琥珀酸脱氢酶的测定
硫酸甲酯吩嗪(PMS)反应法 琥珀酸脱氢酶能通过一系列人工电子受体,如与PMS(吩嗪二甲酯硫酸盐),DCPIP(2,6-二氯酚靛酚)等发生反应催化琥珀酸的氧化,而借助这些中间产物的颜色变化,通过分光光度计检测即可加以定量反映,其反应式为:①Succinate+PMS→Fumarate+PMSH2;②PMSH2+DCPIP→PMS+DCPIPH2。DCPIP呈蓝色,标准的吸收光谱在600nm处,这种色泽可因其还原而渐次变淡,从而600nm处的光密度的变化与DCPIP含量成正比,测定2.6-DPIP的还原速度可以推算出SDH的活力。一分子DCPIP被还原,即代表一分子琥珀酸被氧化。故可测定此反应系统在600nm处的吸收光度变化,来计算SDH的活性。SDH活性计算:(标准-测定)/标准=μmol/min/mg。 铁氰化钾[K3Fe(CN)6]还原法 以铁氰化钾[K3Fe(CN)6]和琥珀酸钠为底物,使琥珀酸脱氢酶催化反应将铁......阅读全文
琥珀酸脱氢酶及丙二酸的抑制作用实验——甲烯蓝脱色法
实验方法原理琥珀酸脱氢酶能使琥珀酸脱氢生成延胡索酸,并将脱下的氢交给受氢体。用甲烯蓝作受氢体时,甲烯蓝被氢还原生成无色的甲烯白。其反应如下: 琥珀酸+甲烯蓝→延胡索酸+甲烯白+蓝酸 丙二酸是琥珀酸脱氢酶竞争性抑制剂细菌量越多或脱氢酶活性越高甲烯蓝脱色所需时间越短,因此,甲烯蓝脱色所需时间的倒数可用来
α酮戊二酸脱氢酶的测定实验
实验材料α-酮戊二酸脱氢酶试剂、试剂盒磷酸钾MgCl2α-酮戊二酸焦磷酸硫胺素K3[Fe(CN)6]牛血清蛋白仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品 30℃ 时,于 436 nm 处吸收值发生变化,ε436=755 l/(mol·c
丙酮酸脱氢酶(硫辛酰胺)的测定
实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 Tris-HClMgCl2丙酮酸二磷酸硫胺K3[Fe(CN)6]仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品30 ℃ 时吸收值于 436 nm 处下降,吸收系数 ε436=755 l/(mo
二氢硫辛酰胺脱氢酶的测定
实验方法原理 此可逆反应可以从任一方向检测。氧化型硫辛酸和其氨基化合物是可以购买到的,但是利用简单的步骤就可使其还原。硫辛酸和其氨基化合物都可作为底物,有氨基存在,此酶的活性要强 5 倍。实验材料 酶样品试剂、试剂盒 磷酸钾NADDTEDL-二氢硫辛酰胺仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂
血清α羟基丁酸脱氢酶测定的相关疾病
肝炎,幼淋巴细胞白血病,先天性白血病,恶性肿瘤所致贫血,食管其他恶性肿瘤,小儿急性髓样白血病,白血病
乳酸脱氢酶(LD)测定的临床意义
1、乳酸脱氢酶是无氧酵解中调节丙酮酸转化为乳酸的极重要的酶,广泛存在于肝脏、心脏、骨骼肌、肺、脾脏、脑、红细胞、血小板等组织细胞的胞浆和线粒体中。LD是四聚体,由M型和H型亚单位构成5种同工酶:H4(LD1), MH3(LD2), M2H(LD3), M3H(LD4), M4(LD5), 不同组
α酮戊二酸脱氢酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 α-酮戊二酸脱氢酶
异柠檬酸脱氢酶测定实验
实验方法原理异柠檬酸脱氢酶(NADP+),异柠檬酸:NADP+ 氧化还原酶(脱羧)。D-异柠檬酸 + NADP+ → CO2 + 2-酮戊二酸 + NADPH + H+这里所描述的实验步骤用 NADP,可以用 NAD 来代替,也可以用异柠檬酸脱氢酶(NAD +),异柠檬酸:NAD + 氧化还原酶(脱
异柠檬酸脱氢酶测定实验
基本方案 实验方法原理 异柠檬酸脱氢酶(NADP+),异柠檬酸:NADP+ 氧化还原酶(脱羧)。D-异柠檬酸 + NADP+ → CO2 + 2-酮戊二酸 +
