单晶培养科研实验知识分享
好多同学/老师一直培养不出单晶，或者周期太长了，希望这个分享能得到一些帮助。单晶培养的方法多种多样，如升华法、共结晶法等。最简单的最实用常用的有1.溶剂缓慢挥发法；2.液相扩散法；3.气相扩散法。99％的单晶是用以上三种方法培养出来的。一、单晶培养要点 1、一般以10--25mg 为佳，如果你只有2mg左右样品，也没关系，但这时就要选择液相扩散法和气相扩散法，不能使用溶剂缓慢挥发法。2、单晶培养的样品的预处理样品溶解后一定要过滤，不能用滤纸，而是用 一小团棉花轻轻的塞在滴管的中下部或下部，不要塞太紧，否则流的太慢。样品当然是越纯越好，不过如果实在没办法弄纯也没关系，培养一次就相当于提纯了一次，也可用一些TLC 显示有杂点的东西长单晶，但要多养几次。3、一定要做好记录，一次就得到单晶的可能性比较小。因此最好的方法就是在第一次培养单晶的时候，采取少量多溶剂体系的办法。如果你有 50mg 样品， 建议你以 5mg 为一单位，......阅读全文
专家由知网谈如何走出知识分享困境
学者胜诉中国知网，在学术圈如一石激起千层浪。 从关注案件本身，到探讨作者、期刊、数据库平台三者的责权利关系，本报对此作了连续报道。在信息爆炸、技术手段越来越发达的今天，知识分享却面临“困境”：高水平学术资源付费过高，能免费的资源质量又过低。对此，多名专家建议，由政府主导建设国家知识资源数据
知识分享：维真稳转株构建流程
稳转株即稳定表达细胞株，指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法，具有高效整合、目标细胞广泛等特点。 一．准备及预实验 确定细胞系相关信息，需包括如下内容 目标细胞系培养条件 目标细胞增殖速度 支原体污染情况
知识分享：PLMPuromycin试剂说明书
一、产品概述： 产品名称: PLM-Puromycin 试剂 产品货号：FH880802 规格：100μl（标准规格） 浓度：1ug/ul 推荐使用浓度：1-10 μg/ml 有效期至： 二、产品原理： PLM-Puromycin试剂是一种由
知识分享：维真腺病毒系统产品手册
产品说明书 本产品仅限用于研究，严禁用于疾病诊断。 本产品仅供购买方内部研究使用，未经维真生物公司书面许可，严禁转售。 产品有限责任担保 维真生物公司保证您收到的产品符合产品目录上的规格。本担保规定了维真生物公司更换产品的责任。维真生物公司不提供其他任何形式的对于产品商业或健康用途的保证
知识分享：SDSPAGE的配制及电泳
实验原理 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术首先在1967年由Shapir0建立，其原理：聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N，N’一亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(APS)，N，N，N’，N’四甲基乙二胺(TEMED)作用下，聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶，
知识分享：蛋白质含量的测定方法
实验原理： 蛋白质含量测定法，是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法，即定氮法、双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法，即考马斯亮蓝法（Bradford法）。其中Bra
培养基的制备技巧分享
目的请求 1．控制普通培育基制备的准绳和请求。 2．熟习普通培育基制备的过程。 操作步骤 一、培育基的制备准绳和请求 培育基是依据各类微生物生长繁衍的需求，用人工办法把多种物质混合而成的营养物。普通用来别离、培育菌类。常用的培育基有根底培育基、增菌培育基、
十五种蛋白质单晶培养的方法
15种蛋白质单晶培养的方法：（1）大量养晶法（bulk crystallization）：若急着养出单晶，则将纯化之蛋白质溶液加入固体盐类或饱和盐液，直到溶液中出现乳白混浊色，离心后把上清液（suppernatant）放置数天至数周，有可能养出单晶。（2）批次养晶法（batch method）:
定量PCR实验技术分享
1. 如果扩增曲线ct值比较靠后的话，32左右，一般有什么方法解决？ct值比较靠后，对实验有一定的影响，因为经过那么多次的循环，酶的活性有可能有所下降，这时候扩增效率会有所改变（而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值）。因此最好能够把ct值往前移。解决办法可以将模板加以浓
定量PCR实验技术分享
1. 如果扩增曲线ct值比较靠后的话，32左右，一般有什么方法解决？ ct值比较靠后，对实验有一定的影响，因为经过那么多次的循环，酶的活性有可能有所下降，这时候扩增效率会有所改变（而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值）。因此最好能够把ct值往前移。 解决办法可以将模
ChIP实验技术经验分享
染色质免疫沉淀技术（Chromatin Immunoprecipitation，简称ChIP）是研究活体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体反应的特异性，可以真实地反映体内蛋白因子与基因组DNA结合的状况。随着对基因功能研究的不断深入，这项技术正越来越多的被应用于科研的各个领域
ChIP实验技术经验分享
染色质免疫沉淀技术（Chromatin Immunoprecipitation，简称ChIP）是研究活体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体反应的特异性，可以真实地反映体内蛋白因子与基因组DNA结合的状况。随着对基因功能研究的不断深入，这项技术正越来越多的被应用于科研的各个领域。
知识分享：动物细胞基因组DNA提取
实验原理 真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内，制备DNA将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离，同时保持DNA分子的完整。提取DNA的过程是指将分散好的组织细胞在含SDS（十二烷基硫酸钠）和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质，再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质，得到的DNA溶液经乙醇沉
最新液相色谱柱知识分享和选择技巧
