普鲁兰酶的特性和应用
普鲁兰酶又称茁霉多糖酶,属解枝酶,分解α-1,6-葡萄糖苷键。嗜热古菌Thermococcus sp. HJ21产胞外高温普鲁兰酶,最适温度95 ℃,酶活力在100 ℃、2 h仍有50%以上活力。通过PCR技术克隆了此酶基因。温泉中厌氧芽胞杆菌属Anoxy bacillus sp. p28克隆到普鲁兰酶基因序列,构建了重组质粒。转化到E. coli中,产物为单一麦芽三糖,为Ⅰ型普鲁兰酶。从腾冲热泉中分离出耐热厌氧芽胞杆菌普鲁兰酶基因导入枯草芽胞杆菌中得到表达。60 ℃、48 h仍保留50%以上活力,胞外酶活力42 U/mL,表达活力提高了40倍。通过基因敲除及重组技术,改造野生芽胞杆菌普鲁兰酶基因,与葡萄糖淀粉酶制成复合酶,可制备出DE值超过96.5的葡萄糖,商品名为High DEX系列,满足了葡萄糖生产,达到国际水平。 ......阅读全文
异淀粉酶的酶学特性
微生物来源的异淀粉酶为诱导型胞外酶。酵母、细菌和某些放线菌均能产生异淀粉酶,但不同来源的异淀粉酶对于底物作用的专一性有所不同,对于各种不同聚合度的支链淀粉具有不同的分解能力。酶作用的最适温度和最适pH环境及金属离子对酶的影响都有差异。一般而言,酵母异淀粉酶最适pH为6~6.8,最适温度为20~25℃
脂肪酶特异折叠酶的作用
目前研究最为广泛的是脂肪酶特异折叠酶(lipase specific foldase,LIFs),此类酶多存在于革兰氏阴性菌中辅助相应的脂肪酶进行二级结构的折叠,通过降低折叠过程中的能障与构象改变为靶蛋白的正确折叠提供必要的空间立体信息而帮助其活性构象的形成。研究证明,脂肪酶在无LIFs存在下可进行
酶的酶活和质量如何评判
NSP(木聚糖,β-葡聚糖,纤维素)的检测方法有三类:1,染色底物显色法,适用于测定饲料中的酶活,主要是内切酶活,楼主介绍的,中国鲜为人知;2,DNS还原糖显色法,适用于测定酶制剂产品中的酶活,外切酶活和内切酶活的混合结果,外切酶活站多数,中国常用;3.黏度法,适宜评估可溶性NSP酶的效果,中国不常
乳酸脱氢酶同工酶测定
乳酸脱氢酶同工酶的测定方法有电泳法、离子交换柱层析法、免疫法、抑制法和酶切法
胰蛋白酶及其系列酶制备
酶是细胞产生的以蛋白质为主要成分的生物催化剂,与化学催化剂相比较,具有作用条件温和、反应专一性强、反应副产物少等优点,因而广泛应用于医药、化工、食品、日化、农业、饲料、环保等领域,应用种类及用量均逐年递增。例如蛋白酶,应用于医药工业中,作为生化药物促进食物蛋白质消化;应用在食品工业中,水解蛋白质成肤
关于凝结酶实验的凝结酶介绍
血浆凝结酶是能使含有肝素等抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质,致病株大多数能产生,是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。传统豆腐加工一般采用盐类凝固剂和酸凝固剂,很少使用酶凝固剂。但盐类凝固剂和酸凝固剂制得的产品存在一些问题,例如用盐卤制作的豆腐具有极佳的风味,但是豆腐持水性差,而且产品放置时间
酶免疫技术抗体的酶标记方法
用于酶免疫技术的酶须具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室温下稳定;反应产物易于显现;能商品化生产。目前酶免疫技术检测中常用的酶为辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)和碱性磷酸酶(AP),其次还有葡萄糖氧化酶、β-半乳糖苷酶、溶菌酶和苹果酸脱氢酶等。由于辣根过氧化
