简述微生物染色的注意事项
微生物检验的重要技能之一就是涂片、染色、镜检。 很多涂片镜检与培养结果不符以及鉴定不准的重要原因就是在涂片操作中不规范造成的，当然技术原因也相当重要。 1、微生物染色— 载玻片的准备，做细菌涂片尤其是做鞭毛染色，应该用经95%酒精浸泡24h以上的新玻片； 2、微生物染色— 涂片，体液应离心集菌，脓、痰、分泌物要求涂到单层细胞厚度（TB要涂厚片），菌落涂片要求菌量要少，因为不止要看染色性状和菌体形状，还要观察菌体排列方式，最好 ＞10个细菌/油镜视野，初学者大多涂菌过多，这也是挨批的主要原因； 3、微生物染色— 固定，一般要求涂片是自然风干，经火焰固定时不可过热（前面有帖讨论过），鞭毛染色涂片自然风干固定即可。......阅读全文
病原微生物染色实验——乙型肝炎表面抗原
实验方法原理乙型肝炎表面抗原（HBsAg）是由多肽组成的脂蛋白，由于抗原内含有丰富的二硫键成分，经过氧化剂而转变为磺酸，然后再与染色液产生较强的亲和力进行着色。通过地衣红（Orcein）染色法，能够较好地显示乙型肝炎表面抗原（HBsAg）。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水
微生物检验培养基、试剂、染色液和血清的质量控制
一、配制时的质量控制（1）容器：配制和分装培养基的烧瓶、平皿或试管等器材应为中性，无酸、碱抑制物残留，平皿底部要平，以免琼脂厚薄不一，影响药敏试验结果。（2）成分来源：各种成分来源可靠，不含对目的菌生长有抑制的物质。特殊要求的培养基，如葡萄糖氧化发酵试验（O／F 试验），除加入葡萄糖外，不能含有其他
微生物检验培养基、试剂、染色液和血清的质量控制
培养基质量控制 一、配制时的质量控制（1）容器：配制和分装培养基的烧瓶、平皿或试管等器材应为中性，无酸、碱抑制物残留，平皿底部要平，以免琼脂厚薄不一，影响药敏试验结果。（2）成分来源：各种成分来源可靠，不含对目的菌生长有抑制的物质。特殊要求的培养基，如葡萄糖氧化发酵试验（O／F 试验），除加入葡萄
糖类染色实验——糖原染色
实验方法原理糖原由多糖衍化而来，是单纯的多糖。糖原易溶于水，所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原，常用高碘酸（periodic acid）-Shiff 反应（PAS）染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠（偏重亚硫酸钠）双重蒸馏水
人类染色体姊妹染色单体差别染色
姊妹染色单体区分染色法(Sister chromatid differentiation，SCD）是70年代中期发展起来的染色体处理技术。Latt（1973）在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU），当用Hoechst33258 荧光染料染色时，发现了姊妹染色单体的色差反映和它们
姐妹染色单体分化染色实验
实验概要本文介绍了姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation，SCD)的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation，SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷（5-Bromodeoxyuridine：BUdR）的培养基中，当细胞在DNA 合成时，BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷（Thymidine：TdR）被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时，由于半保留复制的机制，中期染色体的每条染色单体D
间接染色步骤（细胞表面染色）
实验概要间接标记需要两个孵育步骤，先与一抗再与合适的第二抗体孵育，二抗（不是一抗）结合了荧光染料（FITC、PE、Cy5 等）。请注意这是一个普遍的程序，您可以根据自己的使用情况进行调整。实验步骤1. 收集并洗涤细胞，然后确定细胞总数。细胞通常在聚苯乙烯的圆底 12 x 75 mm2 Falcon
糖类染色实验——黏液物质染色
实验方法原理在人体和动物体中能够分泌黏液物质，依其物质中含有的酸基不同，所以分为中性黏液、酸性黏液和混合性黏液，也可被称为中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖，常用 Mowry 阿尔辛蓝高碘酸 Shiff 反应（ABPAS）染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒阿尔辛蓝 8 GS冰醋酸蒸馏水麝香
