关于慢病毒载体的基本信息介绍
慢病毒载体可以将外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达目的序列的效果。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,从而达到良好的的基因治疗效果。对于一些较难转染的细胞, 如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等,使用慢病毒载体,能大大提高目的基因或目的shRNA的转导效率,且目的基因或目的shRNA整合到宿主细胞基因组的几率大大增加,能够比较方便快捷地实现目的基因或目的shRNA的长期、稳定表达。 所以,在体外实验及体内实验的研究中,慢病毒 [1] 己经成为表达外源基因或外源shRNA的常用载体形式之一, 并且正在获得越来越广泛的应用。......阅读全文
关于慢病毒脑炎的鉴别诊断介绍
CJD的精神和智力下降需与Alzheimer病、进行性核上性麻痹、遗传性进行性舞蹈病相鉴别,前者病情进展迅速,有其他局灶性损害表现,而后几种疾病多进展缓慢,脑电图检查无典型的周期性三相波。 锥体外系损害需与橄榄脑桥小脑萎缩、肝豆状核变性、帕金森病鉴别。这些病无肌阵挛,脑电图检查中无典型周期性三
关于慢病毒脑炎的对症护理介绍
1、痴呆的护理 痴呆患者容易发生跌倒、伤害自己或他人等意外事件,要积极采取各种安全防护措施。卧床病人床边随时留人,加放床档。防止坠床,必要时适当使用约束带。如病人能起床活动,外出时身边要有人陪伴,以防跌倒、碰伤或走失。应主动与患者进行语言交流,提问一些简单的问题,促发患者的思维能力,强化记忆和
关于慢病毒脑炎的基础护理介绍
1、观察病情变化 该病的发展呈进行性,应注意观察病人的生命体征及病情进展,如精神、行为异常、认知能力、肌阵挛及抽搐发作等情况。 2、营养支持与留置胃管护理 因患者消耗大,可联系营养科配制营养餐,以保证营养的摄入,宜应用高热量、高维生素、高蛋白质的流质,少量多餐。不能由口进食的患者及时给予留
关于老慢支的基本信息介绍
支气管炎是指气管、支气管黏膜及其周围组织的慢性非特异性炎症。支气管炎主要原因为病毒和细菌的反复感染形成了支气管的慢性非特异性炎症。当气温下降、呼吸道小血管痉挛缺血、防御功能下降等利于致病;烟雾粉尘、污染大气等慢性刺激也可发病;吸烟使支气管痉挛、黏膜变异、纤毛运动降低、黏液分泌增多有利感染;过敏因
关于载体疫苗的基本信息介绍
载体疫苗将抗原基因通过无害的微生物这种载体进入体内诱导免疫应答。它的特点是组合了减毒活疫苗强有力的免疫原性和亚单位疫苗的准确度两个优势。这种活载体疫苗的一个显著好处是可以有效在体内诱导细胞免疫,这在目前诱导细胞免疫方法还不够好、细胞免疫在一些疾病又特别重要的背景下显得很有前景。在试验中使用的重要
关于表达载体的基本信息介绍
生物学中,基因工程的基本操作,表达载体(Expression vectors)就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),使目的基因能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体。其基本骨架为来自pBR322和pUC的质粒复制起点
关于载体蛋白的基本信息介绍
载体蛋白又称做载体(carrier)、通透酶(permease)或转运器(transporter)。能够与特异性溶质结合,通过自身构象的变化,将与它结合的溶质转移到膜的另一侧 载体蛋白,是多回旋折叠的跨膜蛋白质,它与被传递的分子特异结合使其越过质膜。其机制是载体蛋白分子的构象可逆地变化,与被转
关于慢病毒脑炎的预防与防护介绍
目前尽管不认为CJD是接触传染或传染病,但该病毕竟是可以传播的。并且朊病毒可以抵抗常规灭活措施,消毒朊病毒的最优条件尚有争议。因此为了预防医源性传播,应从以下几个方面进行预防: 患者的防护 应选择相对独立的房间,以方便其治疗护理。定时开窗通风,保持空气流通。患者分泌物、排泄物、患者使用的衣服
关于反转录病毒载体的应用介绍