单胺氧化酶同工酶介绍
单胺氧化酶同工酶是一种细胞外酶,以磷酸吡哆醛为辅酶。多分布在肝、肾等组织的线粒体中,其分布肝>心>肾>脑>肺>骨骼肌,血小板和胎盘中也含有MAO,其同工酶有三种,电泳时从阳极到阴极分别是MAO-Ⅰ、MAO-Ⅱ和MAO-Ⅲ,有两个亚单位MAO-A和MAO-B。
生物酶学基础凝固酶简介
凝固酶是实验室鉴定葡萄球菌致病性的重要试验。致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶,一种是与细胞壁结合的凝聚因子,称结合凝固酶,它直接作用于血浆中纤维蛋白质,使发生沉淀,保卫与细菌外面而凝聚成块;另一种凝固酶是分泌至菌体外,成为游离凝固酶,它能使凝血酶原变成凝血酶类产物,使纤维蛋白原变为纤维蛋白,从而使血浆
可以DNA结合的酶聚合酶
聚合酶:聚合酶是从核苷三磷酸合成多核苷酸链的酶。它们通过向链上存在的先前核苷酸的3'-OH添加核苷酸起作用。因此,所有聚合酶都以5' - 3'方向起作用。DNA复制需要DNA依赖的DNA聚合酶,实现DNA序列的完美拷贝。有些DNA聚合酶具有校对功能,能够检测含氮碱基之间的错配
生物酶学基础固定化酶
在合成工艺性化过程中,固定化酶在可操作性和经济性两方面都具备巨大的优势。 除了使用方便,固定化酶拥有分离简单和可重复使用两大最主要的优点。反应完毕可以通过过滤等常规手段与产品分离,大大降低产品的下游处理成本,而且可以高效应用于各种类型的反应器,实现生产连续化和自动化,提升反应效率。另外,固定化酶的可
人ATP酶(ATPase)酶联免疫分析
人ATP酶(ATPase)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中ATP酶(ATPase)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人ATP酶(ATPase)水平。用纯化的人ATP酶(ATPase)抗体包被微孔板,
链酶蛋白酶的配制方法
自消化可消除DNA酶和RNA酶的污染,经自消化的链酶蛋白酶的配制方法如下:把该酶的粉末溶解于10mmol./l Tris?HCl(pH7.5)、10mmol/l NaCl中,配成20mg/ml浓度,于37℃温育1h。经消化的链霉蛋白酶分装成小份放在密封试管中,保存-20℃。
植酸酶的酶学性质介绍
和其他酶类一样,植酸酶活力受温度、环境pH、激活剂、抑制剂、作用时间、底物及产物浓度等多种因素的影响。根据最适pH值的不同,Oh等(2004)将植酸酶(磷酸酯酶)分为两个亚类:酸性植酸酶和碱性植酸酶。饲料工业中常用的是酸性植酸酶(也称作组氨酸酸性植酸酶)。这种植酸酶催化活性较强,有最适的酸性pH值(
植酸酶的酶学性质研究
植酸酶是催化植酸及其盐类水解成肌醇和磷酸的一类酶的总称[1]。添加植酸酶能够显著提高植物性饲料中磷的利用率,减少饲料中无机磷的添加量以及动物粪便中无机磷的排出,降低植酸磷的抗营养作用,促进动物生长发育,减轻环境的磷污染,提高畜牧生产和生态效益[2]。随着饲料工业的发展,植酸酶作为一种新型的饲料添加剂
固定化酶固定化酶与水溶性酶相比的优缺点
优点:①固定化酶可重复使用,使酶的使用效率提高、使用成本降低。②固定化酶极易与反应体系分离,简化了提纯工艺,而且产品收率高、质量好。③在多数情况下,酶经固定化后稳定性得到提高。④固定化酶的催化反应过程更易控制。⑤固定化酶具有一定的机械强度,可以用搅拌或装柱的方式作用于底物溶液,便于酶催化反应的连续化
酶免疫技术中酶和酶作用底物是怎么样的呢?
