蛋白质N端测序服务Edman法
服务简介几乎所有的蛋白质合成都起始于N-端，蛋白质N-端的序列组成对于蛋白质整体的生物学功能有着巨大的影响力。例如N-端序列影响蛋白质的半衰期，同时关联着蛋白亚细胞器定位等，这些与蛋白的功能和稳定性息息相关，对蛋白进行N-端测序分析，有利于帮助分析蛋白质的高级结构，揭示蛋白质的生物学功能。对蛋白N端测序主要分类两大类，其一为非质谱技术，其二为质谱技术。各自都有其使用的长处和制约之处。蛋白质和多肽N-端测序技术是以Edman化学降解法为基础的。Edman化学降解是测定蛋白质一级结构的方法主要是从蛋白质或多肽氨基酸末端进行分析，其基本原理是包括通过异硫氰酸苯脂与蛋白质和多肽的N-端残基的偶联，苯氨基硫甲酰酞（PTC-肽）环化裂解，和噻唑呤酮苯氨（ATZ）转化为苯异硫尿氨基酸（PTH-氨基酸）三个主要的化学步骤，每个循环从蛋白质与多肽裂解一个氨基酸残基，同时暴露出新的游离的氨基酸进行下一个Edman降解，而后通过转移的PTH-氨基酸鉴......阅读全文
新技术实现单端高通量测序的平衡易位携带者筛查
染色体平衡易位是人类中最多见的一类染色体结构畸变，在新生婴儿中的发生率约为1/500~1/1000。平衡易位携带者通常没有临床表征，传统的诊断办法无法识别胚胎的染色体平衡易位携带状态。如今，研究人员攻克技术难关，成功研发BaseMapping技术，实现了单端高通量测序的平衡易位携带者筛查。 新
Sirt1－N端结构域调控Srit1去乙酰化酶活性
近日，来自美国华盛顿大学医学院的研究人员在国际期刊cell reports发表了他们的最新研究进展，他们发现去乙酰化酶Sirt1的N端结构域能够促进内源性Sirt1与NF-kB p65结合，执行去乙酰化酶活性。这项研究发现了调控Sirt1去乙酰化酶活性的新机制，具有一定意义。 研究人员指出，N
焦磷酸测序复性和准确性可与Sanger测序法媲美
在Sanger测序问世后约20年的时间里，几乎所有的核苷酸序列都是由其测出来的。但是其通量已经达到了极限，每个反应步骤需花费很长时间，难以实现基因组水平的大规模测序。另外，在实际工作中，需要对已知序列的DNA片段进行重新测序，而这种分析往往需要检测几十个碱基即可。在这种情况下，花费数十小时获取几
磷酸化位点分析实验——高分辨凝胶电泳分离磷酸肽
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤在聚丙烯酰胺凝胶上用 2-DE 纯化磷酸肽是最近发表的制备技术，其结果与 2D-PP 结果相似。非变性凝胶等电聚焦结合碱性 40%PAGE 胶用于磷酸肽分离及比较分析。 32p 标记样品用放射自显影或磷储屏检测。用 Edman 测序方法鉴定蛋白质并确定磷酸化位
DNA的黏端和平端的区别
用限制酶切割后得到的末端齐平就是平末端，一长一短就是粘性末端根据限制性内切酶切割DNA所产生的产物末端，发现限制性内切酶对DNA的切割有两种方式，即平切和交错切。所谓平切，就是限制性内切酶在DNA双链的相同位置切割DNA分子，这样产生的末端就是平末端。交错切就是限制性内切酶在DNA双链的不同位置切割
首张人类蛋白质组测序草图绘成
据物理学家组织网19日报道，在人类基因组图谱（人类生命的基因“蓝图”）发布20年后，国际人类蛋白质组组织宣布，他们绘制出了人类蛋白质组首张测序草图，有望帮助科学家更好地理解生命并治疗疾病。 研究发表于最新一期《自然·通讯》杂志。研究成员之一、加拿大英属哥伦比亚大学血液研究中心的克里斯托弗·奥威尔
Nature－Methods－|－朝思暮想：单细胞蛋白质组测序之梦
近期，Nature Methods 杂志技术编辑Vivien Marx发表文章 A dream of single-cell proteomics，探讨了单细胞蛋白组学的发展，提出了该技术有可能会面对的问题和潜在解决方案。单细胞蛋白质组测序的梦想并不遥远（Credit: S. Larochell
Illumina和生物梅里埃合作推出一项测序服务
抵御抗生素耐药性意味着临床医生们需要小型工具来鉴别出哪种感染是细菌性的，以及引发感染的细菌种类，同时还要揭示出这些细菌对于多种抗生素是否是敏感性的。近日，Illumina公司和生物梅里埃公司（bioMerieux）就通过联合研究推出了一项全基因组测序服务，目的在于改善医源性感染的控制和流行病学的
数字盘点：中国高通量测序、生物信息服务公司表
1. 华大基因 137台HiSeq；3台MiSeq； 31台Proton。 全方位高通量测序应用。 2. 药明康德基因中心 4台HiSeq；4台MiSeq；1台Proton；2台PGM；1台Affymetrix。 是目前中国唯一的美国CLIA认证实验室。 科研服务、测序和芯片外包服务、
