关于蛋白表达系统—昆虫表达系统的介绍

昆虫表达系统是一类应用广泛的真核表达系统,它具有同大多数高等真核生物相似的翻译后修饰加工以及转移外源蛋白的能力。昆虫杆状病毒表达系统是国内外十分推崇的真核表达系统。利用杆状病毒结构基因中多角体蛋白的强启动子构建的表达载体,可使很多真核目的基因得到有效甚至高水平的表达。它具有真核表达系统的翻译后加工功能,如二硫键的形成、糖基化及磷酸化等,使重组蛋白在结构和功能上更接近天然蛋白;其最高表达量可达昆虫细胞蛋白总量的50%;可表达非常大的外源性基因(一200kD);具有在同一个感染昆虫细胞内同时表达多个外源基因的能力;对脊椎动物是安全的。由于病毒多角体蛋白在病毒总蛋白中的含量非常高,至今已有很多外源基因在此蛋白的强大启动子作用下获得高效表达。常用的杆状病毒包括苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcNPV)和家蚕型多角体病毒(BmNPV),常用的宿主细胞则来源于草地夜蛾Sf9细胞,用于表达外源基因的质粒来源于PUC系列,其含有一个多克隆位点......阅读全文

关于蛋白表达系统—昆虫表达系统的介绍

  昆虫表达系统是一类应用广泛的真核表达系统,它具有同大多数高等真核生物相似的翻译后修饰加工以及转移外源蛋白的能力。昆虫杆状病毒表达系统是国内外十分推崇的真核表达系统。利用杆状病毒结构基因中多角体蛋白的强启动子构建的表达载体,可使很多真核目的基因得到有效甚至高水平的表达。它具有真核表达系统的翻译后加

杆状病毒昆虫细胞表达系统

实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成

杆状病毒昆虫细胞表达系统

实验步骤一、杆状病毒表达载体最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成,其位于病毒基因组多角体座位,替代了非必需的野生型多角体基因。在实验室中

杆状病毒昆虫细胞表达系统3

七、杆状病毒表达载体的新一代昆虫细胞宿主最早的鳞翅类昆虫细胞的遗传转化技术出现在1990年(Jarvisetal.,1990)。那时,研发该技术的初衷在于构建一个稳定转化的昆虫细胞系,它旨在能够持续生产目标重组蛋白而无需使用杆状病毒进行感染。然而, 构建这个生产用细胞系所用的载体及方法也为构建具有新

杆状病毒昆虫细胞表达系统2

五、亲代杆状病毒基因组的改进就像转移质粒的改进,对亲代杆状病毒基因组的改进也是为了满足各种不同的需要。起初,最主要的目的是找到克服重组杆状病毒载体构建和分离低效率的方法,这也是最初的杆状病毒-昆虫细胞系统存在的主要问题。现在已经知道这个问题的根源在于, 在共转染的昆虫细胞系中,转移质粒和亲代杆状病毒

赛默飞首推成分明确的昆虫蛋白表达系统

  昆虫细胞表达系统因流程简单,可在短时间内制备大量翻译后修饰的蛋白,而被广泛应用于疫苗开发等领域。然而,某些不确定的培养基成分(如酵母提取物)使得各个实验难以获得一致的结果。这些因素可能会明显拖延疫苗开发的进度。  为此,赛默飞世尔科技近日宣布推出第一款化学成分明确的昆虫蛋白表达系统-Gibco

昆虫求偶也“送礼”

两性冲突普遍存在于昆虫的繁殖行为中,蝎蛉也不例外。海南大学、首都师范大学团队依据已知化石和现生样本中雄性蝎蛉形态比对,针对腹部生殖和非生殖结构差异,推测其交配模式的演化存在献礼、强制交配两个明显趋势。4月6日,研究成果《性冲突:成功交配的新途径》发表在国际期刊eLife上。 长翅目昆虫俗称蝎蛉,

昆虫细胞转染实验

实验材料昆虫细胞试剂、试剂盒胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤1.  接种2x106个Sf9细胞于60 mm 培养皿,在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养,于27℃培养30~60 min,让细胞贴壁。2.  相应于毎一待转染的培养皿,吸取40 ul 无菌

