在westernblot中loadingbuffer的作用
1、指示剂，方便观察电泳进行的程度；2、密度大，携带你的样本沉到孔的底部；3、保持蛋白线性及携带过量负电荷的状态。 除此之外，里面最重要的是还有巯基乙醇还原剂来让蛋白质充分变性，同时保护-sh基团。......阅读全文
In－vitro－Sphingomyelinase－Assay
Reagents:Lysis buffer25 mM Tris-HCl, pH 7.45 mM EDTA1 mM ATP20 µg/ml CLAP1 mM PMSFBuffer A10 mM MgCl20.2 M Tris-HCl, pH 7.40.2 % Triton X-100Buffer B0
UV－CrossLinking－an...－（二）
实验步骤1. UV cross-linking of tissue culture cells 1) Remove media and add ice-cold PBS to cells (e.g. use cells grown in a 10 cm plate for three ex
Alkaline－agarose－gel－electrophoresis
Alkaline agarose gel electrophoresis (Sambrook et al., 1989)Alkaline agarose gels can be used to determine the size and quality of first and second st
病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒使用说明
病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒一、简介病毒总核酸提取试剂盒适合于从血清、血浆、组织匀浆等样品中提取病毒总核酸。试剂盒基于硅胶柱纯化技术，提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提，也无需进行耗时的醇类沉淀。该产品已经成功地提取了乙肝A/C、丙肝、以及诺如病毒标准品等的核酸。获得的DNA/RNA可直接用于
血基因组DNA提取实验
实验方法原理 本试剂盒采用特殊的细胞裂解和蛋白去除液（包括蛋白酶K 裂解）从抗凝全血中得到基因组DNA。适用于从冻全血、血浆、血清、骨髓、其他体液、淋巴细胞、培养细胞、病毒和线粒体中提取DNA。实验材料 抗凝全血试剂、试剂盒 血基因组DNA 试剂盒仪器、耗材 96孔深孔板96圆孔板96孔DNA制备板
Stripping－Western－Blots
1) After ECL development, wash membrane once for 10min with PBST.2) Incubate the membrane in stripping buffer (see below) in a heat-sealed plastic bag
UV－CrossLinking－an...－（一）
实验概要Interest in RNA-protein interactions is booming as we begin to appreciate the role of RNA, not just in well-established processes such as trans
Isolation－Of－PCR－Products
实验概要Rapid and efficient purification of PCR products from salts, primers, dNTPs, and other non-nucleic acid reagents.实验原理The ChargeSwitch® TechnologyT
ImmunohistochemistyFluorescence－Protocol1
MaterialsCytokine-specific Primary Antibodiesunlabeled or biotinylated antigen-affinity purified polyclonal antibodies (R&D Systems ''AF'&
Staining－Procedure－for－Flow－Cytometric－Detection－of－Human－Cyclins
Staining Procedure for Flow Cytometric Detection of Human CyclinsThis is a standard protocol used at Pharmingen for Quality Control testing of the ant
动物组织基因组DNA提取试剂盒使用说明（一）
动物组织基因组DNA提取试剂盒一、简介动物组织基因组DNA提取试剂盒(DePure Tissue DNA Kit)适用于动物组织、培养细胞、抗凝血液、体液、分泌液等生物样品的DNA提取。试剂盒基于硅胶柱纯化技术，提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提，也无需进行耗时的醇类沉淀，整个提取过程只需30分
流式细胞术，怎么处理样本？
流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）能够快速测定细胞悬液中单个细胞的生物学性质，并可以对特定的细胞进行分选收集。广泛用于细胞生物学，免疫学，遗传学，基础医学等领域。接下来的 Protocol 中以小鼠的淋巴细胞为例进行细胞表面和胞内染色。一. 试剂准备Wash Buffer：PBS+1
Immunoprecipitation
实验概要In the IP method, the protein from the cell or tissue homogenate is precipitated in an appropriate lysis buffer by means of an immune complex
Bacic－Immunoprecipitation
实验概要 Immunoprecipitation (IP) is one of the most widely used immunochemical techniques. Immunoprecipitation followed by SDS-PAGE and immunoblotting,
