蛋白质N端测序服务Edman法
服务简介几乎所有的蛋白质合成都起始于N-端,蛋白质N-端的序列组成对于蛋白质整体的生物学功能有着巨大的影响力。例如N-端序列影响蛋白质的半衰期,同时关联着蛋白亚细胞器定位等,这些与蛋白的功能和稳定性息息相关,对蛋白进行N-端测序分析,有利于帮助分析蛋白质的高级结构,揭示蛋白质的生物学功能。对蛋白N端测序主要分类两大类,其一为非质谱技术,其二为质谱技术。各自都有其使用的长处和制约之处。蛋白质和多肽N-端测序技术是以Edman化学降解法为基础的。Edman化学降解是测定蛋白质一级结构的方法主要是从蛋白质或多肽氨基酸末端进行分析,其基本原理是包括通过异硫氰酸苯脂与蛋白质和多肽的N-端残基的偶联,苯氨基硫甲酰酞(PTC-肽)环化裂解,和噻唑呤酮苯氨(ATZ)转化为苯异硫尿氨基酸(PTH-氨基酸)三个主要的化学步骤,每个循环从蛋白质与多肽裂解一个氨基酸残基,同时暴露出新的游离的氨基酸进行下一个Edman降解,而后通过转移的PTH-氨基酸鉴......阅读全文
双脱氧法DNA测序实验——测序酶进行标记测序反应
在基本的双晩氧测序反应中,寡核苷酸引物退火于单链DNA摸板,在4种脱氧核糖核酸三磷酸存在时,引物为DNA聚合酶所延伸。反应混合物中也含有4种双脱氧核糖核苷三磷酸的其中一种,当它掺入到DNA的生长链时,可终止链的延伸。实验材料DNA试剂、试剂盒寡核苷酸引物测序酶终止混合液测序酶缓冲液焦磷酸酶混合液仪器
Sanger法测序的原理
就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成,每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP),并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基团,使延长的寡聚核苷酸选择性
人N端前脑钠素(NTpro-BNP)ELISA试剂盒
人N端前脑钠素(NT-pro BNP)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 NT-pro BNP单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 NT-pro BNP与单抗结合,加入生物素化的抗人NT-pro BNP,形成免疫
人N端前脑钠肽(NTproBNP)酶联免疫分析(ELISA)
人N端前脑钠肽(NT-proBNP)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中N端前脑钠肽(NT-proBNP)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人N端前脑钠肽(NT-proBNP)水平。用纯化
小鼠N端前脑钠素(NTpro-BNP)ELISA试剂盒
小鼠N端前脑钠素(NT-pro BNP)ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 NT-pro BNP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 NT-pro BNP与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠NT-pro BNP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的St
红细胞的N种死法
1、红细胞生成正常人红细胞的生成包括:造血干细胞阶段、红系祖细胞阶段、红系前体细胞的增殖与分化阶段、网织红细胞的增殖及成熟过程。红细胞是血液中数量最多的一种血细胞,也是脊椎动物体内通过血液运送氧气的最主要的媒介,同时还具有免疫功能。哺乳动物成熟的红细胞是无核的,这意味着它们失去了DNA。红细胞
南京大学研究团队实现纳米孔蛋白质组学重大突破
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/9/509528.shtm蛋白质是生命活动的执行者,由20种天然存在的蛋白质氨基酸构成。与高歌猛进的DNA测序技术相比,高灵敏、高通量的蛋白质测序技术的发展严重滞后,目前仅Edman降解法和质谱法能做到蛋白质测
临床检测,质谱服务端的125亿蓝海市场
质谱临床检测,IVD百亿市场新兴领域全球质谱仪市场发展相对稳定,2016年预计设备市场53亿美金,至2021年预计复合增长率约在7.9%,届时将有望达到77亿美元市场规模。国内质谱设备市场尚处于发展初期,98%左右质谱仍为进口品牌,以海关数据估算2016年中国质谱仪市场约在4.5亿美元左右。生物医药
测序巨头新突破:-Illumina将提供读长达10kb的测序服务
今年年初,Illumina公司的CEO Jay Flatley曾表示,公司将在第二季度推出基于Moleculo技术的服务。他果然没有食言。Illumina近日宣布其FastTrack服务将提供长读取测序服务和新的定相分析(Phasing Analysis)。 Illumina测序读
DNA测序方法自动测序法的操作步骤
一、准备工作1. BigDye测序反应试剂盒 主要试剂是BigDye Mix,内含PEZL四色荧光标记的ddNTP和普通dNTP,AmpliTaq DNA polymerase FS,反应缓冲液等。2. pGEM-3Zf (+) 双链DNA对照模板 0.2 g/L,试剂盒配套试剂。3. M13(-2
蛋白质的微量测序分析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 凝胶缓冲液谷胱甘肽疏基乙酸考马斯亮蓝仪器、耗材 电泳仪微量注射器实验步骤 1. 制备分离胶和积层胶溶液灌制变性微型凝胶。 2. 组装垂直凝胶电泳装置。 3. 将80 ml 4×凝胶缓冲液稀释至320 ml。将200 ml 1×凝胶缓冲 液倒入下层缓冲液槽。4.
