蛋白质N端测序服务Edman法
服务简介几乎所有的蛋白质合成都起始于N-端,蛋白质N-端的序列组成对于蛋白质整体的生物学功能有着巨大的影响力。例如N-端序列影响蛋白质的半衰期,同时关联着蛋白亚细胞器定位等,这些与蛋白的功能和稳定性息息相关,对蛋白进行N-端测序分析,有利于帮助分析蛋白质的高级结构,揭示蛋白质的生物学功能。对蛋白N端测序主要分类两大类,其一为非质谱技术,其二为质谱技术。各自都有其使用的长处和制约之处。蛋白质和多肽N-端测序技术是以Edman化学降解法为基础的。Edman化学降解是测定蛋白质一级结构的方法主要是从蛋白质或多肽氨基酸末端进行分析,其基本原理是包括通过异硫氰酸苯脂与蛋白质和多肽的N-端残基的偶联,苯氨基硫甲酰酞(PTC-肽)环化裂解,和噻唑呤酮苯氨(ATZ)转化为苯异硫尿氨基酸(PTH-氨基酸)三个主要的化学步骤,每个循环从蛋白质与多肽裂解一个氨基酸残基,同时暴露出新的游离的氨基酸进行下一个Edman降解,而后通过转移的PTH-氨基酸鉴......阅读全文
蛋白质的微量测序分析实验1
验材料蛋白质试剂、试剂盒凝胶缓冲液谷胱甘肽疏基乙酸考马斯亮蓝仪器、耗材电泳仪微量注射器实验步骤1. 制备分离胶和积层胶溶液灌制变性微型凝胶。 2. 组装垂直凝胶电泳装置。 3. 将80 ml 4×凝胶缓冲液稀释至320 ml。将200 ml 1×凝胶缓冲 液倒入下层缓冲液槽。4. 剩余的1×
小小纳米孔破解蛋白质测序难题
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利用质谱技术测蛋白质的氨基酸序列成本多少
基于质谱的蛋白分析成本主要取决于两个方面:第一、质谱仪及其联用设备的类型,高分辨率高灵敏度质谱通常都大几百万甚至上千万人民币的;第二,数据处理方法,如果你用商业的数据分析软件比如mascot等;第三,样品处理方式,是简单鉴定还是相对定量或者绝对定量。ps:质谱技术很少能做氨基酸测序的(少部分如mal
创建精准N糖蛋白质组学分析方法
《pGlyco2.0:基于综合质控和一步质谱法的精准N糖蛋白质组学糖肽分析方法》(pGlyco 2.0 enables precision N-glycoproteomics with comprehensive quality control and one-step mass s
质谱技术在抗体药物分析中的应用
质谱技术是抗体药物分析最重要的技术手段之一。本文简述了抗体药物的发展和质谱技术的原理。对于质谱技术在抗体药物的分析中应用进行了归类整理,主要分为在一级结构和高级结构分析中的应用。抗体类药物是指含有抗体片段的蛋白类药物,所以在恶性肿瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病、感染和器官移植排斥等重大疾病上得到了快
质谱技术在抗体药物分析中的应用
质谱技术是抗体药物分析最重要的技术手段之一。本文简述了抗体药物的发展和质谱技术的原理。对于质谱技术在抗体药物的分析中应用进行了归类整理,主要分为在一级结构和高级结构分析中的应用。抗体类药物是指含有抗体片段的蛋白类药物,所以在恶性肿瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病、感染和器官移植排斥等重大疾病上得到了快
埃德曼降解法的概念和作用
埃德曼降解法(Edman degradation method)是蛋白质或肽的氨基末端分析法之一。由埃德曼(P.Edman)所创立。即在弱碱性条件下使之与异硫氰酸苯酯反应,然后用酸处理,从多肽链上仅使氨基末端残基以氨基酸的苯基乙内酰硫脲衍生物的形态游离出来,然后进行分析。根据反应试剂或衍生物的缩写,
布鲁克Pittcon2009推出多款新型高性能科学仪器和分析方法
2009年3月9日 在Pittcon2009年展会上,布鲁克公司推出多款新型科学仪器和分析方法。这些新产品和解决方案,主要是为常规分析提供更高效率和专一性,同时为先进的研究领域打开新的视野。 布鲁克在X射线、红外、核磁共振以及质谱仪器上,推出了几款方案导向的、单键操作(turn-ke
用循环测序法检测突变实验
