关于病毒载体的基本介绍

病毒载体可将遗传物质带入细胞,原理是利用病毒具有传送其基因组进入其他细胞,进行感染的分子机制。可发生于完整活体(in vivo)或是细胞培养(in vitro)中。可应用于基础研究、基因疗法或疫苗。......阅读全文

关于病毒载体的基本介绍

  病毒载体可将遗传物质带入细胞,原理是利用病毒具有传送其基因组进入其他细胞,进行感染的分子机制。可发生于完整活体(in vivo)或是细胞培养(in vitro)中。可应用于基础研究、基因疗法或疫苗。

关于腺相关病毒载体的基本介绍

  腺病毒相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是一类单链线状DNA缺陷型病毒。其基因组DNA小于5 kb,无包膜,外形为裸露的20面体颗粒。AAV不能独立复制,只有在辅助病毒(如腺病毒、单纯疱疹病毒、痘苗病毒)存在时,才能进行复制和溶细胞性感染,否则只能建立溶源性潜伏感染

关于慢病毒载体的基本信息介绍

  慢病毒载体可以将外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达目的序列的效果。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,从而达到良好的的基因治疗效果。对于一些较难转染的细胞, 如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等,使

关于杆状病毒载体的基本信息介绍

  当前应用最广的杆状病毒表达体系是Autographa california multiply enveloped nuclear polyhedrosisvirus (AcMNPV) 的裂解病毒,简称为杆状病毒(baculovirus)。这类载体的特点是:杆状病毒表达体系全部使用存在于高等真核细

腺相关病毒载体的基本介绍

  腺相关病毒载体是利用天然存在的腺相关病毒某些特性经过基因工程改造后产生的一种可供人工转基因的载体。腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是简单的非致病性单链DNA病毒,需要辅助病毒参与生活周期,辅助病毒通常为腺病毒(Ad)或者单纯疱疹病毒(HSV)。基因组两端为末端反

病毒载体的基本信息介绍

  可供利用的病毒可分为逆转录病毒、慢病毒与腺病毒。  1.分为: 噬菌体载体、杆状病毒载体、动物病毒载体、植物病毒载体  2. 优点:转导效率高、复杂的装配过程由细胞完成、不同病毒载体具有不同表达特点  3.根据病毒载体在主细胞中的存在情况分为瞬时表达病毒载体和稳定表达病毒载体  3-1瞬时表达病

关于慢病毒载体的介绍

  慢病毒载体(Lentiviral vector)较逆转录病毒载体有更广的宿主范围,慢病毒能够有效感染非周期性和有丝分裂后的细胞。慢病毒载体能够产生表达shRNA的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性细胞、干细胞、受精卵以及分化的后代细胞中表达shRNA,实现在多种类型的细胞和转基因小鼠中特异而稳定

腺病毒载体的基本信息介绍

  腺病毒是无包膜的线性双链DNA病毒,在自然界分布广泛,至少存在100种以上的血清型。其基因组长约36kb,两端各有一个反向末端重复区(ITR),ITR内侧为病毒包装信号。基因组上分布着4个早期转录元(E1、E2、E3、E4)承担调节功能,以及一个晚期转录元负责结构蛋白的编码。早期基因E2产物是晚

病毒和噬菌体载体的基本介绍

  病毒主要有DNA(或RNA)和外壳蛋白组成,经包装后成为病毒颗粒。通过感染,病毒颗粒进入宿主细胞,利用宿主细胞的合成系统进行DNA(或RNA)复制和壳蛋白的合成,实现病毒颗粒的增殖。把感染细菌的病毒专门称为噬菌体,由此构建的克隆载体则称为噬菌体克隆载体。  噬菌体作为载体,可插入长10~20kb