蛋白质的微量测序分析实验
基本方案1 测定N-末端封闭蛋白质的内部序列 实验材料 蛋白质
蛋白质测序的目的和方法
所谓蛋白质测序,主要指的是蛋白质的一级结构的测定。蛋白质的一级结构(Primary structure)包括组成蛋白质的多肽链数目。很多场合多肽和蛋白质可以等同使用。多肽链的氨基酸顺序,它是蛋白质生物功能的基础。
注意事项/蛋白质测序仪
1.样品信息包括:样品编号、样品数量、样品量、浓度、蛋白质或多肽、样品纯度、溶剂种类。 2.样品N端未被封闭,不含干扰物质:去污剂、胺、盐分、氨基酸、非挥发性缓冲液、蛋白酶。 3.样品形式:最好是冻干粉或溶解于纯水的蛋白溶液。 4.样品如被修饰,请详细告知修饰方式。提供样品组织来源及制备方法信
蛋白质的微量测序分析实验
本方案1 测定N-末端封闭蛋白质的内部序列 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
酿酒行业N/蛋白质含量检测好方法
啤酒的生产是基于酵母的发酵,糖主要来自淀粉的麦芽(尽管其他谷物也可以使用)。酿造的基本原料是水、麦芽酵母和啤酒花来给啤酒调味。酿造过程通常包括几个步骤,从大麦的麦芽,直到包装和分销瓶装啤酒。氮蛋白含量的测定是一项基础性的检测方法,对酿造的各个环节都有很大的影响。意大利VELP是分析仪器解决方案提供商
中国高通量测序、生物信息服务公司表
1. 华大基因。 137台HiSeq;3台MiSeq; 31台Proton。 全方位高通量测序应用。 联系方式:400-706-6615,info@bgitechsolutions.com 2. 药明康德基因中心。 4台HiSeq;4台MiSeq;1台
大鼠N端前脑钠素(NTpro-BNP)ELISA试剂盒说明
原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 NT-pro BNP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 NT-pro BNP与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠NT-pro BNP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显
全基因测序法分析STEC
产志贺毒素大肠杆菌(STEC)是引起人类疾病的重要食源性致病菌之一,该分离菌能引起溶血性尿毒综合症(HUS),导致人体肾衰竭。2011年7月,由STEC引发的疫情曾在德国北部造成了至少22人死亡。事件爆发后,科研人员借助于快速全基因组测序方法分析疫情,并开发出一种实时荧光定量PCR检测试剂,精
化学修饰法测序原理
化学试剂处理末段DNA片段,造成碱基的特异性切割,产生一组具有各种不同长度的DNA链的反应混合物,经凝胶电泳分离。化学切割反应:包括碱基的修饰,修饰的碱基从其糖环上转移出去在失去碱基的糖环处DNA断裂。
双脱氧法DNA测序实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 寡核苷酸引物测序酶终止混合液测序酶缓冲液焦磷酸酶混合液仪器、耗材 离心机离心管微量滴定板实验步骤 1. 对于每个单链模板:将下列试剂混合于0.5 ml 微量离心管中(1)0.5 pmol 单链DNA模板(2)0.5 pmol 引物(3)1 μl 10×测序酶缓冲液(4
Sanger-法测序的原理简介
Sanger 法测序的原理就是利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成,每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP),并混入限量的一种不同的双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH
双脱氧法DNA测序实验
测序酶进行标记测序反应 α-标记核苷酸进行热循环测序反应 实验材料 DNA
蛋白质组学在植物科学研究中的应用
1 植物群体遗传蛋白质组学 1.l 遗传多样性蛋白质研究基于基因组学的一些遗传标记,如RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)、RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)、SSR(Simple Sequen
DNA测序的方法自动测序法的操作步骤
一、准备工作1. BigDye测序反应试剂盒 主要试剂是BigDye Mix,内含PEZL四色荧光标记的ddNTP和普通dNTP,AmpliTaq DNA polymerase FS,反应缓冲液等。2. pGEM-3Zf (+) 双链DNA对照模板 0.2 g/L,试剂盒配套试剂。3. M13(-2
DNA测序方法中自动测序法的操作步骤
基因分析仪(即DNA测序仪),采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳,应用该公司ZL的四色荧光染料标记的ddNTP(标记终止物法),因此通过单引物PCR测序反应,生成的PCR产物则是相差1个碱基的3'末端为4种不同荧光染料的单链DNA混合物,使得四种荧光染料的测序PCR产物可在一根毛
蛋白质质谱鉴定技术概述及常见问题解决方法
蛋白质(Protein)是生物体中含量最高,功能最重要的生物大分子,存在于所有生物细胞,作为生命的物质基础之一,蛋白质在催化生命体内各种反应进行、调节代谢、抵御外来物质入侵及控制遗传信息等方面都起着至关重要的作用,因此蛋白质也是生命科学中极为重要的研究对象。 现代研究结果发现越来越多的多肽
小小纳米孔破解蛋白质测序难题
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/6/503589.shtm
蛋白质的微量测序分析实验2
测定N-末端封闭蛋白质的内部序列实验材料蛋白质试剂、试剂盒乙酸NaOH丽春红染料三氟乙酸仪器、耗材纤维素膜离心管滤膜实验步骤1. 电泳分离目标蛋白并转移到硝酸纤维素膜。 2. 将硝酸纤维素膜放入盛有50 ml 含0.1%丽春红S料的1%乙酸水溶液的经酸洗的petri 玻璃培养皿。轻轻摇动1 mi
蛋白质的微量测序分析实验1
验材料蛋白质试剂、试剂盒凝胶缓冲液谷胱甘肽疏基乙酸考马斯亮蓝仪器、耗材电泳仪微量注射器实验步骤1. 制备分离胶和积层胶溶液灌制变性微型凝胶。 2. 组装垂直凝胶电泳装置。 3. 将80 ml 4×凝胶缓冲液稀释至320 ml。将200 ml 1×凝胶缓冲 液倒入下层缓冲液槽。4. 剩余的1×