反转录病毒载体是常用的病毒载体之一。反转录病毒的DNA基因组的两端各有一个长末端重复序列(5'—LTR和3'—LTR),有一个包装病毒颗粒时必需的非编码序列ψ+,同时有三个编码蛋白质的基因gag、pol和env。 反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右,以很高的
关于腺相关病毒载体的基本介绍
腺病毒相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是一类单链线状DNA缺陷型病毒。其基因组DNA小于5 kb,无包膜,外形为裸露的20面体颗粒。AAV不能独立复制,只有在辅助病毒(如腺病毒、单纯疱疹病毒、痘苗病毒)存在时,才能进行复制和溶细胞性感染,否则只能建立溶源性潜伏感染
关于杆状病毒表达载体的介绍
BEV,即“杆状病毒表达载体”。是“Baculovirus Expression Vector”的缩写,译为“杆状病毒表达载体”,有真核表达载体、原核表达载体、酵母表达载体、植物表达载体、昆虫表达载体等多重区分。目前应用较多的是昆虫杆状病毒表达系统,利用病毒携带目的基因在昆虫细胞中表达。这类系统
关于反转录病毒载体的应用介绍
反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右,以很高的转染率感染宿主细胞,特别是分裂中的细胞。转入宿主的细胞后,反转录病毒载体随即整合到宿主细胞基因组内,这种整合的位点是随机的。反转录病毒载体在构建时,删去了poi、env基因和gag基因的3’端,但保留了病毒颗粒所需的ψ+序列。其目的
关于慢病毒的基本概述
慢病毒属是反转录病毒科下的一个属,包括8种能够感染人和脊椎动物的病毒,原发感染的细胞以淋巴细胞和巨噬细胞为主,感染个体最终发病。慢病毒感染的显著特点是感染个体在出现典型的临床症状之前,大多经历长达数年的潜伏期,之后缓慢发病,因此这些病原体被称为慢病毒。例如人类免疫缺陷病毒(HIV)、猴免疫缺陷病
关于慢病毒脑炎的简介
慢病毒脑炎是一类具传染性的侵袭中枢神经系统(CNS)的变性疾病。自1995年英国发现疯牛病(mad cow disease,MCD)以来,迄今已在许多国家流行,由于该类疾病具有传染性,具有相似的神经病理学改变,也称为可传播性海绵状脑病(transmisslble spongiform encep
使用串联切向流过滤高效浓缩慢病毒载体
简介VSV-G-假型自我灭活慢病毒载体是不可或缺的生物实验工具之一,与之前的γ-逆转录病毒载体不同的是,慢病毒载体可转导非分裂细胞,并可携带更多的转基因盒,在细胞中的转基因表达时间也更长,即可获得更高的滴度,而其遗传毒性相对较低。一般情况下产毒细胞上清液中的载体滴度足以转导常规细胞系,但原代细胞较难
关于基因克隆载体的基本信息介绍
把能够承载外源基因,并将其带入受体细胞得以稳定遗传的DNA分子称为基因克隆载体。 在转基因研究中,单独一个包含启动子、编码区和终止子的基因,或者组成基因的某个原件,一般是不容易进入受体细胞的,即使采用理化方法进入细胞后,也不容易在受体细胞内稳定维持。目的基因能否有效转入受体细胞,并在其中维持和
关于T载体克隆的基本信息介绍
重组的DNA分子是在DNA连接酶的作用下,有Mg2 、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接。 DNA连接酶有两种:T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶。两种DNA连接酶都有将两个带有相同粘性末端的DNA分子连在一起的功能,而且T4噬菌体DNA连接酶
关于活载体疫苗的基本信息介绍
(live vector vaccine) 是用基因工程技术将保护性抗原基因(目的基因)转移到载体中使之表达的活疫苗。有多种理想的病毒载体,如痘病毒、腺病毒和疱疹病毒等都可以用于活载体疫苗的制备。痘病毒的TK基因可插入大量的外源基因,大约能容纳25Kb,而多 数的基因都在2Kb左右,因此可在T
关于慢病毒脑炎的病因及发病机制介绍
人类朊蛋白病病因有两个方面:为外源性朊蛋白感染和内源性朊蛋白基因突变。 外源性朊蛋白感染 可通过角膜、硬脑膜移植,经肠道外给予人生长激素制剂和埋藏未充分消毒的脑电极等侵入人体,而新近的研究结果提示消化道也可能是朊蛋白的感染途径之一。医务工作者的身体破损处、结膜和皮肤可以接触患者的CSF、血液