昆虫细胞的扩增

实验方法原理用机械法从细胞单层分离细胞,在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。实验材料Sf9细胞二甲基亚砜Pluronic F68试剂、试剂盒生长培养液仪器、耗材培养瓶旋转培养瓶和磁力搅拌器27°C培养箱实验步骤常规维持培养1. 通过刮取法或用培养液冲洗细胞(( ATCC # CRL-171

昆虫细胞转染实验

基本方案             实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒

昆虫细胞转染实验

基本方案             实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒

昆虫细胞的扩增

实验方法原理 用机械法从细胞单层分离细胞,在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。实验材料 Sf9细胞二甲基亚砜Pluronic F68试剂、试剂盒 生长培养液仪器、耗材 培养瓶旋转培养瓶和磁力搅拌器27°C培养箱实验步骤 常规维持培养1. 通过刮取法或用培养液冲洗细胞(( ATCC # CR

昆虫细胞的扩增

            实验方法原理 用机械法从细胞单层分离细胞,在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。 实验材料 Sf9细胞 二甲基亚砜

昆虫细胞转染实验

实验材料 昆虫细胞试剂、试剂盒 胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材 培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤 1.  接种2×106个Sf9细胞于60 mm 培养皿,在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养,于27℃培养30~60 min,让细胞贴壁。2.  相应于毎一待转染的培养皿,吸取40

昆虫卵巢解剖

实验概要本实验拟在掌握昆虫卵巢解剖的方法。昆虫的生殖系统是繁衍种族所必需的。由于雌雄生殖腺的发育特点不同,在许多昆虫成虫期只有雌虫仍继续发育,因而一般也只有雌的生殖腺发育被广泛应用。通过对昆虫的生殖生物学的研究,剖析雌性生殖系统的发育进度,对害虫预报具有一定的意义,并且是了解和研究其发生规律的重要的

中国昆虫学会专家共商深圳昆虫科技馆建设

  近日,中国农科院、中国昆虫学会联合召开专家咨询会,对中国农业科学院农业基因组研究所(简称“基因组所”)深圳昆虫科技馆建设方案进行论证,中国昆虫学会副理事长、中国农业科学院副院长吴孔明院士主持会议,来自中科院动物所、中科院上海植生所、南京农业大学等单位的昆虫研究领域知名专家及学会理事共16人参加了

昆虫病原线虫与寄主昆虫栖境植物根系互作关系

  昆虫病原线虫(Entomopathogenic nematodes, EPNs)是对环境和人类具有无毒无害且能够被用来防治害虫的一种生物,近年来受到越来越多的关注。利用EPNs防治害虫在田间的应用取得了一定的进展,但田间的防效不太稳定,主要是由于很多环境因子影响,因此对EPN-昆虫-植物的相互作

昆虫病毒的培养实验

实验方法原理培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法,后者比较容易成功,使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾(Prodenialitura)核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后,在细胞核内形成多角体,多角体内包含着很多病毒粒子。斜

昆虫产业悄然“蝶变”

  昆虫资源产业化在推动农业发展方式转变、农业供给侧结构性改革和农业发展新旧动能转换方面具有重要的作用,有利于实现生态效益、经济效益和社会效益的有机统一。未来,昆虫资源产业化发展空间无可限量。  油炸蚂蚱、香煎竹笋蛹、酱拌蟋蟀、油炸蝉蛹、昆虫叉烧包……昆虫不知不觉间走上了人们的餐桌。而从餐桌回溯到田

昆虫能影响大气电流

通过测量蜂群附近的电场,研究人员发现这些昆虫可以产生和雷暴云一样多的大气电荷。这类电荷能影响天气、帮助昆虫寻找食物,或帮助蜘蛛在空中远距离迁移。这项研究表明,生物可以对大气电流产生影响。相关研究近日发表于《交叉科学》。 “我们一直在研究物理学是如何影响生物学的,但在某个时刻,我们意识到生物学可能

