简述腺相关病毒的载体特点
1、安全性好 2、对肌肉、肝脏、神经组织等感染效率高 3、载体自身免疫原性低 4、长期表达 5、比较稳定,易于保存和运输 ......阅读全文
逆转录病毒载体的特点
保留病毒颗粒的包装信号,而缺失病毒颗粒包装蛋白基因;它可以克隆并表达外源基因,但不能自我包装成有增殖能力的病毒颗粒。
简述诺瓦克病毒的特点
诺如病毒变异快、环境抵抗力强、感染剂量低,感染后潜伏期短、排毒时间长、免疫保护时间短,且传播途径多样、全人群普遍易感,因此,诺如病毒具有高度传染性和快速传播能力。诺如病毒感染发病的主要表现为腹泻和/或呕吐,国际上通常称之为急性胃肠炎。我国一直将其列入丙类传染病中“其他感染性腹泻病(除霍乱、细菌性
简述逆转录病毒载体的缺点
保留病毒颗粒的包装信号,而缺失病毒颗粒包装蛋白基因;它可以克隆并表达外源基因,但不能自我包装成有增殖能力的病毒颗粒。 (1)随机整合,有插入突变、激活癌基因的潜在危险; (2)逆转录病毒载体的容量较小,只能容纳7 kb以下的外源基因。
腺相关病毒(AAV)在动物实验中的应用
腺相关病毒属于微小病毒科 (parvovirus),为无包膜的单链线状 DNA 病毒,基因组大小约 4.7 kb。利用腺相关病毒可以将外源基因转入动物组织和细胞中,具有安全性高、免疫原性低、宿主范围广、表达稳定等多种优点,广泛应用于动物体内研究。 腺相关病毒血清型众多(12种),不同血清型
AAV(腺相关病毒)的结构及生产过程
在日常生活中,我们经常听到或者亲身参与到各种“圈”中,例如,时尚圈,娱乐圈,艺术圈,还有上海的各大商圈和可食用的甜甜圈,当然,对大多数人来说最熟悉的莫过于微信朋友圈了。话说,在基因治疗领域也有一个圈,小编暂且给它取名叫“病毒载体圈“,此圈中有这样一位傲娇的明星大咖,它不仅理化性质独特(可耐受冻融、6
腺相关病毒(AAV)在动物实验中的应用
腺相关病毒属于微小病毒科 (parvovirus),为无包膜的单链线状 DNA 病毒,基因组大小约 4.7 kb。利用腺相关病毒可以将外源基因转入动物组织和细胞中,具有安全性高、免疫原性低、宿主范围广、表达稳定等多种优点,广泛应用于动物体内研究。 腺相关病毒血清型众多(12种),不同血清型
腺相关病毒载体基因治疗产品非临床研究技术指导原则-公开征求意见
关于公开征求《腺相关病毒载体基因治疗产品非临床研究技术指导原则(征求意见稿)》意见的通知 为规范和指导腺相关病毒载体基因治疗产品的非临床研究,我中心在前期调研的基础上,结合国内外相关指导原则和技术要求,以及当前技术发展和科学认知,撰写了《腺相关病毒载体基因治疗产品非临床研究技术指导原则(征求
自噬双标腺相关病毒说明(二)
(Tom Egil Hansen and Terje Johansen,BMC Biology,2011) 图4 Vigene自噬双标病毒载体图谱五.Vigene mCherry-GFP-LC3B 自噬双标操作方法(一)体外实验以2型AAV病毒为例,Vigene为您推荐的MOI值104-105,是根
腺相关病毒(AAV)技术快速入门手册(二)
rAAV的局限性有哪些?1.体外实验表达水平较低:主要是因为rAAV病毒的基因组是单链DNA,在体外环境形成双链并转录翻译外源基因的效率非常低。可以在体外水平感染rAAV病毒的同时感染辅助病毒比如Ad5型腺病毒或者终浓度10~50mM的丁酸钠等方法提高细胞实验的rAAV表达量。2.需较长时间开始表达
自噬双标腺相关病毒说明(一)
一.关于自噬及LC31. 自噬大自噬(macroautophagy),也就是通常说的自噬(autophagy),是真核细胞蛋白降解的途径之一。自噬可以被描述为细胞质内的成分(细胞器、蛋白等)被双层膜的囊泡包裹,形成自噬体(autophagosome),进而传递到溶酶体进行降解的过程。详细来说,自噬过
干货:腺相关病毒(AAV)技术快速入门手册
腺相关病毒(AAV)作为一种安全、持久、高效、高特异性的基因操作工具,在生物学特别是神经生物学领域中被广泛使用。许多新手对于AAV的使用往往是知其然而不知其所以然。这篇短文将以图文结合的形式争取让大家在最短的时间内全面了解这种病毒工具。 什么是AAV? 野生型AAV是一种复制缺陷型微