乳酸脱氢酶测定及临床意义
英文名称:LDH 正常范围:血清 100~300U/L; 尿 560~2050U/L; 脑脊液含量为血清的1/10。 检查介绍:乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶。乳酸脱氢酶存在于机体所有组织细胞的胞质内,其中以肾脏含量较高。乳酸脱氢酶是能催化乳酸脱氢生成丙酮酸的酶
细胞活性检测代谢增殖测定
MTT检测法活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶,能使额外添加的MTT还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan),并沉积在细胞中,死细胞则无此现象。接着用二甲基亚砜(DMSO)溶解沉积在细胞中的甲瓒后,可利用酶标仪490nm波长测光吸收值,依据吸光值(OD值)计算出活细胞数量。在一定细胞数范围内,吸
丙二醛的研究方法
采用不同浓度MDA体外干预大鼠肝线粒体,氧电极法检测线粒体呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O),测定呼吸链复合物及α-酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶活性.结果:线粒体经MDA作用后,以苹果酸/谷氨酸或琥珀酸作底物,线粒体两条呼吸途径对MDA呈现不同的耐受力,前者在MDA100μmol/
关于丙二醛的基本信息介绍
采用不同浓度MDA体外干预大鼠肝线粒体,氧电极法检测线粒体呼吸控制率(RCR)、磷氧比(P/O),测定呼吸链复合物及α-酮戊二酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶活性.结果:线粒体经MDA作用后,以苹果酸/谷氨酸或琥珀酸作底物,线粒体两条呼吸途径对MDA呈现不同的耐受力,前者在MDA100μmo
关于黄素脱氢酶的反应原理介绍
大多数脱氢酶的天然受体是NAD+或NADP+〔以下用NAD(P)+表示〕,例如苹果酸脱氢酶,异柠檬酸脱氢酶等 。脱氢酶的底物经这类脱氢酶的催化使NAD(P)+还原生成NAD(P)H。另一些脱氢酶以黄素为辅基,辅基在催化反应中进行氧化还原。例如琥珀酸脱氢酶,还原型烟酰胺腺嘌岭二核苷酸(NADH)脱
脱氢酶的反应原理
大多数脱氢酶的天然受体是NAD+或NADP+〔以下用NAD(P)+表示〕,例如苹果酸脱氢酶,异柠檬酸脱氢酶等 。脱氢酶的底物经这类脱氢酶的催化使NAD(P)+还原生成NAD(P)H。另一些脱氢酶以黄素为辅基,辅基在催化反应中进行氧化还原。例如琥珀酸脱氢酶,还原型烟酰胺腺嘌岭二核苷酸(NADH)脱
关于脱氢酶的反应原理介绍
大多数脱氢酶的天然受体是NAD+或NADP+〔以下用NAD(P)+表示〕,例如苹果酸脱氢酶,异柠檬酸脱氢酶等 。脱氢酶的底物经这类脱氢酶的催化使NAD(P)+还原生成NAD(P)H。另一些脱氢酶以黄素为辅基,辅基在催化反应中进行氧化还原。例如琥珀酸脱氢酶,还原型烟酰胺腺嘌岭二核苷酸(NADH)脱
脱氢酶的反应原理
大多数脱氢酶的天然受体是NAD+或NADP+〔以下用NAD(P)+表示〕,例如苹果酸脱氢酶,异柠檬酸脱氢酶等 。脱氢酶的底物经这类脱氢酶的催化使NAD(P)+还原生成NAD(P)H。另一些脱氢酶以黄素为辅基,辅基在催化反应中进行氧化还原。例如琥珀酸脱氢酶,还原型烟酰胺腺嘌岭二核苷酸(NADH)脱氢酶
脱氢酶的反应原理
大多数脱氢酶的天然受体是NAD+或NADP+〔以下用NAD(P)+表示〕,例如苹果酸脱氢酶,异柠檬酸脱氢酶等 。脱氢酶的底物经这类脱氢酶的催化使NAD(P)+还原生成NAD(P)H。另一些脱氢酶以黄素为辅基,辅基在催化反应中进行氧化还原。例如琥珀酸脱氢酶,还原型烟酰胺腺嘌岭二核苷酸(NADH)脱氢酶
简述乳酸脱氢酶测定实验的注意事项
