关于酶学活性检测的流程及方法介绍
测试采用荧光法,需要经过以下流程: (1)采血 通常情况下采患者静脉血5ml,采用EDTA抗凝血。但也有部分酶可采用干血片的测试方法(北京中科医学检验及上海新华医院),干血片只需要患者几滴血即可完成,但这种方法通常需要对疑似患者做进一步遗传学分析。 (2)患者填写知情同意书 (3)对样本进行处理,分离白细胞。 (4)对白细胞进行处理,分离底物。 (5)加入试剂对分离物进行处理。 (6)用荧光法进行测试。 (7)计算酶活性。 (8)对计算结果进行解读,确定是否在正常范围内。 (9)做出检验报告。 酶学活性测试过程复杂,涉及多种技术,没有现成的成套设备自动化处理,因此国内可以很少实验室可以完成,相对检测成本较高。......阅读全文
简述酶学活性检测的重要性
溶酶体贮积症是进行性疾病,随着细胞内底物的堆积,会影响到全身各个脏器,常见的症状包括: (1)肝脾肿大、心脏功能异常、出现眼科疾病症状、面容粗陋、骨骼异常等贮积性疾病特征; (2)智力、运动能力及发育迟缓,或早起生长发育正常继而出现进行性倒退,或伴共济失调、惊厥及无力等神经肌肉系统症状及行为
关于酶学活性检测的流程及方法介绍
测试采用荧光法,需要经过以下流程: (1)采血 通常情况下采患者静脉血5ml,采用EDTA抗凝血。但也有部分酶可采用干血片的测试方法(北京中科医学检验及上海新华医院),干血片只需要患者几滴血即可完成,但这种方法通常需要对疑似患者做进一步遗传学分析。 (2)患者填写知情同意书 (3)对样本
关于酶学活性检测的基本信息介绍
酶学活性检测也称为酶活测试或酶学活性检测,酶学活性测试是测试溶酶体酶活性的测试方法,溶酶体酶活性不足会导致溶酶体贮积症,常见的溶酶体贮积症有6大类30几种,溶酶体酶酶学活性测试是确诊溶酶体贮积症的金标准。常见的溶酶体酶包括:芳基硫酸酯酶A(ASA)、半乳糖脑苷脂酶、β-半乳糖苷酶、β-氨基己糖苷
酶活性定义
酶活性指的是有机体的生命活动表现了它内部化学反应历程的有序性,这种有序性是受多方面因素调节的,一旦破坏了这种有序性,就会导致代谢紊乱,产生疾病,甚至死亡。酶活力受到调节和控制是区别于一般催化剂的重要特征。
酶活性单位
1.酶活性单位 20世纪50年代以前通常用惯用单位,即用先报道某种酶测定方法的临床酶学家的姓氏来命名其单位。例如,测定AMY的Somogyi单位,转氨酶的赖氏单位(Reitman-Frankel)等。不仅酶不同,单位不同,即使是同一种酶也因方法不同而可有数种活性单位,参考值差别也很大,给临床
酶活性检测方法
伴随着酶制剂工业的不断发展,饲用酶制剂的规范化程度也逐步得到了提高,国家相继对植酸酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶等制定了检测标准,其它一些没有统一检测标准的酶制剂产品行业内研究人员也都根据实际情况制定了各种检测方法,这些方法的制定为酶制剂产品的质量控制提供了有力的支持。但是酶制剂作为一种生物质产品对外界
酶活性测定实验
实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.
酶活性测定实验
实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.
什么是酶活性?
酶活力(enzyme activity)也称酶活性,是指酶催化一定化学反应的能力。酶活力的大小可以用在一定条件下,它所催化的某一化学反应的转化速率来表示,即酶催化的转化速率越快,酶的活力就越高; 反之,速率越慢,酶的活力就越低。所以,测定酶的活力就是测定酶促转化速率。酶转化速率可以用单位时间内单位体
免疫学实验α2纤溶酶抑制物活性介绍
α2-纤溶酶抑制物活性介绍: α2纤溶酶抑制物主要由肝脏合成,一种单链糖蛋白,是体内特异的抑制活性的丝氨酸蛋白酶,有限时性抑制纤溶酶的作用和抑制纤溶酶原与纤维蛋白结合,防止纤维蛋白被抗纤溶酶水解的作用。α2-纤溶酶抑制物活性正常值: 0.8-1.2抑制单位/ml。α2-纤溶酶抑制物活性临床意义:
双酶切反应酶活性分析
同步双酶切是一种省时省力的常用方法。选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。NEB每一种酶都随酶提供相应的最佳NEBuffer,以保证100%的酶活性。NEBuffer的组成及内切酶在不同缓冲液中的活性见《内切酶在不同缓冲液里的活性表》及每支酶的说明书。能在最大程度上保证两种酶活性的缓冲
酶的活性浓度单位
酶活性浓度以每单位体积所含的酶活性单位数表示。近些年来,我国及世界各国的临床实验室几乎都习惯用U/L来表示体液中酶活性浓度。考虑到各级医护人员都对katal不太熟悉,如使用katal/L报告酶活性浓度结果时,最好同时注明相应的U/L.在对酶活性浓度单位计算时,可根据所测定的酶所用方法的不同,利用标准
RNA酶活性的控制
为了获得高质量的真核细胞mRNA, 必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。同时,避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量RNA酶也很重要。下面列举避免RNA酶法染问题的一些注意事项。大多数有经验的研究者并不拘泥于这些注
酶蛋白的活性特点