腺相关病毒(AAV)技术快速入门手册(一)
腺相关病毒(AAV)作为一种安全、持久、高效、高特异性的基因操作工具,在生物学特别是神经生物学领域中被广泛使用。许多新手对于AAV的使用往往是知其然而不知其所以然。这篇短文将以图文结合的形式争取让大家在最短的时间内全面了解这种病毒工具。什么是AAV?野生型AAV是一种复制缺陷型微小病毒,需要腺病毒或
简述艾滋病毒的病毒的特点
主要攻击人体的辅助T淋巴细胞系统,一旦侵入机体细胞,病毒将会和细胞整合在一起终生难以消除; 广泛存在于感染者的血液、精液、阴道分泌物、乳汁、脑脊液、有神经症状的脑组织液中,其中以血液、精液、阴道分泌物中浓度最高; 对外界环境的抵抗力较弱,对乙肝病毒有效的消毒方法对艾滋病病毒消毒也有效; 感
简述HBV病毒的特点分布
乙肝病毒(HBV)是一种DNA病毒,就像毒蛇分泌的某种毒液只会针对特定的身体部位起作用一样,乙肝病毒也只对肝脏“情有独衷”,在生物学上它是嗜肝DNA病毒科(hepadnavividae)家族中的一员。这个家族中的病毒成员在哺乳动物和鸟类的身上也都有发现,它们的结构、基因序列和复制策略都非常相似,
AAV(腺相关病毒)的结构及生产过程介绍
在日常生活中,我们经常听到或者亲身参与到各种“圈”中,例如,时尚圈,娱乐圈,艺术圈,还有上海的各大商圈和可食用的甜甜圈,当然,对大多数人来说最熟悉的莫过于微信朋友圈了。话说,在基因治疗领域也有一个圈,小编暂且给它取名叫“病毒载体圈“,此圈中有这样一位傲娇的明星大咖,它不仅理化性质独特(可耐受冻融
腺相关病毒(AAV)在动物实验中的应用(一)
腺相关病毒属于微小病毒科 (parvovirus),为无包膜的单链线状 DNA 病毒,基因组大小约 4.7 kb。利用腺相关病毒可以将外源基因转入动物组织和细胞中,具有安全性高、免疫原性低、宿主范围广、表达稳定等多种优点,广泛应用于动物体内研究。腺相关病毒血清型众多(12种),不同血清型对不同组织亲
腺相关病毒(AAV)在动物实验中的应用(二)
三、肝脏AAV2、AAV5、AAV7 和 AAV8,其中 AAV7 和 AAV8 的效率是 AAV2 的 10-100 倍。注射部位常选择门静脉、外周静脉和尾静脉。注射病毒滴度一般选择 8×10^10-2×10^12(GC/kg)(人、灵长类);1×10^11 GC/只鼠,稀释成 50-10
基因治疗药物递送之腺相关病毒(AAV)
2012年,首个基因治疗药物Glybera获欧盟批准,该药物基于腺相关病毒(AAV)载体用于家族性脂蛋白脂酶缺乏(LPLD)成人患者的治疗。 去年,FDA批准的第一个体内基因疗法是Luxturna,同样使用AAV作为递送载体,它被施用于眼睛以治疗罕见的遗传性失明。 AAV是一种约26nm大小
腺病毒载体的分类
第一代腺病毒载体:一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体,此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应,纯化后可以安全使用,体内表达周期可达4周。第二代腺病毒载体:E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体,产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性方面有所
腺病毒载体综述
腺病毒的一般特性 腺病毒的形态是特征性的二十面体病毒壳体(Stewart et al., 1993)。其病毒壳体含有三种主要的蛋白:六邻体(II),五邻体基底(III)和纤突(IV),还有多种其他的辅助蛋白VI,VIII,IX,IIIa和Iva2(Fig. 1)。腺病毒基因组是一个线性的双链D
简述麻疹病毒的传播特点