实验材料血液或者其他来自待测个体的 DNA 材料试剂、试剂盒乙酸钠异丙醇TE 缓冲液分子质量标记物寡聚核苷酸测序引物多聚核苷酸激酶反应缓冲液多聚核苷酸激酶双脱氧核苷酸Taq DNA 聚合酶10 X 循环测序反应缓冲液矿物油终止液仪器、耗材热循环仪和管子实验步骤展开
美发现新型果蝇基因测序法
美国斯托瓦斯医学研究所开发出了一种名为“全基因组测序法”的果蝇突变基因测序法。研究人员称,在寻找果蝇突变基因上该方法能大幅减少时间和精力。相关研究发表在5月出版的《遗传学》杂志上。 据介绍,研究人员是通过测定果蝇突变后所产生的复合乙基甲(EMS)来绘制突变果蝇的基因图谱的。该结果将有助于对
蛋白质转印法检定蛋白质
蛋白质转印法检定蛋白质 蛋白质经SDS-PAGE后,胶片浸入转印缓冲液,蛋白质可被转印到硝化纤维纸(nitrocellulose) 上,先经?素洗去SDS,并使蛋白质回?原态抗原性,可使用抗体进?免疫染色 (Towbin et al, 1979)。仪器用具:电泳转印槽 (Hoefer Tra
色谱柱中封端?双封端与单封端指?
封端:键合步骤之后,用小分子硅烷将裸露的硅羟基键合,以便获得更大的覆盖率。封端多用于反相色谱键合中。封端可消除或减少可能发生的二级反应。没有封端的反相色谱填料通常比封端的有复杂多样的选择性。碱性物质在不封端的填料上,容易产生拖尾。封端基团在酸性条件下易水解,封端填料也不能在pH小于2的条件下使用。因
基因测序:技术大于服务,只顾着赚钱你就输啦
基因测序作为医疗健康行业的火爆技术,近年来越来越得到临床的认可,并逐步被应用到各大领域中。尤其是精准医疗概念提出以后,基因测序更是备受青睐,它为精准医疗解答了很多未知的问题。 如今,基因测序已经形成了一定的产业规模,大量的企业以不同形式跻身进来。基因测序越来越以服务的形式被公众所认识。与医疗健
长链非编码RNA测序服务助力揭开lncRNA神秘面纱
2012年12月18日,华大基因科技服务有限公司(简称“华大科技”)在国内推出长链非编码RNA测序(lncRNA-Seq)服务。该技术突破了常规研究方法效率低、研究范围受限的瓶颈,可一次性获得样本中几乎全部的lncRNA序列,不仅可以对已知lncRNA进行定量分析,还可对 novel lnc
如何使基因测序更好地服务于我国精准医疗
基因测序和精准医疗是近年来讨论很热的两个概念。这两个词之所以能联系到一起,主要还是因为越来越多与疾病有关的基因得到确认,而更加个性化诊疗的需求,正在对传统的医学模式提出挑战,同时技术进步导致基因测序成本大幅降低,使得人们看到了它应用于临床诊疗的前景。在美国NIH (国家卫生研究院)2015年颁
三代测序服务助力梭状芽胞杆菌研究
研究背景:含碳气体,如CO、CO2等,是重要的碳资源。构建能够高效利用含碳气体的人工细胞工厂,实现将其生物转化为石油基化学品,将为解决全球资源和能源问题开辟一条新路,对工业可持续发展具有重大意义。梭菌是一类重要的可利用含碳气体产生各类化学品的厌氧微生物。而其中,Clostridium carboxi
人N端前脑钠素(NTpro-BNP)ELISA试剂盒使用说明
原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 NT-pro BNP单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 NT-pro BNP与单抗结合,加入生物素化的抗人NT-pro BNP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,
氨基酸的测序的方法和原理
氨基酸测序分为N端测序和C端测序,原理是用氨肽酶(N端测序法)或羧肽酶(C端测序法)将肽链从一端依次切下,并在一段时间内检测切下的氨基酸的种类(时间过长则会出现多种氨基酸),并且重复该过程。必需氨基酸有9种:甲硫氨酸、缬氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、色氨酸、苏氨酸(可以用“甲借来一本两色
德国FESTO的端到端能力
