普鲁兰酶的特性和应用

普鲁兰酶又称茁霉多糖酶,属解枝酶,分解α-1,6-葡萄糖苷键。嗜热古菌Thermococcus sp. HJ21产胞外高温普鲁兰酶,最适温度95 ℃,酶活力在100 ℃、2 h仍有50%以上活力。通过PCR技术克隆了此酶基因。温泉中厌氧芽胞杆菌属Anoxy bacillus sp. p28克隆到普鲁兰酶基因序列,构建了重组质粒。转化到E. coli中,产物为单一麦芽三糖,为Ⅰ型普鲁兰酶。从腾冲热泉中分离出耐热厌氧芽胞杆菌普鲁兰酶基因导入枯草芽胞杆菌中得到表达。60 ℃、48 h仍保留50%以上活力,胞外酶活力42 U/mL,表达活力提高了40倍。通过基因敲除及重组技术,改造野生芽胞杆菌普鲁兰酶基因,与葡萄糖淀粉酶制成复合酶,可制备出DE值超过96.5的葡萄糖,商品名为High DEX系列,满足了葡萄糖生产,达到国际水平。 ......阅读全文

蛋白酶的按酶的来源分类

按酶的来源可以分为动物蛋白酶、植物蛋白酶、微生物蛋白酶。

什么是酶?酶的作用是什么?

酶(enzyme)是由活细胞产生的、对其底物具有高度特异性和高度催化效能的蛋白质或RNA。酶是一类极为重要的生物催化剂(biocatalyst)。由于酶的作用,生物体内的化学反应在极为温和的条件下也能高效和特异地进行。 酶的催化作用有赖于酶分子的一级结构及空间结构的完整。若酶分子变性或亚基解聚均可导

纤维素酶(抛光酶)的特性

  ☆酸性纤维素酶:对棉纤维作用力最强,可以在较短时间达到效果;对织物强力损伤大,而且容易引起反沾色;  ☆中性纤维素酶:对棉纤维的作用比酸性纤维素弱,达到同等的效果需要较长的时间或较高的酶浓度进行处理;对织物损伤小;如果工艺处置恰当,可以很少、甚至没有返色。

淀粉酶同工酶检测的意义

同工酶的测定有助于疾病的鉴别诊断。P-同工酶升高或降低时,说明可能有胰腺疾患;S-同工酶的变化可能是源于唾液腺或其他组织。当血清淀粉酶活性升高而又诊断不清时,应进一步测定同工酶以助鉴别诊断。琼脂糖和醋纤膜电泳法是比较常用的测定同工酶方法。

木瓜蛋白酶的酶活测定

基本原理木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。酶活单位在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。试液制备1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐1.42g,加10mmol/LE

中性植酸酶的酶学性质研究

植酸酶是催化植酸及其盐类水解成肌醇和磷酸的一类酶的总称[1]。添加植酸酶能够显著提高植物性饲料中磷的利用率,减少饲料中无机磷的添加量以及动物粪便中无机磷的排出,降低植酸磷的抗营养作用,促进动物生长发育,减轻环境的磷污染,提高畜牧生产和生态效益[2]。随着饲料工业的发展,植酸酶作为一种新型的饲料添加剂

什么是工具酶呢?工具酶都有哪些?

作为试剂用于测定化合物浓度或酶活力的酶称为工具酶。对于底物或产物不能直接测定或难于准确测定的酶促反应,采用酶耦联法测定。1.NAD(P)十或NAD(P)H偶联的脱氢酶及其指示反应。2.偶联H2O2的工具酶及其指示反应有些酶作用于底物时,可使其氧化产生H2O2,在POD的作用下使色素原氧化显色进行测定

亚硝酸还原酶的酶活性测定

NiRs是胞内酶,其氧化还原反应过程中需要供体电子,且大多需要在厌氧条件下进行。因此体外检测亚硝酸还原酶时需要在密闭无氧且有电子供体的情况下才能进行检测。电子供体有甲基紫精、连二亚硫酸钠和硫代硫酸钠等 。

大鼠5α还原酶Ⅱ酶联免疫分析

大鼠5α-还原酶Ⅱ酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中5α-还原酶Ⅱ的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠5α-还原酶Ⅱ水平。用纯化的大鼠5α-还原酶Ⅱ抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单