现代高效液相色谱分析中，色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多，不同类型的色谱柱分离对象不同，因此，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。色谱柱参数 物理性质：柱长，内径，如250*4.6mm。一般
氨逃逸监测系统知识分享丨怎么制取氨气？
怎么制取氨气？实验室制法：1.用氮化物制取氨气可以用氮化物与水反应或者叠氮化物分解。如：Li3N + 3H2O = 3LiOH + NH3↑2.加热浓氨水反应原理：NH3·H2O =△= NH3↑+H2O。这种方法一般用于实验室快速制氨气。装置：烧瓶，酒精灯，铁架台，橡胶塞，导管等。注意事项：加热浓
知识分享：去泛素化酶（DUBs）家族专题介绍
去泛素化酶（DUBs）,是一类数量很大的蛋白酶类家族。它主要通过水解泛素羧基末端的酯键、肽键或异肽键，将泛素分子特异性的从链接有泛素的蛋白质或者前体蛋白水解下来。人类基因组编码近100种去泛素酶，使得它们成为泛素系统酶中最大家族。在人类中的去泛素化酶基因，可分为两大类：半胱氨酸蛋白酶家族和金属蛋
知识分享：教你辨析标记基因和报告基因
一、标记基因和报告基因的概念 标记基因(marker gene)，是一种已知功能或已知序列的基因，能够起着特异性标记的作用。标记基因是选择标记基因的简称，是指其编码产物能够使转化的细胞、组织具有对抗生素等的抗性，或者使转化细胞、组织具有代谢的优越性。在培养基中加入抗生素等选择试剂的条件
最全面的二极管知识分享
二极管由管芯、管壳和两个电极构成。管芯就是一个PN结，在PN结的两端各引出一个引线，并用塑料、玻璃或金属材料作为封装外壳，就构成了晶体二极管，如下图所示。P区的引出的电极称为正极或阳极，N区的引出的电极称为负极或阴极。二极管的伏安特性半导体二极管的核心是PN结，它的特性就是PN结的特性——单
重庆启动科研仪器、紧缺人才等分享工程
近日，重庆市政府常务会议审议通过了《关于培育和发展分享经济的意见》,提出分享经济是利用互联网等现代信息技术整合、分享海量分散化闲置资源，连接、配置最优供需资源的信息经济新形态。加快培育和发展分享经济有利于促进供给侧结构性改革，推动资源合理配置和高效利用，倒逼经济转型升级，释放发展潜力和活力，打造
[分享]－[分享]培养基的制备、使用常见问题解答
一、培养基的制备 正确制备培养基时微生物检验的最基础步骤之一。使用脱水培养基和其他成分，尤其是含有有毒物质(如胆盐或其他选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。 使用商品化脱水合成培养基制备培养基时，应严格按
分享细胞培养技术注意事项
细胞培养技术注意事项大汇总:1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或
关于毛囊干细胞的分享培养介绍
毛发的周期性自我更新以及生长依赖于毛囊干细胞（hair follicle stem cells，HFSCs）周期性增殖和分化。研究认为HFSCs 定位于毛囊外根鞘的隆突区，大致是毛囊外根鞘最外层靠近立毛肌附着点处。研究HFSCs 对于秃发的发病机制、毛囊组织工程以及干细胞或基因治疗秃发方面均有重
恒温培养摇床知识介绍
恒温培养摇床具有不锈钢万用夹具、数显控温、无级调速和良好的热循环功能，是一种多用途的生化器，是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研，教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备，适用于各大中院校、油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作生物、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振
恒温培养摇床知识介绍
恒温培养摇床具有不锈钢万用夹具、数显控温、无级调速和良好的热循环功能，是一种多用途的生化器，是植物、生物、微生物、遗传、病毒、环保、医学等科研，教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备，适用于各大中院校、油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作生物、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振荡
细胞培养知识（一）
无菌操作基本技术 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70% ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细
酵母培养的相关知识
酵母细胞的培养专题问：现在老板要我养酵母，本人对酵母这块不是很了解，希望帮友发一些酵母的基础知识以及酵母培养中需要注意的问题和培养酵母的培养基 的配制等等，多谢大家!答：酵母菌是一些单细胞真菌 ，目前已知有1000多种酵母。酵母可以通过出芽进行无性生殖，也可以通过形成子囊孢子进行有性生殖。无性生
细胞培养知识（二）
4. 配制培养基之生长测试 4.1. 材料： 4.1.1. MDCK cell (ATCC CCL-34 或CCRC 60004) 4.1.2. 6-well TC plate (or 35 mm TC dish) 4.1.3. methanol 4.1.4. glacial acetic acid
15种蛋白质单晶培养的方法
15种蛋白质单晶培养的方法：（1）大量养晶法（bulk crystallization）：若急着养出单晶，则将纯化之蛋白质溶液加入固体盐类或饱和盐液，直到溶液中出现乳白混浊色，离心后把上清液（suppernatant）放置数天至数周，有可能养出单晶。（2）批次养晶法（batch method）:若发
15种蛋白质单晶培养的方法
15种蛋白质单晶培养的方法：（1）大量养晶法（bulk crystallization）：若急着养出单晶，则将纯化之蛋白质溶液加入固体盐类或饱和盐液，直到溶液中出现乳白混浊色，离心后把上清液（suppernatant）放置数天至数周，有可能养出单晶。（2）批次养晶法（batch method）:
最全的液相色谱柱知识分享和选择技巧
现代高效液相色谱分析中，色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多，不同类型的色谱柱分离对象不同，因此，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。 色谱柱参数 物理性质 柱长，内径，如250*4.6mm