细胞遗传学——原位杂交(ISH)
In Situ Hybridization· In Situ Hybridization (jsmith1@po-box.mcgill.ca)In situ hybridization, as the name suggests, is a method of localizing, either mRNA within the cytoplasm or DNA within the chromosomes of the nucleus, by hybridizing the sequence of interest to a complimentary strand of a nucleotide probe. This is a general guide to in situ hybridizati......阅读全文
细胞遗传学——原位杂交(ISH)
In Situ Hybridization· In Situ Hybridization (jsmith1@po-box.mcgill.ca)In situ hybridization, as the name suggests, is a method of localizing,
原位杂交(In－Situ－Hybridization,ISH)与荧光原位杂交（三）
（1）DAN斑点杂交①先将膜在水中浸湿，再放到15×SSC中。②将DNA样品溶于水或TE，煮沸5min，冰中速冷。③用铅笔在滤膜上标好位置，将DNA点样于膜上。每个样品一般点50μl（2～10μg DNA）。④将膜烘干，密封保存备用。（2）RNA斑点杂交：与上法类似，每个样品至多加10μg总RNA（
原位杂交(In－Situ－Hybridization,ISH)与荧光原位杂交（一）
是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一，广泛应用于肿瘤生物学、血液病理学、遗传、微生物学、细胞和分子生物学、神经内分
原位杂交(In－Situ－Hybridization,ISH)与荧光原位杂交（五）
⑦60伏电泳过夜。 ⑧取出凝胶，水中浸泡2次，每次5min。 ⑨室温下将胶浸到50mmol/L NaOH和10mmol/l NaCl中45min，水解高分子RNA，以增强转印。 ⑩室温下将胶浸到0.1mol/L Tris·HCl (Ph7.5)中45min，使胶中和。
原位杂交(In－Situ－Hybridization,ISH)与荧光原位杂交（六）
夹心杂交法可用滤膜和小珠固定吸附探针，使用小珠可更好地进行标准化试验和更容易对小量样品进行操作。Dahlen 等利用微孔板进行夹心杂交，可同时进行大量样品检测，他们先吸取DNA探针加到凹板中，然后用紫外线照射使其固定到塑料板上。用微孔板进行夹心杂交还可直接用于PCR技术。应用光敏生物标记探针
原位杂交(In－Situ－Hybridization,ISH)与荧光原位杂交（四）
（2）硝酸纤维素滤膜吸印。①将胶切成合适大小，切去右上角作为记号。②将胶放进盛有变性缓冲液（1.5mol/l NaCl, 0.5mol/L NaOH）的盘中轻摇动15min。③换到中和缓冲液（1mol/L Tris·HCl , pH8.0, 1.5mol/L NaCl）中轻摇动30min。④裁一张硝
原位杂交(In－Situ－Hybridization,ISH)与荧光原位杂交（二）
5．洗膜 取出塑料袋，用剪刀剪开，小心取出滤膜，立即浸入盛有2×SSC和 0.5%SDS溶液的盘中，室温下漂洗5min。再将滤膜移入2×SSC和0.1%SDS溶液中，室温下洗涤15min（轻轻摇动）。然后将滤膜移入 0.1×SSC和0.5%SDS溶液中；68℃轻轻摇动保温2h，更换缓冲液后继
荧光信号放大TSA优秀替代品—PSA技术（三）
