层析拆装柱的目的
层析拆装柱的目的是进行层析分离、精细筛选,以获得所需的细胞和细胞产物。它的操作原理是:使用柱体将样品分割成几层,分别在每一层中加入不同的溶剂,然后由上而下依次流动,最后将各层中的细胞和物质完整地分离出来。......阅读全文
层析拆装柱的目的
层析拆装柱的目的是进行层析分离、精细筛选,以获得所需的细胞和细胞产物。它的操作原理是:使用柱体将样品分割成几层,分别在每一层中加入不同的溶剂,然后由上而下依次流动,最后将各层中的细胞和物质完整地分离出来。
层析柱装填及柱效测定及凝胶过滤层析3
当A量程开关选定在0-1.0A档时,此时数显板上显示和读数即为光吸收A的实际读数,如显示为080即表示为0.80A。当A量程开关切换在其它量程位置时,则数显光吸收A读数为:A量程选定在0-2.0档时,数显读数×2=实际光吸收读数AA量程选定在0-1.0档肘,数显读数×1=实际光吸收读数A(二)部分收
层析柱装填及柱效测定及凝胶过滤层析4
(三)凝胶的选择 根据所需凝胶体积,估计所需干胶的量。 一般葡聚糖凝胶吸水后的凝胶体积约为其吸水量的 2 倍,例如 Sephadex G-200 的吸水量为 20 , 1 克 Sephadex G─200 吸水后形成的凝胶体积约 40mL 。凝胶的粒度也可影响层析分离效果。粒度细分
层析柱装填及柱效测定及凝胶过滤层析2
准备好恒流泵、分部收集器、核酸蛋白检测仪及记录仪打开柱上端的螺丝帽塞子,吸出层析柱中多余液体直至与胶面相切沿管壁将5%丙酮溶液0.6 mL小心加到凝胶床面上,应避免将床面凝胶冲起 (参考完成时间11:30)打开下口夹子,使样品溶液流入柱内,同时收集流出液,当样品溶液流至与胶面相切时,夹紧下口夹子按加
层析柱装填及柱效测定及凝胶过滤层析1
一、实验目的和内容目的:1. 掌握凝胶过滤层析的原理,掌握凝胶柱柱效测定方法;2. 熟悉凝胶层析的一般过程;3. 了解凝胶介质的选择原则和应用领域。内容:1. Sephadex G-50凝胶柱的装填;2. 凝胶柱柱效测定;3.凝胶再生的方法。二、实验仪器和试剂1. 实验仪器层析柱(1×40 cm),
层析柱的简介
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。
层析柱的介绍
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。
层析柱的介绍
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。
层析柱的规格
层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外, 直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形
层析柱高径比对层析柱分离效果有什么影响
层析柱高径比是指层析柱的高度与内径之比。层析柱高径比对层析柱分离效果有着重要的影响,一般来说,高径比越大,分离效果越好。高径比的提高可以带来以下几个方面的优势:提高分离效率:高径比的提高可以增加层析柱的理论板数,提高分离效率。提高分离精度:高径比的提高可以减少色谱柱床颗粒的翻滚、流动等运动,从而减小
凝胶层析柱,离子交换柱,色谱吸附柱
凝胶柱层层析又称凝胶过滤,是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中,然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中,只留在凝胶颗粒之间的流动相中,因此以较快的速度首先流出层析柱,而小分子则能自由出入凝胶颗粒中,并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡,因
层析柱与液相柱的区别
1、压力 液相色谱柱(尤其是分析性高效液相色谱):压力较高,一般为10-20Mpa 层析柱:一般为常压,或使用真空泵(0.1Mpa左右) 2、填料 液相色谱柱:粒径较小(常规5-20um) 层析柱:粒径较大 3、分离度 由第二项决定,粒径越小,单位长度下理论塔板数越高 液相色谱柱
凝胶层析技术中的主体——层析柱
凝胶是一类多孔性高分子聚合物,每个颗粒犹如一个筛子。当样品溶液通过凝胶柱时,相对分子质量较大的物质由于直径大于凝胶网孔而只能沿着凝胶颗粒间的空隙,随着溶剂流动,因此流程较短,向前移动速度快而首先流出层析柱;反之,相对分子质量较小的物质由于直径小于凝胶网孔,可自由地进出凝胶颗粒的网孔,在向下移动过
层析柱如何来选择
层析柱的质量关键要考虑以下几点:两端的4F塞是否密封质量好,中间的玻璃管的透明度以及耐压度,是否有相应的转换接头来控制进料高度,
层析柱如何来选择
层析柱的质量关键要考虑以下几点:两端的4F塞是否密封质量好,中间的玻璃管的透明度以及耐压度,是否有相应的转换接头来控制进料高度,我们研究所用的是同兴玻璃的。
柱层析的装柱方法
装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂
SAC手动螺旋压缩层析柱-柱效测试
介质: Q-HP,体积为2L, 缓冲液1为0.4M/L NaCl, 缓冲液2为0.8M/L NaCl柱子:SAC200*500(利穗) 设备为 AKTA Polit(GE)
树脂柱和层析柱一样吗
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。凝胶过滤层析是利用一定大小孔隙的具有网状结构的凝胶作层析介质(如葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)而树腊吸附柱;通俗的说,就是一种装载(阳、阴)离子交换树脂的设备,简称离子交换(柱)器,目的是离子交换树脂“吸附”水中阳离子或阴离子等盐类
高温电炉的拆装实验
高温电炉的拆装实验据用途不同,实验室用的电阻炉分为:竖式管状电阻炉(井式炉),卧式管状 电阻炉,箱式电阻炉,坩埚炉等等,虽然其用途,样式不同,但是其结构大 致相同 一,实验目的 1,通过实验掌握电阻炉的结构; 2,通过实验掌握不同温度,不同用途的电 阻炉加热体的选择: 3,通过实验掌
高温电炉的拆装实验
一,实验目的 1,通过实验掌握电阻炉的结构; 2,通过实验掌握不同温度,不同用途的电 阻炉加热体的选择: 3,通过实验掌握不同温度下耐火材料的选 择.二,电阻炉结构 电阻炉结构 根据用途不同,实验室用的电阻炉分为:竖式管状电阻炉(井式炉),卧式管状 电阻炉,箱式电阻炉,
高温电炉的拆装实验!
