新型AdvanceBio酰胺HILIC色谱柱,一键实现多聚糖分离分析

糖基化通常作为生物治疗药物的关键质量属性(CQA)或产品质量属性进行监测。亲水相互作用色谱(HILIC)是用于游离 N- 糖分析的主要色谱柱技术。具有复杂 N- 糖图谱的蛋白质进行 HILIC 分离分析时仍然存在技术挑战,如关键多聚糖对的共洗脱(图 1)。特别是使用荧光检测器(FLD) 时,多聚糖共洗脱会对多聚糖相对定量带来挑战,只能通过大幅延长 HILIC 梯度时间来解决。图 1. InstantPC 标记的西妥昔单抗 N-糖的 LC/FLD 色谱图 (A)。根据 MS 数据生成的提取化合物色谱图显示,荧光曲线中的其他多聚糖峰不明显 (B)▷ 通过改变流动相浓度来调节电荷基团选择性的色谱柱为了解决上述问题,安捷伦开发了新型 AdvanceBio 酰胺 HILIC 色谱柱。这款色谱柱基于酰胺键合相,同时在工艺上使得其对流动相例子强度的变化做出响应。因此可以通过调节流动相离子强度来改变带电糖型的分离和选择性(图 2)。图......阅读全文

氨基柱测试报告,附原理、特点

  写这篇文章的起因是毛毛在实验的过程中发现氨基柱损耗太快,所以一时心血来潮,找了几个厂家的氨基柱进行测试。测试结果只代表个人测试情况,仅供参考。  氨基柱简要介绍  1. 原理  氨基柱主要以氨丙基作为键合相,利用氨基的性能进行分离。其特点是分离范围极宽,但是色谱柱稳定性差。为了解决其稳定性问题,

液相色谱仪色谱柱的分离条件

 多数液相色谱仪色谱柱有很宽的试验条件范围,但具体应用又受到限制,主要是pH值、柱温和流动相的选择。  传统硅胶为基质的键合相要求pH值在2~8之间,极端pH值的流动相能“溶解”硅胶,使键合相流失。结构非碱性组分的保留不断减少,碱性组分的保留增加,引起碱性组分峰变宽。如果一定要用高或低pH值的流动相

液相色谱仪色谱柱的分离条件

多数液相色谱仪色谱柱有很宽的试验条件范围,但具体应用又受到限制,主要是pH值、柱温和流动相的选择。  传统硅胶为基质的键合相要求pH值在2~8之间,极端pH值的流动相能“溶解”硅胶,使键合相流失。结构非碱性组分的保留不断减少,碱性组分的保留增加,引起碱性组分峰变宽。如果一定要用高或低pH值的流动相,

色谱柱的分离柱效好坏由什么决定?

决定相邻组分分离好坏的主要因素有:*,两个组分的保留值之差,也就是色谱柱内迁移速率的差异;它取决于各组分与固定相、流动相的相互作用的差异。第二,组分的峰宽反映组分区带在移动过程中的扩张程度,很大程度上取决于色谱的分离条件。  在考虑液相色谱色谱柱的分离柱效时,需要特别注意以下几个问题。  *

薄层色谱技术放大柱分离操作

装柱装柱子(添硅胶)时,常用的有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(称为固定相更为广义)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右(长度没有绝对之说,根据自身情况而定,制备的大柱可以长达一米),太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致

2.5-µm色谱柱改善分离度

目标 证明在应对分离挑战时,XP 2.5 µm色谱柱相较于传统HPLC粒径色谱柱具有更好的分离性能。 背景 将方法转移至较小粒径上可以缩短分析时间已成为共识。其实,这样做还可以改善分离度。但是,随着粒径变小,柱压将会增加。使用亚2µm色谱柱可能需要用到UPLC®系统,但HPLC用户

液相色谱柱分离机理

液相色谱柱分离机理

色谱柱参数对分离的影响

气相色谱分析中柱长、柱内径、柱温、载气流速、固定相、进样等操作条件对分离的影响 1、柱长,柱内径:一般讲,柱管增长,可改善分离能力,短则组分馏出的快些;柱内径小分离效果好,柱内径大处理量大,但柱内径过大,将导致担体不能均匀地分布在色谱柱中。分析用柱管一般内径为3-6毫米,柱长为1-4米。2、柱温:是