关于腺相关病毒载体的优缺点介绍
1、优点 在辅助腺病毒存在下,AAV可以高效定点整合至人染色体中;而现在的AAV载体已经不需要腺病毒辅助,不插入宿主的基因组,而是游离于宿主细胞基因之外,呈卫星状稳定表达。 腺相关病毒载体(AAV)体内的感染效率极高。不同血清型可以相对特异性的感染心脏,肝脏,骨骼肌等。 腺相关病毒是RG1
慢病毒和其他病毒的特征比较介绍
常用的病毒载体有腺病毒、逆转录病毒和慢病毒。逆转录病毒载体只能感染分裂期细胞,而且容量有限,腺病毒一般不能整合到染色体上,只能进行瞬时感染。与其它逆转录病毒相比,慢病毒(LV)具有可以感染非分裂期细胞、容纳外源性基因片段大,可以长期表达等显著优点。慢病毒不产生任何有效的细胞免疫应答,可作为一种体
关于神经系统慢病毒疾病的基本介绍
神经系统慢病毒疾病,亦称“慢病毒脑炎”。由病毒引起的慢性脑病。临床特点有:(1)潜伏期可达数月至数年之久。(2)发病多呈亚急性或慢性,病程长,进行性加重,预后不良。(3)病人常有免疫缺陷。(4)病变主要在中枢神经系统。已知的有:(1)亚急性硬化性全脑炎。主要发生在儿童和青年,起病隐渐。临床可分行
关于神经系统慢病毒疾病的基本介绍
神经系统慢病毒疾病,亦称“慢病毒脑炎”。由病毒引起的慢性脑病。临床特点有: (1)潜伏期可达数月至数年之久。 (2)发病多呈亚急性或慢性,病程长,进行性加重,预后不良。 (3)病人常有免疫缺陷。 (4)病变主要在中枢神经系统。 已知的有: (1)亚急性硬化性全脑炎。主要发生在儿童和青
关于病毒的基本信息介绍
病毒是病原微生物中最小的一种,在细胞内繁殖,其核心是核糖核酸(RNA)或脱氧核糖核酸(DNA),外壳是蛋白质,不具有细胞结构。 病毒寄生于宿主细胞内,依赖宿主细胞代谢系统进行增殖复制。 病毒复制过程如下: ①病毒识别并吸附到宿主细胞的表面; ②通过宿主细胞膜穿入易感细胞; ③脱壳;
腺病毒载体的分类介绍
第一代腺病毒载体:一般将E1或E3基因缺失的腺病毒载体称为第一代腺病毒载体,此类型载体在未经过纯化时可引发机体产生较强的炎症反应和免疫反应,纯化后可以安全使用,体内表达周期可达4周。 第二代腺病毒载体:E2A或E4基因缺失的腺病毒载体被称为第二代腺病毒载体,产生的免疫反应较弱其载体容量和安全性
应用慢病毒载体检测CRISPRCAS9和TALEN脱靶
近日,国际生物学期刊nature biotechnology在线刊登了美国科学家的一项最新研究成果,他们应用整合酶缺陷的慢病毒载体(IDLV)检测CRISPR-CAS9和TALEN对基因组造成的脱靶效应,最低可检测1%的脱靶频率。这项研究或对推广CRISPR-CAS9和TALEN技术,保证基因操
关于杆状病毒载体的简介
当前应用最广的杆状病毒表达体系是Autographa california multiply enveloped nuclear polyhedrosisvirus (AcMNPV) 的裂解病毒,简称为杆状病毒(baculovirus)。这类载体的特点是:杆状病毒表达体系全部使用存在于高等真核细
关于逆转录病毒载体的优点介绍
(1)逆转录病毒结构基因gag、env和pol的缺失不影响其他部分的活性; (2)包装好的假病毒颗粒易于分离制备; (3)逆转录病毒携带的遗传物质高效地进入靶细胞; (4)前病毒通过LTR高效整合至靶细胞基因组中,有利于外源基因在靶细胞中的永久表达。
关于B病毒的基本信息介绍
Sabin等(1934)首次从被外观正常的恒河猴咬伤手指的B医生的脑和脾脏内分离出一种病毒。Sabin等称之为B病毒,又叫猴疱疹病毒(Herpesvirus simiae,HS)。B病毒同人的单纯疱疹病毒相近,它可使恒河猴引起呈良性经过的疱疹样口炎,于7~14天内自愈,可使人类产生致死性的脑炎或
关于类病毒的基本信息介绍
20世纪70年代初期,美国学者T.O.Diener团队在研究马铃薯纺锤块茎病病原时,观察到病原无病毒颗粒和抗原性,具有对酚等有机溶剂不敏感,耐热(70-75℃),对高速离心稳定(说明其分子质量小),对RNA酶敏感等特点。所有这些特点表明病原并不是病毒,而是一种游离的小分子RNA,从而提出了一个新