日本发明利用电分离筛选iPS、ES细胞的新技术

据日本媒体报道,庆应义塾大学宫田昌悟副教授带领的研究小组利用给细胞加电压时其反应各异的特点,发明了可以从饲养层细胞中简单分离出所需的ES细胞和iPS细胞的新技术。与以往胰蛋白酶分离办法相比,该技术具有操作简单,并且不会伤害细胞的优点。 研究人员预先在长10毫米、宽5毫米的电路板上布排50根20微米的透明电极,然后将含有细胞的培养液洒到电路板上,再给其施加10万赫兹的交流电压,由于各类细胞的反应不同,ES细胞等就可以被回收到指定容器,而电路板上只留下了饲养细胞。在1毫升培养液中含有大约1000万个细胞的情况下,利用此装置分离细胞,大概需要15-20分钟就可以完成。虽然此方法与以往“酶”分离方法相比,时间没有太多变化,但由于操作简单,不受操作技术是否熟练的影响,即便初学者也可以很稳定地完成细胞分离工作。试验证实该技术目前的分离率为95%,研究人员称今后将继续提高分离率。据有关方面称,此项技术的发现可以提高大量获取......阅读全文

日本发明利用电分离筛选iPS、ES细胞的新技术

  据日本媒体报道,庆应义塾大学宫田昌悟副教授带领的研究小组利用给细胞加电压时其反应各异的特点,发明了可以从饲养层细胞中简单分离出所需的ES细胞和iPS细胞的新技术。与以往胰蛋白酶分离办法相比,该技术具有操作简单,并且不会伤害细胞的优点。   研究人员预先在长10毫米、宽5毫米的电路板上

芯片等电聚焦分离

芯片等电聚焦分离蛋白质的原理与常规毛细管等电聚焦基本相同,都是依据蛋白质的等电点(pI)不同而进行分离。Hofmann等首次将毛细管等应用于蛋白质分析。Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采用等电聚焦模式分离厂牛血清白蛋白和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)。Das等。26 3采用高聚物芯片,

细胞人工纯化的电烙筛选法

  在贴壁细胞转化时,往往在培养瓶的细胞层中会出现分散的转化灶,转化灶区域细胞密集、排列规则,有明显生长趋势,与周边未能转化的细胞有明显的区域界限,此时即可用机械刮除法去除未转化细胞,也可用电烙筛选法烫死未转化细胞而保留转化灶细胞。其方法如下:  (1)倒去旧液,并用记号笔划出转化灶的区域。  (2

电烙筛选法纯化的方法介绍

在贴壁细胞转化时,往往在培养瓶的细胞层中会出现分散的转化灶,转化灶区域细胞密集、排列规则,有明显生长趋势,与周边未能转化的细胞有明显的区域界限,此时即可用机械刮除法去除未转化细胞,也可用电烙筛选法烫死未转化细胞而保留转化灶细胞。其方法如下:(1)倒去旧液,并用记号笔划出转化灶的区域。(2)用加热的微

杂交瘤细胞怎么筛选分离方法

第一次用加入氨基蝶呤的选择培养基选择出融合正确的杂交瘤细胞第二次用抗原抗体反应选择出可以产生抗体的杂交瘤细胞。

日本从人类iPS细胞中分离肺泡上皮细胞

  据2014年8月22日《日刊工业新闻》报道,日本京都大学大学院医学研究科三岛理晃教授的研究小组与京都大学iPS细胞研究所的长船健二副教授、京都大学的小川诚司教授等共同从人类iPS细胞(人工多能性干细胞)中成功分离出肺泡上皮细胞。这一研究成果对于肺的再生研究、呼吸器官疑难病症的治疗以及相关新药研发

关于溶藻细菌的筛选与分离介绍

  溶藻细菌筛选主要有两种方法:一是利用液体感染的方法进行分离;另一种是利用固体感染的方法进行分离。国内外溶藻细菌一般分离自因富营养化而发生水华或赤潮的湖泊及海洋,大多为革兰氏阴性菌。由于溶藻细菌在自然水体中存在的比率比较低,故采用传统的方法需要浓缩大量水样,耗时长且很难获得理想溶藻细菌,与将来工程

国内优势菌群的分离筛选研究现状

我国主要从事发酵肉制品中优势菌群研究的有:徐静等从自然发酵肉制品筛选出一株干酪乳杆菌并对其特性进行研究;王海燕等从传统湖南腊肉中分离筛选出一株产香葡萄球菌(模仿葡萄球菌);李宗军等从侗族传统酸肉中分离筛选葡萄球菌,发现其优势菌群为腐生葡萄球菌、木糖葡萄球菌和肉葡萄球菌;罗欣从混合发酵剂中分离出几株乳