制备色谱柱特点及分离步骤

制备色谱柱分离性能测试的步骤:    ① 考虑到填料由分析级直接放大到制备级的因素,如果要纯化大量的化合物,需要考虑分析柱的规格和可作为制备柱的填料粒径(10μm或更大);作为在下一步纯化产品量更大的项目,必须考虑选择更大的填料粒径和更大内径的色谱柱,在与分析柱相同的填料下对产品进行纯化。   

扩大范围的高效液相色谱柱新产品亮相ASMS-2010

  Thermo Scientific推出五种新型Hypersil GOLD系列色谱柱,进一步提高用户的灵活性   美国犹他州,盐湖城(2010年5月24日)——科学服务领域全球领导者赛默飞世尔公司,今天宣布推出5种新色谱柱,它们从属于Thermo公司高效液相色谱(HPLC)柱顶级产品——Hype

东曹盛装亮相CHINA-LAB-2012展览会

  2012年5月30日,东曹(上海)生物科技有限公司盛装亮相CHINA LAB 2012展览会,这也是东曹首次参展,向业界重点展示了多款产品,包括TSK-GEL反相色谱柱及HILIC亲水相互作用色谱柱、TSKgel Protein C4-300反相色谱分析柱、TSKgel STAT系列离子交换分析

乳品中双氰胺检测的沃特世完整解决方案

  近日,新西兰牛奶及奶制品被检测出含有低含量的有毒物质双氰胺,新西兰政府已经下令禁售含有双氰氨的奶类产品。国内的奶制品生产企业和政府监管部门也已开始着手建立相应的分析方法。   双氰胺的检测方法主要难点在于:   前处理:三聚氰胺的方法完全不适用,双氰胺极性很大,一般的小柱无法保留;   L

中药配方颗粒:特征图谱建立与指标成分含量测定

  为了进一步规范中药配方颗粒的生产,保证临床疗效,国家药典委及各省药监局陆续发布了中药配方颗粒国家级、省级药品标准。  不同中药品种中成分复杂、特定组分紫外吸收弱,这无疑给中药配方颗粒的质量研究带来一定挑战。CAD电雾式检测器具有灵敏度高、重复性好、线性范围广等优势,尤其对无紫外吸收物质的检测具有

乳品中双氰胺检测

近日,新西兰牛奶及奶制品被检测出含有低含量的有毒物质双氰胺,新西兰政府已经下令禁售含有双氰氨的奶类产品。国内的奶制品生产企业和政府监管部门也已开始着手建立相应的分析方法。 双氰胺的检测方法主要难点在于:前处理:三聚氰胺的方法完全不适用,双氰胺极性很大,一般的小柱无法保留;LCMS方法:C18无保留,

离子色谱仪客户有更多的选择和对比测试机会

 离子色谱仪是基于传统离子色谱仪技术的基础上,吸收较新技术成果,研发出的高精度、高灵敏度和高稳定性的新型离子色谱仪。该仪器拥有耐高压全PEEK流路,具有电子抑制无脉冲的平流泵,使流路更流畅,基线波动更小,可以大大提高检测下限和检测时间。同时配备了具有技术的自动再生抑制电导池,提高了检测的灵敏度,可以

分析色谱柱和制备色谱柱的区别

分析色谱柱和制备色谱柱的区别是什么目的不同。制备型的目的是利用色谱柱进行成分的分离,用来收集组分;\分析型的目的是分析,测定含量或杂质。

LCGC博客:探索用于HILIC分离的固定相

  几年前我在一次会议上发言,正在描述我们使用混合模式色谱以及它帮助我们解决的难题。当我描述使用混合模式色谱柱时需要考虑(并优化)的变量的数量和类型时,听众中会有嚎叫,这些抱怨主要集中在复杂性以及这些方法如何稳定,而我们已经有足够的变量来考虑,我们不需要更多的选择性等等。  亲水相互作用液相色谱(H

ACE反相系统性方法(二)

1近似值– 通过半定量机制加权和/或通过参考使用>100特征分析物的其他ACE相来确定。 • 其他的ACE方法包还有HILIC分析包, 生物大分子300Å分析包和实心核(UltraCore) 分析包• 同样提供微孔柱尺寸 (内径0.5和1.0mm)。成功范例对乙酰氨基酚及有关物质• 基于分析物的pK

柱色谱法分离条件的探索

柱色谱法分离条件的探索柱色谱法的实验条件,例如选用什么吸附剂和洗脱剂较好,各个组分按什么顺序从柱中洗脱出来,每一分洗脱液中是含单一组分或就含几种没有分开的组分等,都可以在薄层上进行探索和检验。薄层上所有的展开剂虽不完全照搬柱色谱法上,但仍有参考价值。

