关于杆状病毒载体的简介

当前应用最广的杆状病毒表达体系是Autographa california multiply enveloped nuclear polyhedrosisvirus (AcMNPV) 的裂解病毒,简称为杆状病毒(baculovirus)。这类载体的特点是:杆状病毒表达体系全部使用存在于高等真核细胞内的蛋白质修饰、加工和转运体系,属于真核表达体系;AcMNPV 是非辅助病毒,不需任何辅助因素即可适宜悬浮生长的昆虫细胞内大量增殖,因此便于大量地表达重组蛋白质;该表达体系使表达产物呈溶解态;杆状病毒的基因很大(130kb),适合克隆大片段外源基因。 [1] 杆状病毒不感染脊椎动物病毒启动子在哺乳动物细胞中无活性。这样,当用于毒性蛋白质或癌基因表达时,该体系比他体系显得优越和可靠。......阅读全文

关于杆状病毒载体的简介

  当前应用最广的杆状病毒表达体系是Autographa california multiply enveloped nuclear polyhedrosisvirus (AcMNPV) 的裂解病毒,简称为杆状病毒(baculovirus)。这类载体的特点是:杆状病毒表达体系全部使用存在于高等真核细

关于杆状病毒表达载体的介绍

  BEV,即“杆状病毒表达载体”。是“Baculovirus Expression Vector”的缩写,译为“杆状病毒表达载体”,有真核表达载体、原核表达载体、酵母表达载体、植物表达载体、昆虫表达载体等多重区分。目前应用较多的是昆虫杆状病毒表达系统,利用病毒携带目的基因在昆虫细胞中表达。这类系统

杆状病毒转染载体的分类

用于表达融合型蛋白的转染质粒是一类早期构建的转染质粒,它包括pAC系列[4],如pAC101、pAC311、pAC360等。在每个载体中,多角体蛋白基因启动子下游ATG启始密码后含有一个单一的BamHⅠ酶切位点,当外源基因和多角体基因的读码框架正确时,就可以获得含1个或几个多角体蛋白N端氨基酸的融合

关于杆状病毒表达系统的简介

  杆状病毒是近年来被广泛用于高效表达外源蛋白的载体系统,本文就杆状病毒表达系统的生物学特性、转染载体、重组病毒的筛选、基因表达调控及其发展应用等方面作一概述。  体外基因表达系统包括原核细胞系统和真核细胞系统。原核细胞系统主要是大肠杆菌细胞系统,它操作简便,周期短,收益大,表达产物稳定,但是表达基

关于质粒载体的简介

  质粒是小型环状DNA分子,大小为1~200kb(1kb=1000碱基对)。质粒不同于病毒,是裸露的DNA分子,没有外壳蛋白,在基因组中,也没有溶菌酶基因。质粒在宿主细胞内才能完成自身复制,同时将编码的一些非染色体控制的遗传性状进行表达,赋予宿主细胞一些额外的特性,包括抗性特性、代谢特性等,其中对

关于质粒载体的特点简介

  质粒(plasmid)是细菌或细胞染色质以外的,能自主复制的,与细菌或细胞共生的遗传成分。其特点如下:  是染色质外的双链共价闭合环形DNA  (covalently closed circular DNA,cccDNA),可自然形成超螺旋结构,不同质粒大小在2-300kb之间,15kb的大质粒

概述杆状病毒表达系统的载体和发展

  杆状病毒基因组十分庞大,不能直接对其进行操作插入外源基因,因此需要通过中间转染载体而获得重组杆状病毒。经过十多年来研究者们的不断探索,已构建出用于表达不同基因产物的各种转移载体。这些转移载体的共同特征是[3]:  ①在一个基础质粒(如pUC系列)中插入一个多角体蛋白基因启动子(或p10基因启动子

关于黏性质粒载体的简介

  由于真核基因的结构与功能研究的需要,人们发展出比λ噬菌体载体具有更大克隆能力的新型的载体——柯斯质粒载体(cosmid vectors,cosmid是COS site—carrying plasmid的缩写),也称为黏陛质粒或黏粒。这是一类人工构建的含有抗性基因、单一克隆位点以及λDNACOS位

关于泛素载体蛋白质的简介

  泛素载体蛋白是指一种在泛素参与的短半寿期蛋白质降解过程中,介导泛素与被降解蛋白质连接的蛋白质。蛋白质在胃液消化酶的作用下,初步水解,在小肠中完成整个消化吸收过程。氨基酸的吸收通过小肠黏膜细胞,是由主动运转系统进行,分别转运中性、酸性和碱性氨基酸。  除了遗传密码所编码的20种基本氨基酸,在蛋白质