数字盘点：中国高通量测序、生物信息服务公司表
1. 华大基因 137台HiSeq；3台MiSeq； 31台Proton。 全方位高通量测序应用。 联系方式：400-706-6615，info@bgitechsolutions.com 2. 药明康德基因中心 4台HiSeq；4台MiSeq；1台Proton；2台PGM；1台Affy
蛋白质印迹法的测定蛋白质含量
1、制作标准曲线（1 ）从－20℃取出1mg/ml BSA，室温融化后，备用。（2） 取18个1.5ml离心管，3个一组，分别标记为0μg，2.5μg，5.0μg，10.0μg，20.0μg，40.0μg。（3 ）按下表在各管中加入各种试剂。0μg2.5μg5.0μg10.0μg20.0μg40.0
蛋白质定量/蛋白质含量的测定(LOWRY法)
实验概要运用LOWRY法测定蛋白质的含量。实验原理Lowry法是双缩脲法和福林酚法的结合与发展，其原理是：蛋白质溶液用碱性铜溶液处理，形成铜-蛋白质的络合盐，再加入酚试剂后，除使肽链中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等显色外，还使双缩脲法中肽键、碱性铜的显色效果更强烈。因此，Lowry法的显色效果比单独使用
【科普】层析法分离蛋白质
蛋白质的分离纯化是一个用亲和层析法对蛋白质分离的过程，分离方法有透析与超滤、凝胶过滤法、离子交换层析法、低温有机溶剂沉淀法等。 原理 介绍层析的概念 所谓层析，就是利用样品中各组成成分的理化性质的差异，使各组分以不同程度分布在固定相和流动相两相中，由于各组分随流动相前进的速率不同，从而把它
蛋白质印迹法分类
Western Blot显色的方法主要有以下几种：i. 放射自显影ii. 底物化学发光ECLiii. 底物荧光ECFiv. 底物DAB呈色现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色，体同水平和实验条件的是用第一种方法，发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行，操作也比较简单，原理
蛋白质印迹法原理
与Southern Blot或Northern Blot杂交方法类似，但Western Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附
凝胶层析法分离蛋白质
原理 介绍层析的概念 所谓层析，就是利用样品中各组成成分的理化性质的差异，使各组分以不同程度分布在固定相和流动相两相中，由于各组分随流动相前进的速率不同，从而把它们分离开来的技术。这些物理特性包括分子的大小、形状、所带电荷、挥发性、溶解性及吸附性质等。层析系统的必要组分有：
凝胶层析法分离蛋白质
一．目的1．了解层析技术的基本原理；2．初步掌握分子筛层析的原理和操作方法。 二．原理 介绍层析的概念 所谓层析，就是利用样品中各组成成分的理化性质的差异，使各组分以不同程度分布在固定相和流动相两相中，由于各组分随流动相前进的速率不同，从而把它们分离开来的技术。这些物理特性包括分子的大小
lowry法测蛋白质原理
lowry法测蛋白质原理如下：实验原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下易被酚类化合物还原而呈蓝色反应。因蛋白质中含有代酚基的酪氨酸，故有此反应。Lowry法最早是由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤，以往在生物化学领域中广泛应用。Lowry法的显色原理是根据双缩脲反应，蛋白质中的肽键在碱性条件下与C
蛋白质沉淀方法盐析法
在蛋白质溶液中加入大量的中性盐以破坏蛋白质的胶体稳定性而使其析出，这种方法称为盐析。常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。各种蛋白质盐析时所需的盐浓度及pH不同，故可用于对混和蛋白质组分的分离。例如用半饱和的硫酸铵来沉淀出血清中的球蛋白，饱和硫酸铵可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉淀出来，盐析沉
lowry法测蛋白质原理
