普鲁兰酶的特性和应用
普鲁兰酶又称茁霉多糖酶,属解枝酶,分解α-1,6-葡萄糖苷键。嗜热古菌Thermococcus sp. HJ21产胞外高温普鲁兰酶,最适温度95 ℃,酶活力在100 ℃、2 h仍有50%以上活力。通过PCR技术克隆了此酶基因。温泉中厌氧芽胞杆菌属Anoxy bacillus sp. p28克隆到普鲁兰酶基因序列,构建了重组质粒。转化到E. coli中,产物为单一麦芽三糖,为Ⅰ型普鲁兰酶。从腾冲热泉中分离出耐热厌氧芽胞杆菌普鲁兰酶基因导入枯草芽胞杆菌中得到表达。60 ℃、48 h仍保留50%以上活力,胞外酶活力42 U/mL,表达活力提高了40倍。通过基因敲除及重组技术,改造野生芽胞杆菌普鲁兰酶基因,与葡萄糖淀粉酶制成复合酶,可制备出DE值超过96.5的葡萄糖,商品名为High DEX系列,满足了葡萄糖生产,达到国际水平。 ......阅读全文
如何选择合适细胞的消化酶重组胰酶和动物源胰酶
培养细胞的老师们都知道细胞的生命是极其脆弱的在培养过程中有哪些行为是比较伤害细胞的呢?在培养贴壁细胞过程中消化过程在一定程度上是对细胞的一种折磨但是又不得不进行这个过程所以如何做好细胞消化善待细胞们是我们一定要了解的步骤~ 胰酶的作用原理胰酶是一种蛋白酶,酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基
诊断酶学
诊断酶学:本世纪初临床就开始测定体液中的酶来诊断疾病,如Wohlgemuth早在1908年就测定尿液中淀粉酶(AMY)以诊断急性胰腺炎;30年代临床测定碱性磷酸酶(ALP)用于诊断骨骼疾病,随后发现不少肝胆疾病特别在出现梗阻性黄疸时此酶常明显升高。这些酶成为当时临床实验室的常规测定项目,直到60年代
什么是酶?
酶(enzyme)指的是由活细胞产生的、对其底物具有高度特异性和高度催化效能的蛋白质或RNA。
酶切实验
酶切可用于:(1)获得粘性末端进行连接;(2)验证DNA重组是否成功;(3)验证质粒酶切位点是否有效。实验方法原理采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。单酶切操作比较简单,但双酶切如果两种酶所用缓冲液成分不同(主要是盐离子浓度
什么是酶?
酶是一种由活细胞产生的生物催化剂,其本质是蛋白质,在生物的新陈代谢中起着非常重要的作用,它参与生物体几乎所有的化学反应,使新陈代谢有序的进行下去,从而使生命得以延续。
胰酶简介
① 40—55℃时催化淀粉水解作用最大,温度高于55℃,本身遭破坏。②PH值为6.5—7时活性很大;PH值为4时失去活力;PH值为11值活力最大,但极易被破坏。③ 溶液稳定性差,配液后稳定时间为12h。
诊断酶学
本世纪初临床就开始测定体液中的酶来诊断疾病,如Wohlgemuth早在1908年就测定尿液中淀粉酶(AMY)以诊断急性胰腺炎;30年代临床测定碱性磷酸酶(ALP)用于诊断骨骼疾病,随后发现不少肝胆疾病特别在出现梗阻性黄疸时此酶常明显升高。这些酶成为当时临床实验室的常规测定项目,直到60年代ALP仍是
诊断酶学
本世纪初临床就开始测定体液中的酶来诊断疾病,如Wohlgemuth早在1908年就测定尿液中淀粉酶(AMY)以诊断急性胰腺炎;30年代临床测定碱性磷酸酶(ALP)用于诊断骨骼疾病,随后发现不少肝胆疾病特别在出现梗阻性黄疸时此酶常明显升高。这些酶成为当时临床实验室的常规测定项目,直到60年代ALP仍
酶切实验
酶切实验 实验方法原理 采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。单酶切操作比较简单,但
脂酶试验
(1)原理:有些细菌产生脂酶,可分解脂肪成游离的脂肪酸。在培养基中加入维多利亚蓝可与脂肪结合成为无色化合物,如果脂肪被分解,则维多利亚蓝被释放出来,呈现深蓝色。 (2)培养基:含维多利亚蓝的脂酶培养基。 (3)方法:将待检菌接种于含维多利亚蓝的脂酶培养基中,置37℃孵育24h,观察结
酶切实验
实验方法原理 采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。单酶切操作比较简单,但双酶切如果两种酶所用缓冲液成分不同(主要是盐离子浓度不同)或反应温度不同,这时可以采用如下措施解决:1)先用一种酶切,然后乙醇沉淀回收DNA分子后再用另
脂酶试验
脂酶试验是检验技师考试的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。 (1)原理:有的细菌产生脂酶,可分解脂肪成游离的脂肪酸。从而使培养基中与脂肪结合形成无色化合物的维多利亚蓝释放出来,呈现深蓝色。 (2)培养基:脂酶培养基(含维多利亚蓝)。 (3)方法:将被检菌接种于上述培养基中,于37℃培
酶标记抗体
酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前,高质量的酶(
酶的介绍
酶(enzyme)是活细胞内产生的具有高度专一性和催化效率的蛋白质,又称为生物催化剂,生物体在新陈代谢过程中,几乎所有的化学反应都是在酶的催化下进行的。细胞内合成的酶主要是在细胞内起催化作用,也有些酶合成后释入血液或消化道,并在那里发挥其催化作用,人工提取的酶在合适的条件下也可在试管中对其特殊底物起
限制酶特点
限制酶是识别特定的核苷酸序列,并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶。根据酶的功能特性、大小及反应时所需的辅助因子,限制性内切酶可分为两大类,即I类酶和Ⅱ酶。最早从大肠杆菌中发现的EcoK、EcoB就属于I类酶。其分子量较大;反应过程中除需Mg2+外,还需要S-腺苷-L甲硫