液相色谱仪组成之分离柱

 担负分离作用的色谱柱是液相色谱仪的心脏,柱效高、选择性好、分析速度快是对色谱柱的一般要求。商品化HPLC微粒填料,粒度通常为3µm、5µm、7µm及10µm。超高压液相色谱中采用的固定相粒度甚至可以小到1µm,而制备色谱所采用的固定相粒度通常大于10µm。   填充HPLC柱柱效的理论值可达到每米

生物样品分离技术柱色谱法

用能吸附蛋白质的材料装填成小柱,使欲除蛋白质的样品流过小柱,样品中的蛋白质被柱填料吸附,欲测组分不被吸附,从小柱中流出。现已有厂家将这种小柱做成商品出售,称为预柱。这种预柱可以直接连在HPLC的进样装置上,含蛋白质的样品通过预柱后可直接进入HPLC系统分析。如分析尿中的某些代谢产物时,可将样品通过预

IC色谱分离柱的保养与再生

离子色谱(IC)是非常精密的分析仪器。通常,IC样品都需要前处理后,方可进样分析,不建议用户未经任何处理直接进样!分离柱(A Supp5 阴离子)部分维护注意pH范围3-12,浓酸、浓碱必须经处理后方可进样样品要事前过滤(0.45μm),流速

影响色谱柱分离度的因素介绍

影响色谱柱分离度的因素是固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质等。具体如下:(1)色谱长度和填料的性质,色谱柱越长,组分之间分析越好,但色谱柱越长压降越大,而输入的压力是有限的。色谱柱过长会增大进出口压力比,相反会影响色谱峰分离;(2)色谱

液相色谱柱分离效果的好坏

液相色谱柱具有高表面覆盖率和完全封尾的特点,提高了我们色谱柱的稳定性,适合pH值1.5~10.0很宽范围内的色谱分析。我们对的基质上进行的键合反应进行了特别的优化。独特的双封尾技术使我们的色谱柱对中性、极性、酸性和碱性以及螯合化合物的分析具有最优的分离效率。    液相色谱柱采用高纯硅胶为基质,键合

常用液相色谱柱按照分离模式

色谱柱常用液相色谱柱按照分离模式大致可以分为吸附、分配、键合相、离子交换、疏水作用、体积排阻(凝胶)、亲和及手性等类型,表给出了不同类型色谱柱的分离原理及应用情况。

维护好色谱分离柱的方法

液相色谱仪的分离是在色谱分离柱中实现的。我们目前工作中多采用反相色谱柱,如何保护好分离柱减少柱的污染是延长柱寿命的关键。  1、维护好色谱分离柱的方法  加保护柱(预柱)是保护分离柱的有效办法。保护柱是根内装填料与分离柱性质相近的短柱,接在分离柱之前,或代替流路过滤器。保护柱的作用是收集和阻塞分离柱

液相色谱柱分离效果的好坏

 液相色谱柱具有高表面覆盖率和完全封尾的特点,提高了我们色谱柱的稳定性,适合pH值1.5~10.0很宽范围内的色谱分析。我们对的基质上进行的键合反应进行了特别的优化。独特的双封尾技术使我们的色谱柱对中性、极性、酸性和碱性以及螯合化合物的分析具有zui优的分离效率。    液相色谱柱采用高纯硅胶为基质

离子色谱质谱联用技术独特的原理和优势

超强离子分离,更多色谱信息——基于离子交换的分离原理离子色谱主要使用离子交换的分离原理,和常规液相色谱主要基于疏水吸附的反相分离原理形成互补,可以很好分离常规液相色谱难以分离的强极性可电离物质。即使是基于亲水相互作用的HILIC色谱,可以分离强极性物质,但也难以分离强电离物质。不同技术对复杂代谢物组

凝胶色谱柱适用于分析分离蛋白和多肽类样品

凝胶色谱柱专为合成高分子在高温条件下的GPC分离而设计。该填料为高硬度且经过表面修饰的硅胶颗粒,可解决有机聚合填料如PS/DVB等在有机溶剂中遇高温溶胀的难题。在有机溶剂中可在高温度条件下保持高度稳定。此外,它还具有低的传质阻力,从而可确保了分离中的高的分离效率。凝胶色谱柱的填料是亲水而刚性,多孔球

日常分离分析工作中,色谱柱的正确使用和维护

在日常分离分析工作中,色谱柱的正确使用和维护十分重要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。  (1)柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。  (2)如