lowry法测蛋白质原理如下：实验原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下易被酚类化合物还原而呈蓝色反应。因蛋白质中含有代酚基的酪氨酸，故有此反应。Lowry法最早是由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤，以往在生物化学领域中广泛应用。Lowry法的显色原理是根据双缩脲反应，蛋白质中的肽键在碱性条件下与C
lowry法测蛋白质原理
lowry法测蛋白质原理如下：实验原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下易被酚类化合物还原而呈蓝色反应。因蛋白质中含有代酚基的酪氨酸，故有此反应。Lowry法最早是由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤，以往在生物化学领域中广泛应用。Lowry法的显色原理是根据双缩脲反应，蛋白质中的肽键在碱性条件下与C
lowry法测蛋白质原理
lowry法测蛋白质原理如下：实验原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下易被酚类化合物还原而呈蓝色反应。因蛋白质中含有代酚基的酪氨酸，故有此反应。Lowry法最早是由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤，以往在生物化学领域中广泛应用。Lowry法的显色原理是根据双缩脲反应，蛋白质中的肽键在碱性条件下与C
蛋白质盐析法的原理
蛋白质颗粒表面带有很多极性基团，如-NH+、-COO-、-CONH2、-OH、-SH等，和水有高度亲和性，当蛋白质与水相遇时，蛋白质吸水，在蛋白质颗粒外面形成一层密度较厚的水膜（水化层）。水膜的存在使蛋白质颗粒之间不会碰撞，因此蛋白质在水溶液中比较稳定而不易沉淀，是一种比较稳定的亲水胶体。蛋白质能形
lowry法测蛋白质原理
lowry法测蛋白质原理如下：实验原理:磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下易被酚类化合物还原而呈蓝色反应。因蛋白质中含有代酚基的酪氨酸，故有此反应。Lowry法最早是由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤，以往在生物化学领域中广泛应用。Lowry法的显色原理是根据双缩脲反应，蛋白质中的肽键在碱性条件下与C
蛋白质多肽Iodogen碘化法
1．原理 用Iodogen为氧化剂，对蛋白质和多肽抗原进行碘化标记，把125I直接引进分子中的酪氨酸残基上。标记过程中被标记样品不与Iodogen混合，标记后取出样品即停止反应，不使用任何还原剂。 2．方法 （1）标记之前，先把Iodogen溶于有机溶剂，涂于管底，并使之干燥。 （2）标记时，
紫外分光光度法－N,N－二甲基乙酰胺的测定
基于 N,N-二甲基乙酰胺（DMAC）的紫外吸收光谱在 190~230nm 区有强吸收，建立一种紫外分光光度法测定 DMAC 含量的方法。在 196nm 处，DMAC 在 0~0.8%（色谱纯 DMAC的1000倍稀释液所占的体积分数）范围内符合比耳定律，其 R2 为 0.9998，实际样品
olin—酚试剂法（lowry法）测蛋白质含量
一、实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难（现在已可以订购），近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生
版纳园等用转基因植物悬浮细胞高效产重组人血清白蛋白
人血清白蛋白(HSA)是一种极为重要的医药蛋白。在临床上，HSA主要用于血液透析、利尿剂抗性浮肿和一些烧伤或者外伤导致的缺血等的治疗。在工业上，HSA主要作为其它医药蛋白质产品的保护剂和载体。HSA的市场需求量大，每年约需要500吨，其市场价值可达15亿美元。由于血浆来源的HSA存在着被病原物（
肽质量检索实验_其他方案
实验材料蛋白样品仪器、耗材质谱仪实验步骤用肽质量数据鉴定蛋白质所控制的实验参数中，最具决定性的参数是肽质量测量的精确度 。质量精确度越高，结果判定越可信。另一决定性参数是所用酶（或化学试剂）的专一性。酶越纯，专一性胞高，检索结果可信。常用的酶是胰蛋内酶。但是要注意的是，即便是高纯度的胰蛋白酶也会在非
蛋白质质谱鉴定技术概述及常见问题
蛋白质（Protein）是生物体中含量最高，功能最重要的生物大分子，存在于所有生物细胞，作为生命的物质基础之一，蛋白质在催化生命体内各种反应进行、调节代谢、抵御外来物质入侵及控制遗传信息等方面都起着至关重要的作用，因此蛋白质也是生命科学中极为重要的研究对象。现代研究结果发现越来越多的多肽同蛋白质一样