酶和酶作用底物 (一)酶的要求: 一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ~10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合: 1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。 2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量,方法简单易行、敏感和重复性好。 3.作用专一性强 ,酶活性不受样品
双酶切反应酶活性分析及双酶切建议缓冲液
同步双酶切是一种省时省力的常用方法。选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。NEB每一种酶都随酶提供相应的最佳 NEBuffer,以保证100%的酶活性。NEBuffer的组成及内切酶在不同缓冲液中的活性见《内切酶在不同缓冲液里的活性表》及每支酶的说明书。能在最大程度上保证两种酶活性
蛋白酶的按酶的来源分类
按酶的来源可以分为动物蛋白酶、植物蛋白酶、微生物蛋白酶。
酶与酶技术的开发与应用
现代研究表明,酶与酶技术与环境保护的关系十分密切。表现在三个方面。第一,在产品加工过程中用酶来替代化学品(为生物过程代替化学过程反应温和)可以降低生产活动中的污染水平,有利于实现工艺过程生态化或无废生产,真正实现清洁生产的目标;第二,酶作为生物催化剂,只对产品内容起作用,使产品在过程中产生的污染大大
可以DNA结合的酶DNA连接酶
DNA连接酶:是能够使用来自ATP或NAD的化学能将先前切割或断裂的DNA链聚集在一起的酶。连接酶在DNA滞后链复制中特别重要,因为它们将冈崎碎片组合成DNA链。连接酶在DNA修复和基因重组中也发挥重要作用。
有关固定化酶技术酶的定向介绍
1、共价固定法 选择性地利用酶分子表面远离活性位点的特定稀有基团(如巯基) 进行反应,使该基团与载体上另一基团共价交联来固定酶蛋白,使其活性中心朝向溶液方向,以达到控制其空间取向的目的。 2、氨基酸置换法 利用基因定点突变技术在蛋白质分子表面合适位置置换一个氨基酸分子,通过该氨基酸残基特殊
大鼠5α还原酶Ⅱ酶联免疫分析
大鼠5α-还原酶Ⅱ酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中5α-还原酶Ⅱ的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠5α-还原酶Ⅱ水平。用纯化的大鼠5α-还原酶Ⅱ抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单
纤维素酶(抛光酶)的特性
☆酸性纤维素酶:对棉纤维作用力最强,可以在较短时间达到效果;对织物强力损伤大,而且容易引起反沾色; ☆中性纤维素酶:对棉纤维的作用比酸性纤维素弱,达到同等的效果需要较长的时间或较高的酶浓度进行处理;对织物损伤小;如果工艺处置恰当,可以很少、甚至没有返色。
免疫酶技术中常用的酶底物系统
各种免疫酶技术,最终都是以某种显色反应而揭示待测物质来进行定性和定量分析。不同酶要选择相应的底物,见下表。免疫酶技术中常用的酶-底物系统酶底物显色反应测定波长/nm辣根过氧化物酶二氨基联苯胺深褐色沉淀5-氨基水杨酸棕色449邻苯二胺橘红色492/460邻联甲苯胺蓝色4254-硝基酚磷酸黄色400碱性
糖化酶和淀粉酶的区别
糖化酶糖化酶又称葡萄糖淀粉酶,糖化酶是一种习惯上的名称,学名为α-1,4-葡萄糖水解酶(α-1,4-Glucan glucohydrolace)。本品应用于酒精、淀粉糖、味精、抗菌素、柠檬酸、啤酒等工业以及白酒、黄酒。曲酒等其它酿造工业,本品质量稳定,使用方便,利于连续糖化,提高产品质量,降低成本。
亚硝酸还原酶的酶活性测定
NiRs是胞内酶,其氧化还原反应过程中需要供体电子,且大多需要在厌氧条件下进行。因此体外检测亚硝酸还原酶时需要在密闭无氧且有电子供体的情况下才能进行检测。电子供体有甲基紫精、连二亚硫酸钠和硫代硫酸钠等 。
关于工具酶的连接酶的介绍
它是一种封闭DNA链上缺口酶,借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA链的5'-PO4与另一DNA链的3'-OH生成磷酸二酯键。但这两条链必须是与同一条互补链配对结合的(T4DNA连接酶除外),而且必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接酶催化成磷酸二酯键。 连接酶有T4噬菌体
木瓜蛋白酶的酶活测定
基本原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。酶活单位在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。试液制备1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.42g,加10mmol/LE