一,实验目的 1,通过实验掌握电阻炉的结构; 2,通过实验掌握不同温度,不同用途的电 阻炉加热体的选择: 3,通过实验掌握不同温度下耐火材料的选 择.二,电阻炉结构 电阻炉结构 根据用途不同,实验室用的电阻炉分为:竖式管状电阻炉(井式炉),卧式管状 电阻炉,箱式电阻炉,
简述自吸泵的维护拆装
该泵的特点是结构简单可靠,经久耐用。在泵正常情况下,一般不需要经常拆开保养。当发现故障后随时给予排除既可。 1、维护该泵时应注意几个主要部位: A、滚动轴承:当长期运行后,轴承磨损到一定程度时,须进行更换。 B、前密封环、后密封环:当密封环磨损到一定程度时,须进行更换。 C、机械密封:机
层析柱的操作方法
以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例: 1.吸附剂的处理及柱子装填 将一定量薄层层析硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中,于105。C活化2H后,取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充,填满整个柱体,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按丙酮一石油醚(5:95)比例泵入溶剂,至溶剂流出止。 2.上样
TLC柱层析过柱的技巧
过柱的技巧柱层析按过柱时的压力可以分为: 加压, 常压, 减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度, 减少产品收集的时间, 但是会减低柱子的塔板数。 所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的, 但是时间也最长, 例如一些天然化合物的分离,有时一个柱子过几个月也有可能。减压柱能够减少硅胶的使用量,但是由于
层析柱柱体积如何计算
柱体积就是根据层析柱内径和长度求出,你内径有了,长度应该是13cm,这样就好算了。给你一个估计的方法:柱体积=填充物质量(g)×2
层析柱柱体积如何计算
柱体积就是根据层析柱内径和长度求出,你内径有了,长度应该是13cm,这样就好算了。给你一个估计的方法:柱体积=填充物质量(g)×2
动态轴向压缩柱系统相对层析柱的介绍
1、DAC系统配有专用的输液系统和在线检测系统,可以随时观测样品的分离程度与出峰时间,及时把控实验进度。 2、效率高,单针上样量大,分离纯化时间短,按照工艺,日处理量能达到300-400克的范围,随着内径的增大,上样量为柱内径比的平方。 3、选择的溶剂可以使用分析级或者工业级试剂,价格低廉,
离子交换层析实验离子交换层析介质和层析柱的选择
实验步骤1. 离子交换凝胶的选择依据:(1)根据蛋白质的pH只稳定范围。蛋白质在等电点pI以上pH稳定时选择阴离子交换凝胶介质,在pI以下pH的稳定时,则选用阳离子交换凝胶介质。(2)根据特分离蛋白质的分子大小。分子量在10 000~100 000 0 Da 的蛋白,选用如DEAE-Sephace
齿轮泵拆装检查方法
在许多行业都会需要对液体进行传输,而齿轮泵是应用较多的一种。它是一种正排量装置,就好比一个活塞一样,在密闭的壳体内有两个尺寸相同的齿轮紧密配合旋转,整体形状类似与“8”字。它的这种特性常常用于精密流体的传输,所以有时候也被称为精密齿轮泵。作为较常用的一种泵,它的拆卸检查也是有很多需要注意的地方,下面
凝胶过滤色谱柱用于体积排阻层析
体积排阻,也叫凝胶过滤,根据物质尺寸大小的不同分离。如果分子的尺寸大于树脂的最大孔径,这种分子就不能进入树脂颗粒内部,它所经过的有效体积最小,最先从洗脱液中流出。而小分子能够进入树脂的孔道中,经过的有效体积比较大,从洗脱液中流出较晚,分子量越小,流出越晚。 体积排阻层析可以用于纯化的*步,按分子量