游离凝固酶
金黄色葡萄球菌(以下简称金葡菌),在空气、水、土壤等外环境中广泛存在,人和动物的鼻腔、咽喉、皮肤和肠道中金葡菌的携带率也较高。在一定条件下,金葡菌可致人体局部及全身感染并引起中毒性休克,其肠毒素可致食物中毒。 金葡菌的致病因子众多,包括溶血素、肠毒素、凝固酶等。溶血素作为金葡菌的外毒素,是造成
DNA酶切
一、 DNA酶切反应 1、 将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一下,使溶
尿素酶试验
尿素酶试验在鉴别沙门氏菌的时候很重要。This image depicts negative and positive results when testing for bacterial production of urease. The negative tube contains Salm
酶活性单位
1.酶活性单位 20世纪50年代以前通常用惯用单位,即用先报道某种酶测定方法的临床酶学家的姓氏来命名其单位。例如,测定AMY的Somogyi单位,转氨酶的赖氏单位(Reitman-Frankel)等。不仅酶不同,单位不同,即使是同一种酶也因方法不同而可有数种活性单位,参考值差别也很大,给临床
胆酶分离
基本概述什么是“胆酶分离”?具体的说,“胆酶分离”通常是指在肝炎发展过程中,由于肝细胞的大量坏死,对胆红素的处理能力进行性下降,因此出现上升;同时转胺酶由于已经维持相当长时间的高水平,从而进行性耗竭,因此出现ALT下降,转氨酶不高。这种转氨酶现象就是所谓的“胆酶分离”。转氨酶的高低变化对于肝炎病人来
胰激肽原酶
制法要求本品应从检疫合格的猪胰中提取,生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求。本品来源于动物,在生产过程中应采用适宜的病毒灭活工艺等方法进行病毒安全性控制。性状本品为白色或类白色粉末;无臭本品在水中易溶,在乙醇或乙醚中几乎不溶鉴别(1)照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液
酶活性定义
酶活性指的是有机体的生命活动表现了它内部化学反应历程的有序性,这种有序性是受多方面因素调节的,一旦破坏了这种有序性,就会导致代谢紊乱,产生疾病,甚至死亡。酶活力受到调节和控制是区别于一般催化剂的重要特征。
酶解法原理
(1)实验过程中,需要轻摇试管,以使细胞壁与酶充分接触,提高酶解效果.(2)蜗牛以植物为食,所以唾液中含有果胶酶和纤维素酶,I、Ⅱ、Ⅲ没有添加酶溶液为空白对照组.其目的是排除无关变量的干扰.(3)离心后收集沉淀物,并用等渗溶液清洗,目的是保持细胞正常形态.(4)要用低渗涨破法来检验原生质体是否符合要
酯酶染色
酯酶是分解各种酯类的水解酶,根据机制的不同,分为非特异性酯酶和特异性酯酶,非特异性酯酶易水解像acetate和butyrate之类具有短链的酯类,特异性酯酶易水解像naphthol AS‐D cholroaceteta之类的具有长链的酯类。单核‐巨噬细胞类为非特异性酯酶反应染色,中性粒细胞类
凝固酶试验
(1)原理:凝固酶试验是鉴定葡萄球菌致病性的重要试验。致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶,一种是与细胞壁结合的凝聚因子,称结合凝固酶,它直接作用于血浆中纤维蛋白原,使其变为纤维蛋白,发生凝集,包围于细菌外面而凝聚成块,可用玻片法测出;另一种凝固酶是分泌至菌体外,称为游离凝固酶,它能使凝血酶原变成凝血
尿素酶试验
尿素酶试验在鉴别沙门氏菌的时候很重要。This image depicts negative and positive results when testing for bacterial production of urease. The negative tube contains Salm
酶及其作用
酶是一种由活细胞产生的生化反应的蛋白质催化剂,在动物体内消化与新陈代谢过程中起着非常重要的作用。生物体内生化代谢途径中的酶可分为氧化还原酶类、转移酶类、水解酶类、裂合酶类、异构酶类和合成酶类共6类。工业上应用的酶制剂大多数为水解酶,按作用底物的不同,可分为淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、果胶酶、木聚糖酶、β
DNA酶切
一、 DNA酶切反应 1、 将清洁干燥并经灭菌的eppendorf管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA 1μg和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一下,使溶液集中在
精练酶简介
CIO精练酶是利用生物技术代替高温强碱处理工艺的高科技环保产品,前处理过程不用碱,前处理后的废水色度浅,PH值近中性,COD值与传统处理工艺相比显著降低,可减轻对环境的污染。【化学组成】生物酶制剂【性状】外 观: 棕色液体离子性: 非离子P H 值: 中性(1%水溶液)【产品特性】1.用于天然纤维及
DNA酶试验
DNA酶试验是检验技师考试的内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。(1)原理:某些细菌产生DNA酶,可使长链DNA水解成寡核苷酸链。因为长链DNA可被酸沉淀,寡核苷酸链则溶于酸,所以当在菌落平板上加入酸后,会在菌落周围出现透明环。(2)培养基:0.2%DNA琼脂平板。(3)方法:将被检菌点种于