传播快速, 任何没患过麻疹又没接种过麻疹疫苗的人(易感人群),只要跟正在患麻疹的病人见上一面,就会被感染。因为麻疹病毒就在麻疹病人的眼泪、鼻、口、咽和气管等分泌物中,通过喷嚏、咳嗽和说话等由飞沫传播。传染性极强,与易感者接触后90%以上均发病,麻疹病毒外号就叫“见面传”。以往每隔2~3年一次暴发
简述冠状病毒的临床特点
冠状病毒是成人普通感冒的主要病原之一,在儿童可以引起上呼吸道感染,一般很少波及下呼吸道。冠状病毒感染的潜伏期一般为2至5天,平均为3天。典型的冠状病毒感染呈流涕、不适等感冒症状。不同型别病毒的致病力不同,引起的临床表现也不尽相同,OC43株引起的症状一般比229E病毒严重。冠状病毒感染可以出现发
简述甲型肝炎病毒的临床特点
1、甲肝病毒的特点:属于小核糖核酸病毒,含有一个单股正链RNA基因组,仅有一个血清型和一个抗原抗体系统,因此其检测抗体在世界各国使用。HAV耐热,在60摄氏度1小时仅部分灭活。甲肝属于粪口传染性疾病,与乙肝由注射器,围生期经胎盘等或者丙肝由注射,输血等血源性感染不同,尚未发现母婴垂直传播甲肝的报
病毒包装技术——病毒与非病毒载体
基于转化医学的研究理念,锐赛知道,每一项临床疾病的致病源头或表象最初都是由个体体内某个基因的突变导致了。所以每一项临床疾病的研究,整体课题项目开展的最初源头也必须从一个基因开始。锐赛在多年的转化医学研究中,在于各个临床医师的整体项目合作中,探讨得出的不仅是转化医学临床研究课题的整体思路,一般实验方向
病毒包装技术——腺病毒载体的制备
1 菌液的准备1.1. 取含目的质粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超净台用接种环划线于氨苄抗性的平板上,37℃倒置培养12-16h。待平板长出菌落,挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无目的质粒的菌液,则需取库存质粒进行转化,然后挑单克隆摇菌。1.2. 将单克隆接种于5ml氨苄
基因载体的相关介绍
基因载体本身是DNA,除根据其来源分为质粒载体、噬菌体载体、病毒载体等外,还可以根据它们的主要用途分为克隆载体与表达载体。根据它们的性质分为温度敏感型载体(temperature sensitive vector)、融合型表达载体、非融合型表达载等。 基因载体(vector) 的作用是运载目的
腺病毒载体的分类介绍
第一代腺病毒载体:一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体,此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应,纯化后可以安全使用,体内表达周期可达4周。 第二代腺病毒载体:E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体,产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性
关于病毒载体的基本介绍
病毒载体可将遗传物质带入细胞,原理是利用病毒具有传送其基因组进入其他细胞,进行感染的分子机制。可发生于完整活体(in vivo)或是细胞培养(in vitro)中。可应用于基础研究、基因疗法或疫苗。
关于慢病毒载体的介绍
慢病毒载体(Lentiviral vector)较逆转录病毒载体有更广的宿主范围,慢病毒能够有效感染非周期性和有丝分裂后的细胞。慢病毒载体能够产生表达shRNA的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性细胞、干细胞、受精卵以及分化的后代细胞中表达shRNA,实现在多种类型的细胞和转基因小鼠中特异而稳定
简述逆转录病毒的特点
1)病毒为球形,直径100~120纳米,衣壳20面体立体对称,有包膜; 2)基因组为二倍体(唯一基因组非单倍体的病毒),两个相同+ssRNA; 3)含有逆转录酶和整合酶; 4)复制通过DNA中间体,并与宿主细胞的染色体整合(唯一会主动整合的病毒); 5)具有gag、pol、env编码基因