生物酶学基础同工酶简介

概述  同工酶 (isozyme,isoenzyme)广义是指生物体内催化相同反应而分子结构不同的酶。按照国际生化联合会(IUB)所属生化命名委员会(CBN)的建议,则只把其中因编码基因不同而产生的多种分子结构的酶称为同工酶。最典型的同工酶是乳酸脱氢酶(LDH)同工酶,用电泳方法将LDH同工酶分离,

木瓜蛋白酶的酶活测定

  一、基本原理  木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。  酶活单位  在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。  二、试液制备  1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐

糖化酶和淀粉酶的区别

糖化酶糖化酶又称葡萄糖淀粉酶,糖化酶是一种习惯上的名称,学名为α-1,4-葡萄糖水解酶(α-1,4-Glucan glucohydrolace)。本品应用于酒精、淀粉糖、味精、抗菌素、柠檬酸、啤酒等工业以及白酒、黄酒。曲酒等其它酿造工业,本品质量稳定,使用方便,利于连续糖化,提高产品质量,降低成本。

β淀粉酶与α淀粉酶的区别

β-淀粉酶与α-淀粉酶的不同点在于从非还原性末端逐次以麦芽糖为单位切断α-1,4-葡聚糖链。主要见于高等植物中(大麦、小麦、甘薯、大豆等),但也有报告在细菌、牛乳、霉菌中存在。对于象直链淀粉那样没有分支的底物能完全分解得到麦芽糖和少量的葡萄糖。作用于支链淀粉或葡聚糖的时候,切断至α-1,6-键的前面

生物酶学基础糖化酶简介

概述:糖化酶是由曲霉优良菌种(Aspergilusniger)经深层发酵 提炼而成。糖化酶,又称葡萄糖淀粉酶[Glucoamylase,(EC.3.2.1.3.)]它能把淀粉从非还原性未端水介a-1.4葡萄糖苷键产生葡 萄糖,也能缓慢水解a-1.6葡萄糖苷键,转化为葡萄糖。本产品广泛用于生产白酒、黄

β葡萄糖苷酶的酶学性质

不同来源的β-葡萄糖苷酶在氨基酸序列、分子量、比活力、等电点、最适反应pH值、pH值稳定性范围、最适反应温度和热稳定性范围上均有很大差别(见表1)。3.1 β-葡萄糖苷酶的分子量大小β-葡萄糖苷酶由于其来源不同,它们的相对分子量也可能不同,而且它们的结构和组成也有很大差异。β-葡萄糖苷酶的相对分子量

糖化酶和淀粉酶的区别

糖化酶糖化酶又称葡萄糖淀粉酶,糖化酶是一种习惯上的名称,学名为α-1,4-葡萄糖水解酶(α-1,4-Glucan glucohydrolace)。本品应用于酒精、淀粉糖、味精、抗菌素、柠檬酸、啤酒等工业以及白酒、黄酒。曲酒等其它酿造工业,本品质量稳定,使用方便,利于连续糖化,提高产品质量,降低成本。

免疫酶技术中常用的酶底物系统

各种免疫酶技术,最终都是以某种显色反应而揭示待测物质来进行定性和定量分析。不同酶要选择相应的底物,见下表。免疫酶技术中常用的酶-底物系统酶底物显色反应测定波长/nm辣根过氧化物酶二氨基联苯胺深褐色沉淀5-氨基水杨酸棕色449邻苯二胺橘红色492/460邻联甲苯胺蓝色4254-硝基酚磷酸黄色400碱性

植酸酶浓度对酶活的影响

反应体系中,酶分子的浓度对测定结果也有重要影响。表1是中性植酸酶酶活测定值与样品稀释倍数的关系。确定酶浓度就是确定酶分子的数量与底物分子数量之间的比例关系,只有二者的比例在一定的范围内,酶分子的活力才能发挥最大的作用。实验发现,酶活随着酶浓度的升高有逐渐降低的趋势,同时,随着酶浓度的升高样品的本底值

环保用酶与酶技术的研究方向

环保用酶与酶技术是国内研究之前沿领域,是一项系统的研究工程。本项目技术开发、主要运用目前国内成熟的酶发酵工艺和提炼工艺生物下游技术。生产低成本、高活性环保用酶和酶固定化载体材料的选取以及酶反应器的生产开发。 本项目开发的重点在于酶与酶技术应用于废水处理的产品开发,将多种适用与废水处理的酶富集于反应器