酶蛋白与一般蛋白质的不同之处在于酶蛋白具有活性中心。酶蛋白的活性中心是与底物发生催化作用的部位,由酶蛋白的立体构型所决定,一般是三级结构及四级结构才具有活性中心。若这种结构被破坏,活性中心也就破坏,酶就失去活性,这就是当环境变化时,酶丧失活性的原因。 整个酶蛋白,包括活性中心和非活性中心部分,都
酶的活性中心
酶的活性中心:酶蛋白与其他蛋白质不同之处在于酶蛋白有活性中心。所谓活性中心是指酶蛋白上具有的与催化活性有关的一个特定区域,其中包括催化过程中关键的催化基团以及与底物结合有关的结合基团。
酶活性的测定方法
一般采用测定酶促反应初速度的方法来测定活力,因为此时干扰因素较少,速度保持恒定。反应速度的单位是浓度/单位时间,可用底物减少或产物增加的量来表示。因为产物浓度从无到有,变化较大,而底物往往过量,其变化不易测准,所以多用产物来测定
酶的活性浓度单位
酶活性浓度以每单位体积所含的酶活性单位数表示。近些年来,我国及世界各国的临床实验室几乎都习惯用U/L来表示体液中酶活性浓度。考虑到各级医护人员都对katal不太熟悉,如使用katal/L报告酶活性浓度结果时,最好同时注明相应的U/L.在对酶活性浓度单位计算时,可根据所测定的酶所用方法的不同,利用标准
酶活性测定方法对比
1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的影响
酶活性测定方法对比
1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的
酶活性单位临床生化
酶活性单位:1.酶活性单位20世纪50年代以前通常用惯用单位,即用先报道某种酶测定方法的临床酶学家的姓氏来命名其单位。例如,测定AMY的Somogyi单位,转氨酶的赖氏单位(Reitman-Frankel)等。不仅酶不同,单位不同,即使是同一种酶也因方法不同而可有数种活性单位,参考值差别也很大,给临
内切酶星号活性
在非理想的条件下,内切酶切割与识别位点相似但不完全相同的序列,这一现象称星号活性。有人提出,这种"星号"活性可能是内切酶的一种普遍特性(1),如果提供给相应反应条件,所有内切酶都会出现非特异性切割。NEB已证实下列酶存在星号活性:Apo I(2)、Ase I(2)、BamH I(3)、BssH II
酶活性单位临床生化
酶活性单位:1.酶活性单位20世纪50年代以前通常用惯用单位,即用先报道某种酶测定方法的临床酶学家的姓氏来命名其单位。例如,测定AMY的Somogyi单位,转氨酶的赖氏单位(Reitman-Frankel)等。不仅酶不同,单位不同,即使是同一种酶也因方法不同而可有数种活性单位,参考值差别也很大,给临
酶活性测定方法对比
1.按反应时间分类法:20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性,现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成,可以测酶反应的初速度,其结果远比固定时间法准确,在高浓度标本尤为明显,但本法也受到反应时间,反应温度,试剂等的影
酶的活性调节方式
酶的活性可以通过以下几种方式进行调节:一、酶活性的别构调节概念:别构酶具有别构效应,即一些小分子化合物与酶蛋白分子活性中心以外的某一部位特异结合,引起酶蛋白分子构象变化,从而改变酶的活性。调节方式:别构激活:使酶活性增强的效应。通常由底物或底物以外的别构激活剂引起。别构抑制:使酶活性降低的效应。可由
酶的活性指标介绍
酶催化化学反应的能力叫酶活力(或称酶活性,active unit)。1961年国际酶学会议规定:1个酶活力单位是指在特定条件(25℃,其它为最适条件)下,在1min内能转化1μmol底物的酶量,或是转化底物中1μmol的有关基团的酶量。影响因素酶活力可受多种因素的调节控制,从而使生物体能适应外界条件
酶活性单位检验技师
酶活性单位是检验技师需要了解的知识,医学教育网搜索整理如下:1.酶活性单位20世纪50年代以前通常用惯用单位,即用先报道某种酶测定方法的临床酶学家的姓氏来命名其单位。例如,测定AMY的Somogyi单位,转氨酶的赖氏单位(Reitman-Frankel)等。不仅酶不同,单位不同,即使是同一种酶也因方
酶活性的测定实验
连续性检测 实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量
RNA酶活性的控制
为了获得高质量的真核细胞mRNA, 必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步进行的方法,最大限度地降低细胞破碎过程中所释放的RNA酶的活性。同时,避免偶然引入实验室内其他潜在的痕量RNA酶也很重要。下面列举避免RNA酶法染问题的一些注意事项。大多数有经验的研究者并不拘泥于这些注
酶活性单位临床生化
酶活性单位: 1.酶活性单位 20世纪50年代以前通常用惯用单位,即用先报道某种酶测定方法的临床酶学家的姓氏来命名其单位。例如,测定AMY的Somogyi单位,转氨酶的赖氏单位(Reitman-Frankel)等。不仅酶不同,单位不同,即使是同一种酶也因方法不同而可有数种活性单位,参考值差别也很大
酶活性测定的方式
酶促反应速度的测定可采用两种方式: 一、测定完成一定量反应所需的时间; 二、测定单位时间内的酶促反应量。前者称为终点法,后者称为动力学法。 终点法 该方式是在特定条件下,将样品中要检知的酶作用一定量的底物,然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。 其