汽车制造要想取得成功,就要更快、更灵活,最重要的是,更节能。Festo 为整个汽车制造过程链提供气动和电动解决方案,将气动和电动两种技术的作用发挥到J致,帮助您实现这一目标。 Festo 的端到端能力 详细了解我们针对汽车制造特殊区域提供的解决方案。只需点击相应的生产区域即可找到合适
蛋白质自动测序仪的基本结构
蛋白质自动测序仪结构非常复杂,基本组成构件包括反应器、转换器、进样器、氨基酸分析系统和信息软件处理系统[1]。 反应器反应器中进行 Edman化学降解反应中偶联反应和环化裂解反应。在偶联反应之前有一个样品固定过程,即将蛋白质样品固定在纤维板上或将转印有蛋白质斑点的聚偏二氟乙烯膜(FVDF)放置
气相蛋白质测序仪的用途介绍
中文名称气相蛋白质测序仪英文名称gas-phase protein sequencer定 义用气相层析检测氨基酸衍生物的方法来测定蛋白质或多肽序列的仪器。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
蛋白质转印法
蛋白质经SDS-PAGE后,胶片浸入转印缓冲液,蛋白质可被转印到硝化纤维纸(nitrocellulose) 上,先经尿素洗去SDS,并使蛋白质回復原态抗原性,可使用抗体进行免疫染色 (Towbin et al, 1979)。仪器用具:电泳转印槽 (Hoefer Transphor TE 52):转印
蛋白质印迹法
蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。蛋白质印迹法是由瑞士米歇尔弗雷德里
蛋白质印迹法
值得一提的是,western blot这个名称的由来很有意思。最开始做印迹工作的是一个叫做Edwin Southern的科学家,但印迹的对象是DNA链,他把这种技术称为Southern blot,后来类似的出现了两个过程相似,但是对象不同的印迹方法,一个针对RNA,一个针对蛋白质,人们分别把这两种技
新技术实现单端高通量测序的平衡易位携带者筛查
染色体平衡易位是人类中最多见的一类染色体结构畸变,在新生婴儿中的发生率约为1/500~1/1000。平衡易位携带者通常没有临床表征,传统的诊断办法无法识别胚胎的染色体平衡易位携带状态。如今,研究人员攻克技术难关,成功研发BaseMapping技术,实现了单端高通量测序的平衡易位携带者筛查。 新
DNA的黏端和平端的区别
用限制酶切割后得到的末端齐平就是平末端,一长一短就是粘性末端根据限制性内切酶切割DNA所产生的产物末端,发现限制性内切酶对DNA的切割有两种方式,即平切和交错切。所谓平切,就是限制性内切酶在DNA双链的相同位置切割DNA分子,这样产生的末端就是平末端。交错切就是限制性内切酶在DNA双链的不同位置切割
Sirt1-N端结构域调控Srit1去乙酰化酶活性
近日,来自美国华盛顿大学医学院的研究人员在国际期刊cell reports发表了他们的最新研究进展,他们发现去乙酰化酶Sirt1的N端结构域能够促进内源性Sirt1与NF-kB p65结合,执行去乙酰化酶活性。这项研究发现了调控Sirt1去乙酰化酶活性的新机制,具有一定意义。 研究人员指出,N
Illumina和生物梅里埃合作推出一项测序服务
抵御抗生素耐药性意味着临床医生们需要小型工具来鉴别出哪种感染是细菌性的,以及引发感染的细菌种类,同时还要揭示出这些细菌对于多种抗生素是否是敏感性的。近日,Illumina公司和生物梅里埃公司(bioMerieux)就通过联合研究推出了一项全基因组测序服务,目的在于改善医源性感染的控制和流行病学的
数字盘点:中国高通量测序、生物信息服务公司表
1. 华大基因 137台HiSeq;3台MiSeq; 31台Proton。 全方位高通量测序应用。 联系方式:400-706-6615,info@bgitechsolutions.com 2. 药明康德基因中心 4台HiSeq;4台MiSeq;1台Proton;2台PGM;1台Affy
数字盘点:中国高通量测序、生物信息服务公司表
1. 华大基因 137台HiSeq;3台MiSeq; 31台Proton。 全方位高通量测序应用。 2. 药明康德基因中心 4台HiSeq;4台MiSeq;1台Proton;2台PGM;1台Affymetrix。 是目前中国唯一的美国CLIA认证实验室。 科研服务、测序和芯片外包服务、