验介绍,酶联葡萄球菌蛋白A免疫分析法。ELISA法原理如下,见图9 1.加抗原使之吸附于固相载体(如塑料反应板) 2.洗涤加待测血清 3.洗涤加酶标记

酶联免疫吸附试验C1q测定法

实验概要本实验介绍了酶联免疫吸附试验C1q测定法的操作流程。包被于塑料板上的固相凝聚IgG与酶联C1q的结合受标本中免疫复合物的抑制,是一种竞争性抑制试验。为避免标本中内源C1q的干扰,应预先用IgG免疫吸附剂将其除去。主要试剂1. 免疫吸附剂系结合有IgG的纤维素。取纤维素(5%,pH值10.

酶联免疫吸附试验C1q测定法

实验概要本实验介绍了酶联免疫吸附试验C1q测定法的操作流程。包被于塑料板上的固相凝聚IgG与酶联C1q的结合受标本中免疫复合物的抑制,是一种竞争性抑制试验。为避免标本中内源C1q的干扰,应预先用IgG免疫吸附剂将其除去。主要试剂1. 免疫吸附剂系结合有IgG的纤维素。取纤维素(5%,pH值10.

酶联免疫吸附试验的原理

  ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。  因此,可通过底物的

酶联免疫吸附试验的原理

  ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种 酶标记抗体可与吸附在固相 载体上的抗原或抗体发生 特异性结合。滴加 底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现 颜色反应。因此,可通过

酶联免疫吸附试验的简介

  自从Engvall和Perlman(1971)首次报道建立酶联 免疫吸附试验(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA)以来,由于ELISA具有快速、敏感、简便、易于标准化等优点,使其得到迅速的发展和广泛应用。尽管早期的ELISA由于 特异性不够高而妨碍了其

酶联免疫吸附试验简介

  酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是 酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使 酶标记的 抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有 双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大

酶联免疫吸附试验(ELISA)

酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后

酶联免疫吸附测定法和中和抗体试验的区别

  ELISA有的用于检测中和抗体的,但大部分包被的抗原都不是用于检测中和抗体,但和机体的保护力有关;中和抗体试验主要是检中和抗体的,两者方法也不一样。

酶联免疫吸附测定

1 试剂的准备 按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。2 标本的采取和保存可用作ELISA测定

酶联免疫吸附试验(ELISA)C1q测定法

1 原理包被于塑料板上的固相凝聚IgG与酶联C1q的结合受标本中免疫复合物的抑制,是一种竞争性抑制试验。为避免标本中内源C1q的干扰,应预先用IgG免疫吸附剂将其除去。 2 材料 (1) 聚苯乙烯反应板,酶联免疫检测仪。 (2) 免疫吸附剂系结合有IgG的纤维素。取

酶联免疫吸附试验的标记方法

  良好的酶结合物取决于两个条件:即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备 标记抗体至关重要,因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中,抗体的活性有所降低,故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白,最好使用 亲和层析提纯的抗体,可提高敏感性,而且可稀释使用,减少

酶联免疫吸附试验的基本特性

用于标记抗体或抗抗体的酶须具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室温下稳定;反应产物易于显现;能商品化生产。如今应用较多的有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP应用最广。辣根过氧化物酶过氧化物酶(HRP)广泛分布于植物中,辣根中含量最高,从辣根中提取的称辣根过氧化物酶(

酶联免疫吸附试验的影响因素

  酶联免疫(ELISA)是如今检验科常用的免疫学检测方法之一,其操作简单,无须特殊设备,使其在各级医院都有应用。但是,如果忽视了影响其结果的因素,难免会造成假阴性或假阳性,因此,了解影响实验的因素,减少差错事故的发生是极其必要的。  素质因素  实验室人员的素质主要包括五个方面:思想素质、文化素质

酶联免疫吸附试验的基本方法

酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后

酶联免疫吸附试验的应用介绍

  广泛应用于多种细菌和病毒等疾病的诊断。在动物检疫方面,ELISA在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪狂犬病、蓝舌病等的诊断中已为广泛采用的标准方法。

酶联免疫吸附试验的标记方法

良好的酶结合物取决于两个条件:即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要,因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中,抗体的活性有所降低,故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白,最好使用亲和层析提纯的抗体,可提高敏感性,而且可稀释使用,减少非特异性

酶联免疫吸附试验(ELISA)的原理

基本原理是把抗原或抗体在不损坏其免疫活性的条件下预先结合到某种固相载体表面,测定时,将受检样品(含待测抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按一定程序与固相载体上的抗原抗体起反应形成抗原或抗体复合物;反应终止时,固相载体上酶标抗原或抗体被结合量(免疫复合物)即与标本中待检抗体或抗原的量成一定比例,经洗涤去除反

酶联免疫吸附试验的标记方法

  良好的酶结合物取决于两个条件:即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备 标记抗体至关重要,因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中,抗体的活性有所降低,故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白,最好使用 亲和层析提纯的抗体,可提高敏感性,而且可稀释使用,减少

酶联免疫吸附试验的标记方法

   抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要,因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。   在酶标记过程中,抗体的活性有所降低,故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白,最好使用亲和层析提纯的抗体,可提高敏感性,而且可稀释使用,减少非特异性吸附。   酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸

酶联免疫吸附试验的基本方法

  酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用最广的技术。  基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗

酶联免疫吸附试验的影响因素

酶联免疫(ELISA)是如今检验科常用的免疫学检测方法之一,其操作简单,无须特殊设备,使其在各级医院都有应用。但是,如果忽视了影响其结果的因素,难免会造成假阴性或假阳性,因此,了解影响实验的因素,减少差错事故的发生是极其必要的。素质因素实验室人员的素质主要包括五个方面:思想素质、文化素质、技术素质、

酶联免疫吸附测定的原理

  原理是抗原与抗体之间的特异性结合。酶联免疫吸附是在固相载体上包被好能与目的抗原特异性结合的抗体,当检测样本中含有目的抗原时,其会与固相载体上的抗体相结合,并加入和链接化学发光酶,通过冲洗去掉其他非目的抗原,加入显色底物与之反应,此时吸光度越大也就是颜色越深的就说样本中明目的抗原越多,没有颜色反应

酶联免疫吸附测定的原理

  酶联免疫吸附测定基本原理:抗原或抗体预先结合到某种固相载体表面;测定时,将受检样品(含待测抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原或抗体复合物;反应终止时,固相载体上酶标抗原或抗体被结合量(免疫复合物)即与标本中待检抗体或抗原的量成一定比例;经洗涤去除反

酶联免疫吸附测定的简介

  酶联免疫吸附测定enzyme linked immunosorbent assay(简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。酶联免疫吸附测定(ELISA)为免疫学中的经典实验,本词条从定义、基本原理、分类方法、操作

酶联免疫吸附测定的原理

原理是抗原与抗体之间的特异性结合。酶联免疫吸附是在固相载体上包被好能与目的抗原特异性结合的抗体,当检测样本中含有目的抗原时,其会与固相载体上的抗体相结合,并加入和链接化学发光酶,通过冲洗去掉其他非目的抗原,加入显色底物与之反应,此时吸光度越大也就是颜色越深的就说样本中明目的抗原越多,没有颜色反应的就