灵活的工作流程：与IHC，ICC，ISH和流式细胞仪兼容： PSA™成像技术可适用于能在其检测方案中添加HRP的任何应用，并且与免疫学应用中常用的样品类型和荧光成像平台兼容。与传统的IHC，ICC，ISH和FC应用程序结合使用时，PSA™成像可显著提高检测灵敏度，而不会降
一例根据涂片及核型进行的病例分析
患者男，41岁，表现为贫血（血红蛋白112 g/dL）、白细胞增多（白细胞158.85 × 109/L）包括嗜碱性细胞增多（15.44 × 109/L）以及血小板增多（血小板467 × 109/L）。血涂片显示2%的原始细胞、嗜碱性细胞增多（9.7%）和嗜酸性细胞增多（图A）。抽吸液显示4%的原始细
细胞遗传学检查
1．染色体检查 染色体检查亦称核型分析（karyotype analysis)是确诊染色体病的主要方法。目前随着显带技术的应用以及高分辩率染色体显带技术的出现和改进，能更准确地判断和发现更多的染色体数目和结构异常综合征，还可以发现新的微畸变综合征。值得注意的是，染色体检查应结合临床表现
荧光原位杂交技术的发展历程
1969年，Pardue和John等两个研究小组开始采用放射性标记DNA或28S RNA发明了原位杂交技术（ISH）。尽管当时原位杂交技术已经具有较高的特异性和灵敏度，但鉴于放射性同位素自身特性的局限，如安全性、空间分辨率低、不稳定性等问题，这项技术仅限于实验室研究方面的应用。 1986年科研
临床FISH：为疾病治疗带来新视角
病理学家是形态学的支持者。对他们来说，组织切片上的点点颜色能帮助你区分良性和病变的组织，为治疗提供线索。当然，关键词是“染色”。组织切片在光学显微镜下是没有特征的，因此病理学家（研究人员）必须染色，才能看见细胞。 在许多情况下，苏木精和曙红（H&E）染色就足够了，这揭示了基本的组织结构。不过，
罗氏新款双原位杂交伴随诊断试剂盒－致力个性化医疗
罗氏（Roche）近日宣布推出新的VENTANA HER2 Dual ISH DNA Probe Cocktail assay（VENTANA HER2双原位杂交DNA探针鸡尾酒检测法），用于检测乳腺癌和胃癌中的HER2生物标志物。HER2（人表皮生长因子受体2）是乳腺癌和胃癌的重要生物标志物，
细胞遗传学的简介
细胞遗传学，同时也是在细胞层次上进行遗传学研究的遗传学分支学科 行为和传递等机制及其生物学效应。 遗传学和细胞学结合建立了细胞遗传学，主要是从细胞学的角度, 特别是从染色体的结构和功能, 以及染色体和其他细胞器的关系来研究遗传现象, 阐明遗传和变异的机制。 细胞遗传学是遗传学与细胞学相结合的
细胞遗传学的分析
染色体携带着遗传物质。了解染色体的结构和功能是遗传学的重要任务之一。染色体数目和结构的异常伴同许多疾病，包括与妇产科有关的遗传性疾病。所以在显微镜下作染色体的分析是检查和诊断妇产科遗传病症的有用工具。 1、进行细胞遗传学分析的指针： ① 肯定和排除某些已知的染色体综合征的诊断； ② 性分化
细胞衰老的遗传学派
认为衰老是遗传决定的自然演进过程，一切细胞均有内在的预定程序决定其寿命，而细胞寿命又决定种属寿命的差异，而外部因素只能使细胞寿命在限定范围内变动。 有以下三种学说 第一种 细胞有限分裂学说 L.Hayflick (1961)报道，人的纤维细胞在体外培养时增殖次数是有限的。后来许多实验证明
细胞遗传学的研究
从细胞遗传学衍生的分支学科主要有体细胞遗传学——主要研究体细胞，特别是离体培养的高等生物体细胞的遗传规律；分子细胞遗传学——主要研究染色体的亚显微结构和基因活动的关系；进化细胞遗传学——主要研究染色体结构和倍性改变与物种形成之间的关系；细胞器遗传学——主要研究细胞器如叶绿体、线粒体等的遗传结构；
单克隆抗体技术方面的著名企业名录
Pharmengen： 世界上基础研究中最值得信赖的抗体生产商，其提供的小鼠单抗被最为广泛的应用于免疫学及其它研究，质量最为可靠。其主要产品涉及流式细胞、免疫化学、免疫组织化学、原位杂交、微生物检验等。此外其还提供各类免疫学研究用试剂。现以成为B.D.公司旗下主力舰之一。 DAKO： 丹麦的国际著名
