人工制备抗体制备方法有哪些
抗体在疾病的诊断和免疫防治中的重要作用,使人们对抗体的需求越来越大。人工制备抗体是大量获得抗体的重要途径。早年人工制备抗体的方法主要是以相应抗原免疫动物,获得抗血清。由于抗原常常含有多种不同的抗原表位,加之所获得的抗血清也未经免疫纯化,因此,获得的抗血清实际上是含多种抗体的混合物,即多克隆抗体(polyclonal antibody)。用于制备抗血清的动物也因抗体需求量的增加而从小鼠、大鼠、兔、羊到马等大动物。为了获得大量的、高特异性、均质的抗体,1975年,Kohler和Milstein建立了体外细胞融合技术,获得了免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞,大规模地制备出高特异性的单克隆抗体(monoclonal antibody,简称单抗)。此后,单抗在理论和实践上的应用,成了解决生物学、医学等诸多重大问题的重要手段。然而其中仍有问题有待解决,例如在体内应用时,作为异源蛋白的单抗会引起人抗小鼠抗体反应(human anti......阅读全文
人工制备抗体制备方法有哪些
抗体在疾病的诊断和免疫防治中的重要作用,使人们对抗体的需求越来越大。人工制备抗体是大量获得抗体的重要途径。早年人工制备抗体的方法主要是以相应抗原免疫动物,获得抗血清。由于抗原常常含有多种不同的抗原表位,加之所获得的抗血清也未经免疫纯化,因此,获得的抗血清实际上是含多种抗体的混合物,即多克隆抗体(po
抗体药物的制备工艺路线有哪些
单克隆抗体是利用体外培养技术生产的抗体,它由于是由一个细胞分裂而来的,所有只含有一种抗体. 单克隆抗体的优点是:理化性状高度均一、生物活性单一、与抗原结合的特异性强、便于人为处理和质量控制,并且来源容易.这些优点使其广泛应用于抗肿瘤等领域 缺点就是生成的抗体只针对1种抗原决定簇,比较单一. 基本过程
制备单克隆抗体靶向制剂主要方法有哪些
单抗靶向制剂用的比较多的就是贝伐单抗,联合化疗药物用,实际意义因人而异。1、被动靶向制剂(脂质体、乳剂、微球、纳米囊和纳米球等)2、主动靶向制剂(修饰脂质体、长循环脂质体、免疫脂质体等)3、物理化学靶向制剂(磁性靶向制剂、栓塞靶向制剂、热敏靶向制剂、PH靶向制剂)
抗体的制备有哪些
(1)多克隆抗体的制备。①免疫方法:对多克隆抗体,免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮内免疫法、淋巴结免疫法和混合法等。一般来说,皮下或肌肉免疫法产生的抗体比较多;皮内免疫法所需的抗原量少,在抗原宝贵时特别适用,但与之相对的,它产生的抗体量也不多。混合免疫法的优点是抗原用量小,产生抗体速度快。②多克隆
病毒样品的制备方法有哪些
从病株直接观察病毒的制片法有以下几种:(1)蘸取法。在清洁的载玻片上滴1滴水,把病叶的新鲜切口,在水滴上沾几下,使受伤细胞的内容物流入水滴,将覆有支持膜的铜网与水滴面接触,入真空中干燥后进行投影检镜。(2)叶汁渗出法。把切取的茎段浸于水中给以水压,在叶片或茎端的切口出现渗出液,将铜网与渗出液表面接触
XRF分析有哪些样品制备方法
a车削、切割、磨铣和抛光金属试样及分布均匀的合金样品等,可用一般的机加工方法制成一定直径的金属圆片样品。如车床车制、飞轮切割等。如表面比较粗糙,通常再进行研磨抛光。但必须指出,抛光条纹会引起所谓的“屏蔽效应”,尤其对长波辐射线与磨痕垂直时,强度降低严重。为此,测量时应采取试样自转方式,消除试样取向影
脂质体的制备方法有哪些?