腺相关病毒载体的基本构建介绍

  1、AAV病毒的感染细胞  AAV载体对于骨骼肌、视网膜、肝细胞、心脏平滑肌细胞、神经元细胞、胰岛B细胞、关节滑膜细胞等具有良好的感染效果,而对于淋巴细胞、造血干细胞、神经胶质细胞、成纤维细胞等感染效果较差。  2、病毒的加样量  病毒量为10-10V.P/Cell时最佳。如果太低,基本检测不出

关于慢病毒载体的概念介绍

  慢病毒载体是指以人类免疫缺陷病毒-1 (H IV-1) 来源的一种病毒载体,慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息,是慢病毒载体系统的主要组成部分。携带有外源基因的慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下,经过病毒包装成为有感染力的病毒颗粒,通过感染细胞或活体组织,实现外源基因在

关于慢病毒表达载体的介绍

  慢病毒表达载体,即通常所说的穿梭载体,包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中

关于质粒载体的基本介绍

  质粒是小型环状DNA分子,在基因工程中作为最常用,最简单的载体,必须包括三部分:遗传标记基因,复制区,目的基因。 质粒在所有的细菌类群中都可发现,它们是独立于细菌染色体外自我复制的DNA分子。自然界中,质粒是在营养充足时出现的,它在结构、大小、复制方式,每个细菌的拷贝数,在不同的细菌体内的繁殖力

腺相关病毒载体的基本信息介绍

  腺相关病毒载体是利用天然存在的腺相关病毒某些特性经过基因工程改造后产生的一种可供人工转基因的载体。腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是简单的非致病性单链DNA病毒,需要辅助病毒参与生活周期,辅助病毒通常为腺病毒(Ad)或者单纯疱疹病毒(HSV)。基因组两端为末端反

关于反转录病毒载体的应用介绍

  反转录病毒载体是常用的病毒载体之一。反转录病毒的DNA基因组的两端各有一个长末端重复序列(5'—LTR和3'—LTR),有一个包装病毒颗粒时必需的非编码序列ψ+,同时有三个编码蛋白质的基因gag、pol和env。  反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右,以很高的

关于反转录病毒载体的应用介绍

  反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右,以很高的转染率感染宿主细胞,特别是分裂中的细胞。转入宿主的细胞后,反转录病毒载体随即整合到宿主细胞基因组内,这种整合的位点是随机的。反转录病毒载体在构建时,删去了poi、env基因和gag基因的3’端,但保留了病毒颗粒所需的ψ+序列。其目的

关于杆状病毒表达载体的介绍

  BEV,即“杆状病毒表达载体”。是“Baculovirus Expression Vector”的缩写,译为“杆状病毒表达载体”,有真核表达载体、原核表达载体、酵母表达载体、植物表达载体、昆虫表达载体等多重区分。目前应用较多的是昆虫杆状病毒表达系统,利用病毒携带目的基因在昆虫细胞中表达。这类系统

关于酵母质粒载体的基本介绍

  酵母质粒载体是基因表达载体的一种,既可以在大肠杆菌中、又可以在酵母系统中进行复制与扩增,所以也称为穿梭载体。它分为整合载体和自我复制载体两类。  ①整合载体:它带有一个酵母URA3标志基因和大肠杆菌的复制和报告基因。  ②自我复制载体:该类载体在酵母中可以自我复制。

关于基因表达载体的基本介绍

  基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。  基因工程(genetic engineering)  构成:启动子、终止子、标记基因、目的基因  又

关于慢病毒载体的包装成分介绍

  包装成分的构建应在不重组病毒的装配和感染力的前提下,尽可能地减少无关的HIV-1蛋白的表达,为野生型病毒的恢复设置障碍。Naldini等在构建包装质粒时,阻止env基因的表达。在此基础上,Zufferey等将包装包装质粒上表达调节蛋白Nef、Vif、Vpr和Vpu的4个基因分别删除或联合删除。这

关于慢病毒载体存在的问题分析介绍

  尽管慢载体的研究有了很大进展,但距离临床应用还有很长的路要走。首先,重组病毒的滴度还不够高,除Naldini等报道的结果外,其余均在101TU/ml~103TU/ml之间,难以达到体内应用的需要;其次,由于HIV复杂的生物学性质,要像常用的小鼠逆转录病毒载体那样建立稳定的HIV载体包装细胞十分困

