JCI:应用FISH技术检测肿瘤microRNA

霍华德•休斯医学研究所(HHMI)的研究人员通过微调荧光探针的设计以及RNA固定技术,开发出一种检测和定量肿瘤活检样本中microRNA分子的方法。这种新的荧光原位杂交(FISH)技术实现了肿瘤类型的鉴定。《The Journal of Clinical Investigation》杂志近日刊登了这一成果。 文章的通讯作者,霍华德•休斯医学研究所的研究员Thomas Tuschl认为:“之前人们开发出RNA FISH方法,但它存在很多问题。我认为这篇文章是一个新的基础,说明过去许多观点是错误的,但没有化学家进入这一领域,真正优化这些方法。” 对于microRNA的检测,实时定量PCR等方法较为常用,但会抹去组织样本中宝贵的空间信息。在 FISH技术中,荧光探针与特定RNA或DNA序列结合,产生荧光,可通过显微镜检测。由于许多癌症包含独特的microRNA或microRNA组合,故这些分子的检测也许有助......阅读全文

细胞遗传学——原位杂交(ISH)

In Situ Hybridization·         In Situ Hybridization (jsmith1@po-box.mcgill.ca)In situ hybridization, as the name suggests, is a method of localizing,

石蜡切片或细胞的原位杂交实验

            实验材料 石蜡切片 试剂、试剂盒 HCl 二甲苯 乙醇 SSC

石蜡切片或细胞的原位杂交实验

细胞RNA的原位杂交实验用于在混杂的细胞群体和组织中、定位特异的mRNA在细胞中的存在位置。实验材料石蜡切片试剂、试剂盒HCl二甲苯乙醇SSCPBS链霉蛋白酶甘氨酸DTTRNA酶消化液乙酸铵仪器、耗材染色盘加湿盒载玻片烘箱水浴锅培养箱实验步骤1.  准备脱蜡/再水化系统(可重复使用数次)及0.2 m

石蜡切片或细胞的原位杂交实验

实验材料 石蜡切片试剂、试剂盒 HCl二甲苯乙醇SSCPBS链霉蛋白酶甘氨酸DTTRNA酶消化液乙酸铵仪器、耗材 染色盘加湿盒载玻片烘箱水浴锅培养箱实验步骤 1.  准备脱蜡/再水化系统(可重复使用数次)及0.2 mol/l HCl同时,将载有切片样品的载玻片(玻片盒中,于-20℃或-70℃贮存)置

原位杂交与荧光原位杂交

 一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛

原位杂交与荧光原位杂交

 一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛

原位杂交与荧光原位杂交

一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛应

腺泡细胞癌的病因

  肿瘤的细胞形态完全与腺泡的浆液细胞相似,所以认为腺泡细胞癌发生于腺泡细胞。但在病变中见有闰管细胞,并有由闰管细胞到腺泡细胞过渡,所以认为腺泡细胞癌来源于闰管上皮。  闰管上皮细胞病变(50%)  肿瘤的细胞形态完全与腺泡的浆液细胞相似,所以认为腺泡细胞癌发生于腺泡细胞,但在病变中见有闰管细胞,并

腺泡细胞癌的诊断

  由于临床上无特征性表现,虽然经涎腺造影、CT、B型超声及放射性同位素扫描等特殊检查,但术前也难以作出正确诊断, 一般需在病理检查后方能确诊。

胆管细胞癌的简介

  [病因病理]  肝内胆管癌即从肝左右管合流部(肝门部)至末梢的胆管上皮细胞发生的癌。组织学表现为腺样分化或伴有粘液分泌,富于纤维性间质,比肝细胞癌硬。根据其发生部位分为末梢型胆管癌(肝内胆管瘤)及肝门部胆管癌。  [临床表现]  临床症状因发生部位不同而异。末梢型胆管癌早期无症状,晚期可有上腹不

燕麦细胞癌的治疗

   除了传统的手术、化疗以、放疗及中医的治疗方法。新兴的CLS-MCT多细胞免疫治疗突破了传统治疗肿瘤“不彻底”、“易复发”、“副作用大”的三大瓶颈,治疗效果迅速,没有任何毒副作用。并且和手术治疗、化疗和放疗方法一起应用会有很强的互补作用。该疗法解决了手术和放化疗存在的不足,也增强了治疗效果,更重

胆管细胞癌的症状

  黄疸:通常为中上腹或右上腹疼痛,逐渐加重,可放射至背部或右肩胛处,伴恶心呕吐、厌食、消瘦、乏力、贫血、皮肤瘙痒、尿色加深等,大便多呈陶土色。  肝大:可触及明显肿大的胆囊,如合并胆道感染可出现明显的压痛。  胆道感染:可出现典型的Charcot三联征(间歇性寒战、发热、黄疸),较少见的是Reyn

燕麦细胞癌的分类

   燕麦细胞癌是小细胞肺癌的亚型分支。燕麦细胞癌在电镜下胞质内可见神经内分泌颗粒,属肺神经内分泌癌。近20%的肺癌患者属于小细胞肺癌(SCLC)或燕麦细胞癌,小细胞肺癌的肿瘤细胞倍增时间短,进展快,常伴内分泌异常或类癌综合征。

燕麦细胞癌诊断介绍

  痰细胞学检查  多数原发性肺癌病人在痰液中可找到脱落的癌细胞,并可判定癌细胞的组织学类型。因此痰细胞学检查是肺癌普查和诊断的一种简便有效的方法。中央型肺癌痰细胞学检查的阳性率可达70~90%,周围型肺癌痰检的阳性率则仅约50%左右,因此痰细胞学检查阴性者不能排除肺癌的可能性。  X线检查  诊断