注入法、薄膜分散法、超声波分散法、逆向蒸发法。
病毒样品的制备方法有哪些
从病株直接观察病毒的制片法有以下几种:(1)蘸取法。在清洁的载玻片上滴1滴水,把病叶的新鲜切口,在水滴上沾几下,使受伤细胞的内容物流入水滴,将覆有支持膜的铜网与水滴面接触,入真空中干燥后进行投影检镜。(2)叶汁渗出法。把切取的茎段浸于水中给以水压,在叶片或茎端的切口出现渗出液,将铜网与渗出液表面接触
薄荷醇有哪些制备方法
工业上从薄荷中提取薄荷油和薄荷脑采用水蒸汽蒸馏法和有机溶剂提取法,前者提取效率低,后者存在有机溶剂残留的毒性。采用超临界二氧化碳从薄荷中提取的薄荷脑(薄荷醇),则可消除上述两种方法所产生的弊端。其得率比水蒸汽蒸馏法约高5倍,比有机溶剂法约高3倍,产品保持纯天然特征,质量好,纯度高,无溶剂残留毒性
目的基因的制备方法有哪些
获取目的基因的方法主要有两种:1、从供体细胞的DNA中直接分离基因,最常用的方法是“鸟枪法”又叫“散弹射击法"。2、人工合成基因:以目的基因转录的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,再在酶的作用下合成双链DNA,即目的基因,另一条途径是蛋白质的氨基酸序列,推测出信使RNA序列,再推测出结构基
制备超级电容器电极材料的制备方法有哪些
超级电容器的类型比较多,按不同方式可以分为多种产品,以下作简单介绍。按原理分为双电层型超级电容器和赝电容型超级电容器:双电层型超级电容器1.活性碳电极材料,采用了高比表面积的活性炭材料经过成型制备电极。2.碳纤维电极材料,采用活性炭纤维成形材料,如布、毡等经过增强,喷涂或熔融金属增强其导电性制备电极
金属表面纳米结构制备方法有哪些
纳米结构的制备方法 纳米粉体、纳米纤维、纳米薄膜、纳米块体、纳米复合材料和纳米结构等纳米材料的制备方法有的相同,有的不相同,有的原理上相同,但工艺上有显著的差异[6]。从目前的研究来看,纳米结构的制备方法大体可分为:自组装法、人工构筑法、模板法。
多克隆抗体的制备方法
一、器材 剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼科手术镊子(游离血管用)一把、直头眼科手术剪(剪血管用)一把,手术刀架,手术刀片,注射器(1ml、 10ml,25ml)附针头,兔子固定架,灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头止血钳四把,直头止血钳两把,手术缝合线,塑料放血管,纱布等
抗体的制备方法与原理
一、抗血清的制备 有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。 (一)用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,如
抗体酶的制备方法
1、杂交瘤技术经体内免疫后再进行细胞融合是制备抗体酶的一种传统方法。杂交瘤技术的基本原理是用不能在培养液中生长的但能产生抗体的脾脏细胞,与能在培养液中生长的骨髓瘤细胞进行融合,融合得到的杂交细胞既能产生抗体又能在体外培养,通过选择培养,以获取能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。再把这些细胞单克隆化,即繁殖
抗体的制备
为了研究抗体的理化性质、分子结构与功能,以及应用抗体于临床疾病的诊断、治疗及预防都需要人工制备抗体。目前,根据制备的原理和方法可分为多克隆抗体、单克隆抗体及基因工程抗体三类。 一、多克隆抗体 大多数抗原是由大分子蛋白质组成,但只是抗原上有限部位的特殊分子结构能与其相应抗体结合,称此部位为抗原
滴丸制备的常用载体有哪些
(1)水溶性:聚乙二醇(PEG) 类,以PEG4000或6000为宜。它们的熔点低(55-60℃),毒性较低,化学性质稳定(在100℃以上才分解)。能与多数药物配伍,具有良好的水溶性,亦能溶于多种有机溶剂,能使难溶性药物以分子状态分散于载体中。在溶剂蒸发过程中,粘度逐渐增大,可阻止药物分子聚集。(2
血涂片的制备步骤有哪些?