昆虫信息素的作用

昆虫信息素是昆虫用来表示聚集、觅食、交配、警戒等各种信息的化合物,是昆虫交流的化学分子语言。其中昆虫性信息素是调控昆虫雌雄吸引行为的化合物,既敏感又专一,作用距离远,诱惑力强。性诱剂是模拟自然界的昆虫性信息素,通过释放器释放到田间来诱杀异性害虫的仿生高科技产品。该技术诱杀害虫不接触植物和农产品,没有

昆虫病毒的培养实验

实验方法原理 培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法,后者比较容易成功,使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾(Prodenialitura)核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后,在细胞核内形成多角体,多角体内包含着很多病毒粒子。

昆虫信息素的分类

信息素是生物体之间起化学通讯作用的化合物的统称, 是昆虫交流的化学分子语言。包括:利它素、利己素、协同素、集合信息素、追踪信息素、告警信息素、疏散信息素、性信息素。在自然界中,害虫雌成虫在性成熟后,会释放一种叫性信息素的化合物, 它释放至空气中后随气流扩散,刺激雄虫触角中的化学感觉器官,引起雄性个体

昆虫信息素是什么

昆虫个体向体外释放的一种能在昆虫间传递信息、引起其他个体发生行为反应的微量化学物质。又称外激素。包括只作用于同种的种内信息素和能作用于其他种的种间信息素。它主要来源于昆虫体表的分泌腺体,借助空气或其他媒介传递,接受者以化学感受器或嗅觉、味觉等方法接纳,可表现为抑制作用,也可表现为刺激作用。种内信息素

传粉昆虫:我的花呢?

  传粉昆虫:我的花呢?  然而,并不是所有的昆虫都会受益于气候变暖,有的昆虫反而因此遇到了种种困难,传粉昆虫就是这样的天选“倒霉蛋”。  与一般农业害虫不同,传粉昆虫不会长期待在一棵植物上,以植物叶片或茎干为食。为了获得足够的食物,传粉昆虫需要大范围地搜寻花朵,必要的时候还会跟着花期迁徙。  生活

什么是瞬时表达和稳定表达?

瞬时表达:外源片段不能随细胞分裂而一同复制,导致表达时间短暂,且表达量随时间逐渐下降。稳定表达:是指外源片段整合入细胞基因组中,并能随细胞分裂稳定传递下去,表达量长时间处于稳定水平。那稳定株,顾名思义当然是属于稳定表达的体系了。

昆虫翅膀铰链之谜首次揭开

昆虫是唯一一类从非四肢部位演化出飞行能力的动物,其翅膀是通过一种独特的复杂铰链与身体连接的。然而,翅膀铰链的力学机制一直是个谜。《自然》杂志18日发表的一项研究称,美国加州理工学院团队结合成像技术、机器学习建模和机器人飞行,首次揭示了昆虫翅膀铰链的工作原理。研究团通过技术手段拍摄到果蝇在一个电子飞行

周期钟对昆虫滞育诱导

环境诱导因素中光周期钟、温周期和食料因子对昆虫滞育诱导的影响介绍如下。早在19世纪60年代,许多植物学家已经意识到日长影响植物开花,首先报道这种 光周期现象的是Garnar和Allard(1920)。随后,在1924年Marcovitch发现了光周期对草螟根蚜Aphisforbesi的季节性控制,当

昆虫细胞共转染实验

实验材料草地夜蛾(Sf 9)细胞含目的基因的重组杆状病毒转移质粒阳性对照载体:pVL 1392 - XylE试剂、试剂盒ORF 1629 缺失的线性 AcMNPV DNA转染缓冲液 B转染缓冲液A500 mmol/L 儿茶酚/50 mmol/L 硫酸氢钠仪器、耗材含 10% 胎牛血清(FBS)的 T

昆虫翅膀铰链之谜首次揭开

昆虫是唯一一类从非四肢部位演化出飞行能力的动物,其翅膀是通过一种独特的复杂铰链与身体连接的。然而,翅膀铰链的力学机制一直是个谜。《自然》杂志18日发表的一项研究称,美国加州理工学院团队结合成像技术、机器学习建模和机器人飞行,首次揭示了昆虫翅膀铰链的工作原理。研究团通过技术手段拍摄到果蝇在一个电子飞行