新方法可分离精确突变的罕见人体iPS细胞

  《自然—方法学》上的一篇文章介绍了一种经过精确突变设计的罕见人体诱导多能干细胞(iPS)的分离手段。该手段可实现含有精确疾病突变或者突变逆转的人体iPS细胞系的简单生成,从而帮助我们更好了解疾病的遗传学基本原理。   统计显示,大量的基因组突变都与人类疾病有着联系,科学家迫切需要找到方法通过实

等电点聚焦分离蛋白质实验

等电点聚焦             实验方法原理 等电点聚集(IEF) 分离可以通过 CE 轻易地达到,这也是选择随后用于蛋白质分离的缓冲液系统的有效的第一步。蛋白质和多肽是两性

等电点聚焦分离蛋白质实验

实验方法原理 等电点聚集(IEF) 分离可以通过 CE 轻易地达到,这也是选择随后用于蛋白质分离的缓冲液系统的有效的第一步。蛋白质和多肽是两性的,因此它们的电荷由周围的载体缓冲液决定。当蛋白质或多肽处于电场中,它移动到一个区域,这里周围的 pH 等于其等电点(pI)。在包被的毛细管柱内可

等电点聚焦分离蛋白质实验

蛋白质可以在包被或非包被的毛细管柱分离,分离方案的选择取决于靶蛋白的特异属性。最重要的属性就是pl,这由一般的凝胶电泳或CE决定。等电点聚焦分离是CE分离的一种。实验方法原理等电点聚集(IEF) 分离可以通过 CE 轻易地达到,这也是选择随后用于蛋白质分离的缓冲液系统的有效的第一步。蛋白质和多肽是两

工业微生物产生菌的分离筛选(3)

第三节   微生物的分离经富集培养以后的样品,目的微生物得到增殖,占了优势,其他种类的微生物在数量上相对减少,但并未死亡。富集后的培养液中仍然有多种微生物混杂在一起,即使占了优势的一类微生物中,也并非纯种。例如同样一群以油脂为碳源的脂肪酶产生菌,有的是细菌,有的是霉菌,有的是芽孢杆菌,有的不产芽孢,

工业微生物产生菌的分离筛选(一)

  菌株分离(separation)就是将一个混杂着各种微生物的样品通过分离技术区分开,并按照实际要求和菌株的特性采取迅速、准确、有效的方法对他们进行分离、筛选,进而得到所需微生物的过程.菌株分离、筛选(screening)虽为两个环节,但却不能绝然分开,因为分离中的一些措施本身就具有筛选作用.

工业微生物产生菌的分离筛选(二)

    富集(enrichment)培养是在目的微生物含量较少时,根据微生物的生理特点,设计一种选择性培养基,创造有利的生长条件,使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖,数量增加,由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种,以利分离到所需要的菌株.富集培养主要根据微生物的碳、氮源、pH、温

工业微生物产生菌的分离筛选(三)

经富集培养以后的样品,目的微生物得到增殖,占了优势,其他种类的微生物在数量上相对减少,但并未死亡.富集后的培养液中仍然有多种微生物混杂在一起,即使占了优势的一类微生物中,也并非纯种.例如同样一群以油脂为碳源的脂肪酶产生菌,有的是细菌,有的是霉菌,有的是芽孢杆菌,有的不产芽孢,有的生产能力强,有的生产

工业微生物产生菌的分离筛选(四)

各种微生物对营养要求和培养条件是不同的,在分离筛选时若在这两个方面加以调节控制,就能获得更好的分离效果. 1. 培养基的营养成分    各种微生物对碳源、氮源要求各异,有的对营养还有特殊的要求,事先了解被分离微生物的营养要求,从而设计一个合理快速的分离培养基,能够收到事半功倍的效果.放线菌是生产抗生

工业微生物产生菌的分离筛选(一)

菌株分离(separation)就是将一个混杂着各种微生物的样品通过分离技术区分开,并按照实际要求和菌株的特性采取迅速、准确、有效的方法对他们进行分离、筛选,进而得到所需微生物的过程.菌株分离、筛选(screening)虽为两个环节,但却不能绝然分开,因为分离中的一些措施本身就具有筛选作用.工业微生

工业微生物产生菌的分离筛选(二)

富集(enrichment)培养是在目的微生物含量较少时,根据微生物的生理特点,设计一种选择性培养基,创造有利的生长条件,使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖,数量增加,由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种,以利分离到所需要的菌株.富集培养主要根据微生物的碳、氮源、pH、温度、需氧等生

工业微生物产生菌的分离筛选(三)