GP73在肝细胞癌和胆管细胞癌中的表达

GP73在肝细胞癌和胆管细胞癌中的表达邹 凡1a,揭小华1a,巢映晖1b,傅华群1b,王荣胜2,王开阳1c,昌毓穗1d(1.南昌大学a.临床医学院2012级;b.第二附属医院肝胆外科;c.第二附属医院急诊科;d.附属医院急诊科;2.江西省人民医院ICU,南昌330006)摘要:目的 探讨血清高尔

原位杂交仪原位杂交的意义

  原位杂交:在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应用带有标记的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DNA或R

原位杂交仪—原位杂交实验(二)

  原位杂交第二天  1.  1)将探针回收,放于-20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。  2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。  3)置换2XSSCT1ml,60℃,放置15分钟。  4)置换0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。 

荧光原位杂交的荧光原位杂交

荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。探针首先与某种介导分子(reporter molecule)结

原位杂交仪—原位杂交实验(三)

  原位杂交第三天  1) 用1ml含10%热灭活血清的MABT溶液置换抗体溶液,放置摇床上25分钟,然后用1mlMABT置换,25分钟,再用1mlMABT溶液置换,一小时以上,最后用1mlMABT溶液置换,25分钟。  2) 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置

原位杂交仪—原位杂交试验(一)

  收集斑马鱼的胚胎,在Holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小时后用50%甲醇2%多聚甲醛溶液洗,然后换成甲醇,在-20C 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用双氧水处理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成)

FISH荧光原位杂交实验(原位杂交)

1. 实验目的        通过实验了解荧光原位杂交技术的基本原理和在生物学、医学领域的应用。掌握原位杂交技术的操作方法,熟练掌握荧光显微镜的使用方法。2. 实验原理        荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗

荧光原位杂交实验——荧光原位杂交技术

荧光原位杂交可应用于:(1)动植物基因组结构研究;(2)染色体精细结构变异分析;(3)病毒感染分析;(4)肿瘤遗传学和基因组进化研究。实验方法原理用已知的标记单链核酸为探针,按照碱基互补的原则,与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合,形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵

细胞组分的分析方法——核酸序列的原位杂交

一.基本原理  核酸分子杂交技术是目前分子生生物学、细胞生物学和生物化学研究中应用最广泛的技术之一,是定性、定量和定位检测两条来源不同的聚核苷酸链上碱基顺序同源性的一种手段。DNA分子是高度有序的双键分子。一条链的碱基与另一条链的碱基以氢键配对相连.形成腺嘌呤与胸腺嘧啶(A.T),鸟嘌呤与胞嘧啶(G

胚胎癌性细胞的定义

中文名称胚胎癌性细胞英文名称embryonal carcinoma;EC cell定  义在胚胎发育早期形成的一种恶性肿瘤细胞,具有类似干细胞的多种分化潜能。应用学科遗传学(一级学科),发育遗传学(二级学科)

基底细胞癌的病因

  本病为来自基底细胞的恶性肿瘤,它与日光照晒有密切关系,所以它好发于日光照晒的头、面、颈部或手背等处。现在普遍认为它是来自表皮多潜能细胞的肿瘤,用单克隆抗体证实基底细胞癌来自表皮细胞。

基底细胞癌的诊断

  本病为侵袭性溃疡,有卷曲状珍珠色边缘,基底部呈黑色,慢性病程,确诊要依靠病理检查。组织病理学见表皮内基底细胞呈融浆状团块,边缘呈栅栏状排列,可有角质囊肿,诊断不难。

透明细胞癌的治疗

  冷冻疗法和加温疗法  冷冻疗法和加温疗法低温(-40℃以下)和高温(45℃以上)都可以将癌细胞杀死。因此人们开展了用液氮冷冻治疗浅表皮肤癌和某些良性皮肤肿瘤,以及局部加温治疗皮肤癌、四肢癌和膀胱癌。加温方法有短波、超短波、微波及激光等手段。  基因疗法  基因是细胞内的遗传物质,化学成分是脱氧核

肝细胞癌的病理特征

如同任何其他癌症一样,当细胞机制发生突变导致细胞以更高的速率复制和/或导致细胞避免凋亡时,肝细胞癌就会发展。 特别地,乙型肝炎和/或丙型慢性感染可以通过反复引起机体自身的免疫系统攻击肝细胞,其中一些被病毒感染,其他细胞的无视有助于肝细胞癌的发展。 虽然修复后的这种不断的损伤循环可能导致修复期间的错误

透明细胞癌的病因

  透明细胞癌的真正起因仍不能确定,认为能够引起透明细胞癌的有:放射线,包括太阳光,游离性辐射品,如铀、镭、紫外光线。可引起皮肤癌、骨癌和血液方面的癌症。化学物质  空气污染与吸烟  :产生碳氧化合物,易刺激呼吸道,引起肺透明细胞癌。饮食的不当:如嗜吃酸辣食物或腌浸蔬菜,易得胃透明细胞癌,而一些食品

鳞状细胞癌常见类型

常见类型包括:鳞状细胞皮肤癌:一种皮肤癌肺鳞状细胞癌:肺癌的一种鳞状细胞甲状腺癌:一种甲状腺癌食管鳞状细胞癌:一种食管癌阴道鳞状细胞癌:一种阴道癌尽管同名“鳞状细胞癌”,但不同身体部位的鳞状细胞癌在症状、自然病程、预后和对治疗的反应方面存在差异。