关于活载体病毒蛋白疫苗的简介

  将编码病毒蛋白的基因插入其他活病毒或细胞基因组中并用之感染动物或人体,使外源基因在宿主细胞表达,可产生对基因产物及载体的免疫应答。活病毒载体包括痘苗病毒、杆状病毒和腺病毒等。研究较多的是痘病毒疫苗。痘病毒疫苗在感染宿主细胞胞浆中复制,无致癌性,此类疫苗可诱导机体产生细胞免疫和体液免疫且疫苗易于生

关于双载体13价肺炎疫苗的简介

  2021年,全球首款双载体13价肺炎疫苗上市,是由深圳康泰生物制品股份有限公司全资子公司北京民海生物自主研发的维民菲宝13价肺炎疫苗,采用两种载体蛋白(破伤风类毒素/白喉类毒素)与肺炎球菌荚膜多糖结合,为全球首创的双载体13价肺炎球菌多糖结合疫苗。这也是国内第二款、全球第三款获批的13价肺炎疫苗

关于插入型λ类噬菌体载体的简介

  外源的DNA克隆到插入型的λ载体分子上,会使噬菌体的某种生物功能丧失效力,即所谓的插入失活效应。插入型的λ载体又可以分为免疫功能失活的(inactivatiortofimmunityfunction)和大肠杆菌β-半乳糖苷酶失活的(inactlvatlonofE.coliβ-galactosid

关于替换型λ类噬菌体载体的简介

  替换型载体又叫做取代型载体(substitutionvector),是一类在λ噬菌体基础上改建的、在其中央部分有一个可以被外源插入的DNA分子所取代的DNA片段的克隆载体。  λNM781便是其中的一个代表。在这个替换型载体中,可取代的EcoRI片段,编码有一个supE基因(大肠杆菌突变体tRN

杆状病毒表达系统用于表达多个非融合蛋白的转染载体

  这种载体的主要特征是含有2个或2个以上相同的启动子,可表达2条或2条以上多肽链的蛋白。   如Emery和Bishop[8]等构建的pAcVC2转染质粒,含有两个方向相反的多角体基因启动子。重组病毒可同时表达多角体蛋白和淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒(LCMV) N蛋白。Takehara[9]等构

腺相关病毒载体的简介

  腺病毒相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是一类单链线状DNA缺陷型病毒。其基因组DNA小于5 kb,无包膜,外形为裸露的20面体颗粒。AAV不能独立复制,只有在辅助病毒(如腺病毒、单纯疱疹病毒、痘苗病毒)存在时,才能进行复制和溶细胞性感染,否则只能建立溶源性潜伏感染

腺相关病毒载体的应用简介

  经过十几年的研究,重组腺相关病毒的生物学特性已被深入了解,尤其是其在各种细胞、组织和体内实验中的应用效果方面已经积累了许多资料。在医学研究中,rAAV被用于多种疾病的基因治疗的研究(包括体内、体外实验);同时作为一种有特点的基因转移载体,还广泛用于基因功能研究、构建疾病模型、制备基因敲除鼠等方面

简介固定化细胞技术的载体

  ①载体应是亲水的,疏水载体与有机溶剂相同的变性影响。  ②载体也是要求有一定的机械强度和稳定性。  ③常用的载体包括:1、天然高分子(纤维素、琼脂糖、淀粉、葡萄糖凝胶、胶原及其衍生物等)2、合成高聚物(尼龙。多聚氨基酸等)3、无机支持物(多孔玻璃、金属氧化物等)

杆状病毒介绍

状病毒是一类在自然界中专一性感染节肢动物的DNA病毒,病毒粒子呈杆状,基因组为双链环状DNA分子,DNA以超螺旋形式压缩包装在杆状衣壳内,大小在90~180 Kb之间。目前杆状病毒作为高效、安全的无公害生物虫剂广泛应用于害虫防治。 杆状病毒只来源于无脊椎动物,虽然已发现600多种杆状病毒,但进行

关于病毒载体的基本介绍

  病毒载体可将遗传物质带入细胞,原理是利用病毒具有传送其基因组进入其他细胞,进行感染的分子机制。可发生于完整活体(in vivo)或是细胞培养(in vitro)中。可应用于基础研究、基因疗法或疫苗。