经富集培养以后的样品,目的微生物得到增殖,占了优势,其他种类的微生物在数量上相对减少,但并未死亡.富集后的培养液中仍然有多种微生物混杂在一起,即使占了优势的一类微生物中,也并非纯种.例如同样一群以油脂为碳源的脂肪酶产生菌,有的是细菌,有的是霉菌,有的是芽孢杆菌,有的不产芽孢,有的生产能力强,有的生产

工业微生物产生菌的分离筛选(四)

各种微生物对营养要求和培养条件是不同的,在分离筛选时若在这两个方面加以调节控制,就能获得更好的分离效果.1. 培养基的营养成分各种微生物对碳源、氮源要求各异,有的对营养还有特殊的要求,事先了解被分离微生物的营养要求,从而设计一个合理快速的分离培养基,能够收到事半功倍的效果.放线菌是生产抗生素和酶制剂

工业微生物产生菌的分离筛选(4)

 二、通过控制培养和培养条件进行分离各种微生物对营养要求和培养条件是不同的,在分离筛选时若在这两个方面加以调节控制,就能获得更好的分离效果。1.培养基的营养成分各种微生物对碳源、氮源要求各异,有的对营养还有特殊的要求,事先了解被分离微生物的营养要求,从而设计一个合理快速的分离培养基,能够收到事半功倍

工业微生物产生菌的分离筛选(3)

第三节   微生物的分离经富集培养以后的样品,目的微生物得到增殖,占了优势,其他种类的微生物在数量上相对减少,但并未死亡。富集后的培养液中仍然有多种微生物混杂在一起,即使占了优势的一类微生物中,也并非纯种。例如同样一群以油脂为碳源的脂肪酶产生菌,有的是细菌,有的是霉菌,有的是芽孢杆菌,有的不产芽孢,

工业微生物产生菌的分离筛选(2)

第二节   含微生物样品的富集培养富集(enrichment)培养是在目的微生物含量较少时,根据微生物的生理特点,设计一种选择性培养基,创造有利的生长条件,使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖,数量增加,由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种,以利分离到所需要的菌株。富集培养主要根据微生

工业微生物产生菌的分离筛选(1

菌株分离(separation)就是将一个混杂着各种微生物的样品通过分离技术区分开,并按照实际要求和菌株的特性采取迅速、准确、有效的方法对他们进行分离、筛选,进而得到所需微生物的过程。菌株分离、筛选(screening)虽为两个环节,但却不能绝然分开,因为分离中的一些措施本身就具有筛选作用。工业微生

工业微生物产生菌的分离筛选(4)

 二、通过控制培养和培养条件进行分离各种微生物对营养要求和培养条件是不同的,在分离筛选时若在这两个方面加以调节控制,就能获得更好的分离效果。1.培养基的营养成分各种微生物对碳源、氮源要求各异,有的对营养还有特殊的要求,事先了解被分离微生物的营养要求,从而设计一个合理快速的分离培养基,能够收到事半功倍

工业微生物产生菌的分离筛选(2)

第二节   含微生物样品的富集培养富集(enrichment)培养是在目的微生物含量较少时,根据微生物的生理特点,设计一种选择性培养基,创造有利的生长条件,使目的微生物在最适的环境下迅速地生长繁殖,数量增加,由原来自然条件下的劣势种变成人工环境下的优势种,以利分离到所需要的菌株。富集培养主要根据微生

工业微生物产生菌的分离筛选(1)

菌株分离(separation)就是将一个混杂着各种微生物的样品通过分离技术区分开,并按照实际要求和菌株的特性采取迅速、准确、有效的方法对他们进行分离、筛选,进而得到所需微生物的过程。菌株分离、筛选(screening)虽为两个环节,但却不能绝然分开,因为分离中的一些措施本身就具有筛选作用。工业微生

等电聚焦电泳(IEF)分离蛋白及测定蛋白质等电点

一、原理等电点聚焦(IEF)是在电场中分离蛋白质技术的一个重要发展,等电聚焦是在稳定的pH梯度中按等电点的不同分离两性大分子的平衡电泳方法。在电场中充有两性载体和抗对流介质,当加上电场后,由于两性载体移动的结果,在两极间逐步建立稳定的pH梯度,当蛋白质分子或其他两性分子存在于这样的pH梯度中时,这种

生物分子的等电点沉淀分离法

 等电点沉淀分离法是利用两性电解质在等电点时溶解度zui小的性质,不同的两性电解质其等电点不同,其在电中性时溶解度不同,可用于某些两性电解质的分离,如氨基酸、蛋白质和核苷酸等生物分子。为了增加沉淀效果,往往在等电点时再加上其它沉淀因素。等电点沉淀分离法一般不单独使用,常与盐析分离法、有机溶剂沉淀分离