由于红细胞内LDH活性比正常血清中LDH活性高1000倍,溶血时血清LDH活性显著增高,故送检标本不能溶血。由于草酸盐抑制LDH,故测LDH活性,宜采用血清而不采用血浆。另外,若血清中未除尽血块,无论在4℃还是室温存放标本,LDH活性都将明显增高。
血清α羟基丁酸脱氢酶测定的注意事项
不合宜人群:有明显出血倾向的人群。 检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天的晚八时以后,应禁食。 检查时要求:抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。
乳酸脱氢酶测定的原理与临床意义
乳酸脱氢酶测定的原理 乳酸脱氢酶催化乳酸至丙酮酸之间的可逆性反应,目前正反两个方向的反应均能测定,由于逆反应的速度比正反应快4倍,测得的活性也高得多,因此采用不同反应方式的试剂盒得出的结果也不相同。 1994年IFCC推荐的参考方法为从乳酸至丙酮的正反应。 L-乳酸+氧化型辅酶Ⅰ→丙酮酸+
关于乳酸脱氢酶测定的临床意义介绍
(1)心肌梗死:心肌梗死后9-20h开始上升,36-60h达到高峰,持续6-10天恢复正常,因此可作为急性心肌梗死后期的辅助诊断指标。 (2)肝脏疾病:急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝癌、肝硬化、阻塞性黄疸等。 (3)血液病:如白血病、贫血、恶性淋巴瘤等。 (4)骨骼肌损伤、进行性肌萎缩、肺梗
乳酸脱氢酶测定的原理与临床意义
乳酸脱氢酶测定的原理乳酸脱氢酶催化乳酸至丙酮酸之间的可逆性反应,目前正反两个方向的反应均能测定,由于逆反应的速度比正反应快4倍,测得的活性也高得多,因此采用不同反应方式的试剂盒得出的结果也不相同。 1994年IFCC推荐的参考方法为从乳酸至丙酮的正反应。L-乳酸+氧化型辅酶Ⅰ→丙酮酸+还原型辅酶Ⅰ。
二氢硫辛酰胺脱氢酶的测定实验
二氢硫辛酰胺的氧化反应 硫辛酰胺的还原反应 实验方法原理 此可逆反应可以从任一方向检测。氧化型硫辛酸和其氨基化合物是可以购买到的,但是利用简单的步骤
血清α羟基丁酸脱氢酶测定的临床意义
异常结果: 升高常见于急性心肌梗塞、骨骼肌损伤、急性肝炎、白血病及恶性肿瘤等。 如果平时没有上述疾病病史以及相关的临床症状,可以隔2-4周再到医院复查。 如果复检结果傲然是阳性,应该到医院作进一步检查,以明确或解除上述疾病。 需要检查的人群:虚弱、面色苍白,有一种生病感。食欲减退,体重下
丙酮酸脱氢酶(硫辛酰胺)的测定实验
氰铁酸作为电子受体 二氯酚吲哚酚作为电子受体 实验方法原理 实验材料 酶样品
血清α羟基丁酸脱氢酶测定的检查过程
采用静脉采血进行检测。静脉采血前要仔细检查针头是否安装牢固,针筒内是否有空气和水分。所用针头应锐利、光滑、通气,针筒不漏气。先用30g/L碘酊棉签自所选静脉穿刺处从内向外、顺时针方向消毒皮肤,待碘酊挥发后,再用75%乙醇棉签以同样方法拭去碘迹。以左手拇指固定静脉穿刺部位下端,右手拇指和中指持注射
琥珀酸的储运方法
1.运输注意事项:起运时包装要完整,装载应稳妥。运输过程中要确保容器不泄漏、不倒塌、不坠落、不损坏。严禁与氧化剂、还原剂、碱类、食用化学品等混装混运。运输途中应防曝晒、雨淋,防高温。车辆运输完毕应进行彻底清扫;2.储存注意事项:储存于阴凉、通风的库房。远离火种、热源。应与氧化剂、还原剂、碱类分开存放
简述琥珀酸酐的用途
1、医药工业用于制造镇痛剂、利尿药、止痛药、解热药及消炎、避孕、抗癌等药物; 2、有机工业用作合成有机化合物的中间体; 3、合成树脂工业用于制造醇酸树脂、离子交换树脂; 4、染料工业经水解可用作合成染料的原料; 5、塑料工业用于制造玻璃纤维增强塑料; 6、农药工业用于创造植物生长调节剂
琥珀酸酐的基本介绍
琥珀酸酐是一种有机化合物,分子式C4H4O3,大量用于食品添加剂,作为酱油、清酒、饮料等的调味剂。本品可用作醇酸树脂的改性剂、不饱和聚酯树脂的改性剂,可提高其粘附性及耐水性。也用作医药的原料;离子交换树脂的交联剂等。 无色针状或粒状结晶,溶于乙醇、三氯甲烷和四氯化碳,微溶于水和乙醚。遇热水可水