(1)采血静脉采血后,使用玻璃棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血。(2)推片左手平执载玻片,或放在类似桌子等平坦地方,右手持推片从前方接近血滴,使血液沿推片边缘展开成适当的宽度,立即将推片与载玻片呈 30~45°角,轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血涂片,血涂片应呈舌状,头、
抗体的制备方法与原理2
骨髓瘤细胞的培养可用一般的培养液,如RPMI1640,DMEM培养基。小牛血清的浓度一般在10%~20%,细胞浓度以104~5×105/ml为宜,最大浓度不得超过106/ml。当细胞处于对数生长的中期时,可按1:3~1:10的比例传代。每3~5天传代一次。细胞在传代过程中,部分细胞可能有返祖现象,
抗体酶的制备方法介绍
1、杂交瘤技术经体内免疫后再进行细胞融合是制备抗体酶的一种传统方法。杂交瘤技术的基本原理是用不能在培养液中生长的但能产生抗体的脾脏细胞,与能在培养液中生长的骨髓瘤细胞进行融合,融合得到的杂交细胞既能产生抗体又能在体外培养,通过选择培养,以获取能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。再把这些细胞单克隆化,即繁殖
抗体酶的制备方法介绍
1、杂交瘤技术经体内免疫后再进行细胞融合是制备抗体酶的一种传统方法。杂交瘤技术的基本原理是用不能在培养液中生长的但能产生抗体的脾脏细胞,与能在培养液中生长的骨髓瘤细胞进行融合,融合得到的杂交细胞既能产生抗体又能在体外培养,通过选择培养,以获取能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。再把这些细胞单克隆化,即繁殖
怎样制备荧光抗体?
(一)抗体要求将荧光素与特异性抗体以化学共价键的方式结合而成。一般需经纯化提取IgG后再作标记。(二)荧光素要求 异硫氰酸荧光素最常用要求:①应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除;②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率;③
嵌合抗体制备
嵌合抗体制备服务编号:BIOFW089服务简介嵌合抗体是利用DNA重组技术,将异源单抗的轻、重链可变区基因插入含有人抗体恒定区的表达载体中,转化哺乳动物细胞表达出嵌合抗体,这样表达的抗体分子中轻重链的V区是异源的,而C区是人源的,这样整个抗体分子的近2/3部分都是人源的。这样产生的抗体,减少了异源性
荧光抗体的制备
1 荧光素与抗体结合(标记) 2 荧光抗体的纯化 3 荧光抗体的鉴定 1.荧光素与抗体结合方法: ⑴ 透析法:①适用于蛋白质含量低、样品体 积小的抗体溶液的标记 ②标记较均匀,非特异荧光较低 ⑵ 搅
单克隆抗体上清制备实验——大量制备
实验材料目的杂交瘤试剂、试剂盒完全 DMEM-10 培养液(含 5~10 mmol/L HEPES pH 7.2~7.4)仪器、耗材250 ml 无菌锥形离心管转瓶培养装置850 cm2 旋转培养瓶175 cm2 组织培养瓶实验步骤1. 重复基本方案 1 步骤 1,并按 1:10 分传到终体积为 1
制备液相色谱仪优点有哪些?
1.开机进行自检。 2.单一波长标准灵敏度、高灵敏度吸收谱。 3.五波长、时间编程标准灵敏度、高灵敏度吸收谱。 4.显示错误提示信息:灯无点燃、灯能量不足、设定参数错误。 5.自动测定D2灯及W灯的开启次数、灯状态、灯点燃时间、灯能量、设定D2灯及W灯状态。 6.针对复杂混合物中各化合
单克隆抗体的制备方法3
(4)融合 ①将骨髓瘤细胞与脾细胞按1:10或1:5的比例混合在一起,在50ml离心管中用无血清不完全培养液洗1次,离心,1200rpm,8min;弃上清,用吸管吸净残留液体,以免影响聚乙二醇(PEG)浓度。轻轻弹击离心管底,使细胞沉淀略松动。 ②90s内加入37℃预温的1ml 45%PEG
单克隆抗体的制备方法4
(5)在第7天换液,以后每2~3天换液1次。 (6)8~9天可见 细胞克隆形成,及时检测抗体活性。 (7)将阳性孔的细胞移至24孔板中扩大培养。 (8)每个克隆应尽快冻存。 2.软琼脂培养法克隆 (1)软琼脂的配制:含有20%NCS(小牛血清)的2倍浓缩的RPMI1640。
单克隆抗体的制备方法2
(2)饲养细胞:在组织培养中,单个或少数分散的细胞不易生长繁殖,若加入其它活细胞,则可促进这些细胞生长繁殖,所加入的这种细胞数被称为饲养细胞。在制备McAb的过程中,许多环节 需要加饲养细胞,如在杂交瘤细胞筛选、克隆化和扩大培养过程中,加入饲养细胞是十分必要的。常用的饲养细胞有:小鼠腹腔巨噬细胞(较
本生详解抗体的制备方法与原理
抗血清的制备 有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好(特异性强和效价高)的抗体。 (一)用于免疫的动物 作免疫用的动物有哺乳类和禽类,主要为羊、马、家兔、猴、猪、豚鼠、鸡等,实验室常用者为家兔、山羊和豚鼠等。动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数量,如般