E.Z.N.A.®－Protocol－for－Tissue
实验概要The E.Z.N.A.® Tissue DNA Kit provides a rapid and easy method for the isolation of genomic DNA for consistent PCR and Southern analysis. Up to 3
白细胞介素8（IL－8）检测实验
实验方法原理 采用两株识别不同表位的抗IL-8单克隆抗体，其中一株（4D7）作为包被抗体，以识别和结合待检标本中的IL-8，另一株作为酶标抗体，与结合于包被抗体的IL-8的另一个表位结合并催化底物显色。实验材料 抗体标准品ABTS试剂、试剂盒 缓冲液PBS仪器、耗材 ELISA板实验步骤 1. 包
FlagHA－double－tag－IP
实验概要Isolate the unknown protein that could interact with bait from cell lysate, for potential Mass spectrometry.主要试剂50mM Tris, pH8.020 mM glycerol b-p
DNA凝胶回收试剂盒使用方法
1.在琼脂糖凝胶-EB电泳后，在紫外灯上小心的把所需的DNA片段切下，尽量去除多余的凝胶并尽量少带电泳缓冲液，称重，装入1.5 ml离心管。2. 按照凝胶的重量近似的估计其体积，假设其密度为1g/ml，凝胶的体积可按如下方法计算：若凝胶薄片的重量为0.2 g，则其体积为0.2 ml。3. 在上述离心
Stripping－for－reprobing－western－blots
实验概要Stripping is the term used to describe the removal of primary and secondary antibodies from a western blot membrane. Stripping is useful when on
亲和层析法（aflinity－chromatography）纯化蛋白质
若表现蛋白质上含有一段六个His 的片段，而亲和吸着剂胶体上接有镍离子，此蛋白质会专一性地结合到吸着胶体；洗去杂质后可用imidazole 溶离纯质蛋白质（Pharmacia 操作手册， Affinity Chromatography）。一、仪器设备：1.亲和层析管柱 （Bio-Rad 731-15
Stripping－for－reprobing－western－blots
实验概要Stripping is the term used to describe the removal of primary and secondary antibodies from a western blot membrane. Stripping is useful when on
Dynabeads®－CoImmunoprecipitation－Kit
实验概要The Dynabeads® and buffers provided in this kit will enable you to a) covalently immobilize antibodies of your choice onto the surface of Dynab
Dynabeads®－CoImmunoprecipitation－Kit
实验概要The Dynabeads® and buffers provided in this kit will enable you to a) covalently immobilize antibodies of your choice onto the surface of Dynab
PCR产物的直接纯化原理、材料与方法
一．原理PCR产物一般都含有过量的引物、Taq DNA酶及dNTP，这些成分的存在将直接影响到后续的酶切、双脱氧PCR测序反应等过程，因此有必要除去。目前核酸纯化的方法有很多，商用化试剂盒的出现使得DNA的纯化过程变得更加简便快捷。本实验中，Buffer PCR-A促使大于100bp的DNA
Magnetic－Depletion－of－SSEA4+－Undifferentiated－Embryonic－Stem－Cells
实验概要Human embryonic stem cells can be differentiated into neural-, mesenchymal and hematopoetic stem cells. This product is intended for the magneti
PCR产物的直接纯化原理、材料与方法
一．原理PCR产物一般都含有过量的引物、Taq DNA酶及dNTP，这些成分的存在将直接影响到后续的酶切、双脱氧PCR测序反应等过程，因此有必要除去。目前核酸纯化的方法有很多，商用化试剂盒的出现使得DNA的纯化过程变得更加简便快捷。本实验中，Buffer PCR-A促使大于100bp的DNA片断选择
Native－chromatin－immunoprecipitation－protocol
实验概要The method is a native chromatin immunoprecipitation protocol.主要试剂1. 10 x TBS 0.1 M Tris-HCl (pH 7.5) 1.5 M NaCl 30 mM CaCl2 20 mM MgCl2 50 mM Na
EMSA凝胶迁移－(Electrophoretic－mobility－shift－assay)实验
实验原理凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温，
Vacuum/Spin－Protocol－for－Tissue－DNA－Extraction
实验概要The E.Z.N.A.® Tissue DNA Kit provides a rapid and easy method for the isolation of genomic DNA for consistent PCR and Southern analysis. Up to 3
常用试剂配制－5
Sodium citrate (MW 294.10)0.09 MDissolve 2.65 grams of sodium citrate to a final concentration of 100 ml with water.Sodium citrate/formaldehyde (for s