关于载体蛋白的特点介绍

  载体蛋白运输物质的动力学曲线具有“膜结合酶”的特征,运输速度在一定浓度时达到饱和。但载体蛋白不是酶,它与被运载分子不是共价结合,此外它不仅加快运输速度,也增大物质透过质膜的量。载体蛋白与运载分子有特异的结合位点,能被竞争性抑制物占据,非竞争性抑制物亦可与载体蛋白在结合位点之外结合,改变其构象,阻

关于表达载体的组成介绍

  常用细菌质粒进行构建,构建过程中运用限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端(多为黏性末端,也有平末端),采用DNA连接酶连接,导入生物体实现表达。标记基因可帮助识别质粒并检测是否成功整合到染色体DNA中。  表达载体(Expression vectors)就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表

关于质粒载体的基本介绍

  质粒是小型环状DNA分子,在基因工程中作为最常用,最简单的载体,必须包括三部分:遗传标记基因,复制区,目的基因。 质粒在所有的细菌类群中都可发现,它们是独立于细菌染色体外自我复制的DNA分子。自然界中,质粒是在营养充足时出现的,它在结构、大小、复制方式,每个细菌的拷贝数,在不同的细菌体内的繁殖力

关于载体蛋白的相关介绍

  载体蛋白又称做载体(carrier)、通透酶(permease)或转运器(transporter)。能够与特异性溶质结合,通过自身构象的变化,将与它结合的溶质转移到膜的另一侧  载体蛋白,是多回旋折叠的跨膜蛋白质,它与被传递的分子特异结合使其越过质膜。其机制是载体蛋白分子的构象可逆地变化,与被转

关于慢病毒载体的介绍

  慢病毒载体(Lentiviral vector)较逆转录病毒载体有更广的宿主范围,慢病毒能够有效感染非周期性和有丝分裂后的细胞。慢病毒载体能够产生表达shRNA的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性细胞、干细胞、受精卵以及分化的后代细胞中表达shRNA,实现在多种类型的细胞和转基因小鼠中特异而稳定

关于质粒载体的分类介绍

  按复制形式  分为严紧型和松弛型复制。  根据质粒DNA复制与宿主之间的关系或在宿主细胞的拷贝数的多少,可以将质粒分为两种不同的复制类型:严紧型和松弛型。严紧型质粒复制受宿主染色体DNA复制的严格控制,拷贝数较小一般只有1~3个拷贝。疏松型质粒的复制宿主的控制比较松,在宿主中的拷贝数比较多,一般

关于载体蛋白的特点的介绍

  载体蛋白运输物质的动力学曲线具有“膜结合酶”的特征,运输速度在一定浓度时达到饱和。但载体蛋白不是酶,它与被运载分子不是共价结合,此外它不仅加快运输速度,也增大物质透过质膜的量。载体蛋白与运载分子有特异的结合位点,能被竞争性抑制物占据,非竞争性抑制物亦可与载体蛋白在结合位点之外结合,改变其构象,阻

固定化酶技术的传统载体的简介

  1、吸附法  吸附法是最简单的同定化方法.包括物理吸附和离子交换吸附。物理吸附法常用的吸附剂有活性炭、硅藻土、多空玻璃等。离子吸附法是酶与载体通过范德华力、离子键和氢键等作用力固定。  2、包埋法  包埋法的基本原理是载体与酶溶液混合后,借助引发剂进行聚合反应,通过物理作用将酶限定在载体的网格中

关于慢病毒载体的概念介绍

  慢病毒载体是指以人类免疫缺陷病毒-1 (H IV-1) 来源的一种病毒载体,慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息,是慢病毒载体系统的主要组成部分。携带有外源基因的慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下,经过病毒包装成为有感染力的病毒颗粒,通过感染细胞或活体组织,实现外源基因在

关于酵母质粒载体的基本介绍

  酵母质粒载体是基因表达载体的一种,既可以在大肠杆菌中、又可以在酵母系统中进行复制与扩增,所以也称为穿梭载体。它分为整合载体和自我复制载体两类。  ①整合载体:它带有一个酵母URA3标志基因和大肠杆菌的复制和报告基因。  ②自我复制载体:该类载体在酵母中可以自我复制。

关于基因载体的分类相关介绍

  基因载体,即gene delivery或gene vector,是作为基因导入细胞的工具。犹如火箭能把卫星射向九天一样,基因载体可以把目的基因送入靶细胞内,然后将目的基因释放出来,有的目的基因还可以整合到细胞核中,从而发挥目的基因的特定功能。  1. 基因载体是把基因导入细胞的工具,它的作用是①