石蜡切片或细胞的原位杂交实验
细胞RNA的原位杂交实验用于在混杂的细胞群体和组织中、定位特异的mRNA在细胞中的存在位置。实验材料石蜡切片试剂、试剂盒HCl二甲苯乙醇SSCPBS链霉蛋白酶甘氨酸DTTRNA酶消化液乙酸铵仪器、耗材染色盘加湿盒载玻片烘箱水浴锅培养箱实验步骤1. 准备脱蜡/再水化系统（可重复使用数次）及0.2 m
石蜡切片或细胞的原位杂交实验
实验材料 石蜡切片 试剂、试剂盒 HCl 二甲苯 乙醇 SSC
石蜡切片或细胞的原位杂交实验
实验材料 石蜡切片试剂、试剂盒 HCl二甲苯乙醇SSCPBS链霉蛋白酶甘氨酸DTTRNA酶消化液乙酸铵仪器、耗材 染色盘加湿盒载玻片烘箱水浴锅培养箱实验步骤 1. 准备脱蜡/再水化系统（可重复使用数次）及0.2 mol/l HCl同时，将载有切片样品的载玻片（玻片盒中，于-20℃或-70℃贮存）置
细胞遗传学——染色体
Chromosome Staining and Banding Technique (Primate Cytogenetics Network)Protocols for different staining method, each is in great detail. Karyotype A
细胞遗传学的基本简介
细胞遗传学（英语：Cytogenetics）是遗传学下的一个分支，主要研究的是染色体与细胞表现之间的关系（尤其是在有丝分裂和减数分裂期间）。与之相关的技术包括核型、G显带染色体分析、其他遗传显带技术，以及诸如荧光原位杂交（FISH）和比较基因组杂交（CGH）等分子遗传学技术。
细胞遗传学的发展历史
细胞遗传学，同时也是在细胞层次上进行遗传学研究的遗传学分支学科 行为和传递等机制及其生物学效应。 遗传学和细胞学结合建立了细胞遗传学，主要是从细胞学的角度, 特别是从染色体的结构和功能, 以及染色体和其他细胞器的关系来研究遗传现象, 阐明遗传和变异的机制。 细胞遗传学是遗传学与细胞学相结合的
体细胞遗传学的研究
高等生物的遗传学研究一般都通过分析遗传性状在有性生殖子代中的分布和出现频率来进行。可是高等生物的生殖周期长，子代个体数目少，对于人类来讲则又不能在严格的实验条件下进行杂交实验，所以给研究带来了一定的困难。但是作为高等生物个体生命活动的基本单位的每一体细胞一般都包含着全套基因组，因此将体细胞在离体
体细胞遗传学的介绍
体细胞遗传学（somatic cell genetics）是以体外培养的高等动植物和人的体细胞为主要研究对象的遗传学分支学科，体细胞遗传学以高等生物的体细胞为实验材料，采用细胞离体培养、细胞融合和遗传物质在细胞间转移等方法，研究真核细胞的基因结构功能及其表达规律等，克隆技术的发展和成就，使人们期
体细胞遗传学的应用
应用细胞融合、染色体鉴定、生化鉴定、免疫学鉴定等技术，已经建立了许多种基因定位方法，使人的基因定位的研究取得了快速的进展。例如，可利用中国仓鼠的细胞和人的体细胞融合的杂种细胞在传代培养过程中不断排斥人的染色体的现象来进行基因定位：如发现杂种细胞中人的9号染色体被排斥后便失去ABO血型抗原，就可以
体细胞遗传学的简史
1907年，美国学者R·G·哈里森第一次把神经细胞在体外培养成活。1956年，美国学者T·T·帕克使单个哺乳动物体细胞在体外培养的条件下分裂增殖成功，首次提供了用微生物学方法在严格控制的条件下进行体细胞遗传学研究的材料，简化了体外获得高等动物体细胞克隆的程序，把体细胞遗传学的研究推进到一个新的阶
原位杂交与荧光原位杂交
一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一，广泛
原位杂交与荧光原位杂交
一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一，广泛应