猪胰蛋白酶酶活力的测定

实验原理胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中,在Ca2+的存在下,被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活,从肽链N端赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开,失去一段六肽,分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶原的分子量约为24000,其等电点约为pH8.9,胰蛋白酶的分子量与其酶原接

DNA聚合酶外切酶活性─校对作用

  外切酶活性──校对作用:这种酶活性的主要功能是从3'→5'方向识别和切除不配对的DNA 生长链末端的核苷酸。当反应体系中没有反应底物dNTP时,由于没有 聚合作用而出现暂时的游离现象,从而被3'→5'外切酶活性所降解。如果提高反应体系的温度可以促进这种作用,这表明

β葡萄糖苷酶的酶学性质

不同来源的β-葡萄糖苷酶在氨基酸序列、分子量、比活力、等电点、最适反应pH值、pH值稳定性范围、最适反应温度和热稳定性范围上均有很大差别(见表1)。1 β-葡萄糖苷酶的分子量大小β-葡萄糖苷酶由于其来源不同,它们的相对分子量也可能不同,而且它们的结构和组成也有很大差异。β-葡萄糖苷酶的相对分子量范围

生物酶学基础酶的催化特性

酶的催化特性酶和一般化学催化剂相比,酶具有下列的共性和特点。1 共性酶与一般催化剂相比,具有下面几个共性:①具有很高的催化效率,但酶本身在反应前后并无变化。酶与一般催化剂一样,用量少,催化效率高;②不改变化学反应的平衡常数。酶对一个正向反应和其逆向反应速度的影响是相同的,即反应的平衡常数在有酶和无酶

乳酸脱氢酶及其同工酶简介

  乳酸脱氢酶(LD)分子量为135~140KD,由两种亚单位组成:H(表示heart)和M(表示muscle)。它们按不同的形式排列组合形成含4个亚基的5种同工酶,即:LD1(H4)、LD2(H3M1)、LD3(H2M2)、LD4(HM3)、LD5(M4)。  LD催化丙酮酸与乳酸之间还原与氧化反

异相酶免疫试验和均相酶免疫试验

  Ag为待测抗原,AgAb-E为结合标记物,Ab-E为游离标记物。若抗原-抗体反应影响标记物中酶的活性,如酶活性消失,即结合标记物(AgAb-E)无酶活性,游离标记物(Ab-E)有酶活性;  (1) 检测时不需分离结合标记物(AgAb-E)和游离标记物(Ab-E),检测体系中标记物酶活性(Ab-E

生物酶学基础酶的化学本质

酶的化学本质酶(enzyme)是由活生命机体产生的具有催化活性的蛋白质,只要不是处于变性状态,无论是在细胞内还是在细胞外,酶都可发挥其催化作用。关于酶是否蛋白质的问题,在20世纪初曾有过争论。1926年萨姆纳(Sumner)首次从刀豆提取液中分离纯化得到脲酶结晶,并证明它具有蛋白质的性质,提出酶的本

生物酶学基础固定化酶简介

固定化酶固定化酶及制备原则固定化酶固定化酶是20世纪50年代开始发展起来的一项新技术,最初是将水溶性酶与不溶性载体结合起来,成为不溶于水的酶的衍生物,所以曾叫过“水不溶酶”(water insoluble enzyme)和“固相酶”(solid phase enzyme)。但是后来发现,也可以将酶包

重组酶聚合酶扩增(RPA)技术简介

核酸检测革命:可替代PCR的犀利技术——RPA重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA

能量运输的关键ATP酶与GTP酶

ATP与ATP酶:ATP酶,又称为三磷酸腺苷酶,是一类能将三磷酸腺苷(ATP)催化水解为二磷酸腺苷(ADP)和磷酸根离子的酶,这是一个释放能量的反应。在大多数情况下,能量可以通过传递而被用于驱动另一个需要能量的化学反应。这一过程被所有已知的生命形式广泛利用。部分ATP酶是内在膜蛋白(Integral

酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于细胞ELISA

应用酶标抗体进行免疫测定的方法较多,非均相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类酶免疫检测技术,其中以酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent aay,ELISA)最常用,它可用于测定抗体,也可测定可溶性抗原及细胞抗原。而酶-抗酶复合物多用于免疫组织化学。以下