关于腺相关病毒载体的优缺点介绍

  1、优点  在辅助腺病毒存在下,AAV可以高效定点整合至人染色体中;而现在的AAV载体已经不需要腺病毒辅助,不插入宿主的基因组,而是游离于宿主细胞基因之外,呈卫星状稳定表达。  腺相关病毒载体(AAV)体内的感染效率极高。不同血清型可以相对特异性的感染心脏,肝脏,骨骼肌等。  腺相关病毒是RG1

关于表达载体的基本信息介绍

  生物学中,基因工程的基本操作,表达载体(Expression vectors)就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),使目的基因能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体。其基本骨架为来自pBR322和pUC的质粒复制起点

关于催化剂载体的基本介绍

  催化剂载体又称担体(support),是负载型催化剂的组成之一,是催化剂活性组分的骨架,支撑活性组分,使活性组分得到分散,同时还可以增加催化剂的强度。但载体本身一般并不具有催化活性。  多数载体是催化剂工业中的产品,常用的有氧化铝载体、硅胶载体、活性炭载体及某些天然产物如浮石、 硅藻土等。常用“

关于载体疫苗的基本信息介绍

  载体疫苗将抗原基因通过无害的微生物这种载体进入体内诱导免疫应答。它的特点是组合了减毒活疫苗强有力的免疫原性和亚单位疫苗的准确度两个优势。这种活载体疫苗的一个显著好处是可以有效在体内诱导细胞免疫,这在目前诱导细胞免疫方法还不够好、细胞免疫在一些疾病又特别重要的背景下显得很有前景。在试验中使用的重要

关于载体蛋白的基本信息介绍

  载体蛋白又称做载体(carrier)、通透酶(permease)或转运器(transporter)。能够与特异性溶质结合,通过自身构象的变化,将与它结合的溶质转移到膜的另一侧  载体蛋白,是多回旋折叠的跨膜蛋白质,它与被传递的分子特异结合使其越过质膜。其机制是载体蛋白分子的构象可逆地变化,与被转

关于酰基载体蛋白的基本介绍

  酰基载体蛋白(acyl carrier protein,一般缩写为ACP)是一类具有保守丝氨酸残基的小分子量(9 KDa)酸性蛋白,在脂肪酸合成过程中,ACP携带酰基链完成缩合、还原和脱氢等酶促反应。它是不同酰基链长度脂肪酸的acyl-ACP去饱和反应和质体类酰基转移酶作用的辅助因子。

关于黏性质粒载体的基本介绍

  由于真核基因的结构与功能研究的需要,人们发展出比λ噬菌体载体具有更大克隆能力的新型的载体——柯斯质粒载体(cosmid vectors,cosmid是COS site—carrying plasmid的缩写),也称为黏陛质粒或黏粒。是基因工程中一个重要的基因表达载体。

关于慢病毒载体的包膜蛋白介绍

  采用表达水疱性口炎病毒(VSV)糖蛋白G的质粒和双嗜性小鼠白血病病毒(MLV)包膜蛋白Env的质粒,分别取代表达HIV本身包膜蛋白Env的质粒,使HIV-1载体颗粒包上了VSV或双嗜性MLV的 包膜。这样做的结果至少具有三个方面的积极意义:  ①包膜的更换进一步降低了慢病毒载体恢复成野生型病毒的

简述腺相关病毒载体的基本特点

  一、优点  在辅助腺病毒存在下,AAV可以高效定点整合至人染色体中;而现在的AAV载体已经不需要腺病毒辅助,不插入宿主的基因组,而是游离于宿主细胞基因之外,呈卫星状稳定表达。  腺相关病毒载体(AAV)体内的感染效率极高。不同血清型可以相对特异性的感染心脏,肝脏,骨骼肌等。  腺相关病毒是RG1