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理 细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷（5-Bromodeoxyuridine：BUdR）的培养基中，当细胞在DNA 合成时，BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷（Thymidine：TdR）被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时，由于半保留复制的机制，中期染色体的每条染色单体
姐妹染色单体分化染色方法
姐妹染色单体差别染色可使中期染色体显示深浅不同的两条单体，能借以观察姐妹染色单体互换（SCE）现象。SCE是两条染色单体在DNA合成中核苷酸序列发生互换而表现出来一种现象。即是细胞分裂是DNA同源重组的结果。SCE既是一种无害的变化（有生理波动），也可受射线、致突和致癌物三因素等作用而升高。SCE一
革兰氏染色液染色法
1．葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液。 2．结晶紫染色液。 3．革兰氏碘液。 4．95％酒精。 5．番红染液。 6．载玻片。方 法 一、涂片标本的制备（见实验一） 二、革兰氏染色法 1．初染：在上述已固定的涂片上，滴加结晶紫染液，染色1分钟，水洗
染色质染色体和染色单体的区别
（1）、染色质和染色体的主要成分都是DNA和蛋白质，它们之间的不同，不过是同一物质在细胞分裂间期和分裂期的不同形态表现而已。 染色质出现于间期，呈丝状。它们在核内的螺旋程度不一，螺旋紧密的部分，染色较深，有的螺旋松疏染色较浅，染色质在光镜下呈现颗粒状，不均匀地分布于细胞核中。细胞分裂时染色质细
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤 改良Ryui法一、实验试剂：A液：5％石炭酸： 10ml鞣酸： 2g饱和硫酸铝钾液：10mlB液：结晶紫酒精饱和液应用液：A液10份，B液1份，混合，室温存放。二、染色方法：1. 玻片的处理：要求用新的载玻片，用前须在95％酒精中浸泡24小时以上，用时从酒精中
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤改良Ryui法一、实验试剂：A液：5％石炭酸： 10ml鞣酸： 2g饱和硫酸铝钾液：10mlB液：结晶紫酒精饱和液应用液：A液10份，B液1份，混合，室温存放。二、染色方法：1. 玻片的处理：要求用新的载玻片，用前须在95％酒精中浸泡24小时以上，用时从酒精中取
细菌的简单染色和革兰氏染色
（一）实验目的：学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。 （二）实验原理：用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或
瑞氏染色法：染色原理
既有物理的吸附作用，又有化学的亲和作用。各种细胞成分化学性质不同，对各种染料的亲和力也不一样。如血红蛋白、嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色或蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态
脂质染色实验_苏丹－III－染色
实验材料冰冻切片试剂、试剂盒苏丹 III乙醇蒸馏水自来水甘油明胶盐酸乙醇Harris 苏木精仪器、耗材弯钩玻璃棒载玻片实验步骤苏丹 III 染色液：苏丹 III 2.5 g，70％ 乙醇 500 ml，充分溶解后，室温下形成饱和溶液，可存放较长时间。1. 冰冻组织切片厚 10～20 μm 左右，采用
抗酸染色配置以及染色方法实验
实验方法原理抗酸染色直接用于痰标本时，可以适当曾加标本涂片的厚度，以提高检出率。染厚涂片时，须掌握复染色时间，如果背景过深，影响镜检。实验步骤碱性复红染色法：（萋纳Ziehl-Neelsen法）一、实验试剂：1. 萋纳石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱和溶液：10ml5％石炭酸溶液： 90m
细菌的简单染色和革兰氏染色
（一）实验目的：学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。（二）实验原理：用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔
洋红染色剂的染色配方
通常的染色配方为：（1）醋酸洋红配方：冰醋酸1体积、蒸馏水1体积、洋红饱和量。配法：冰醋酸与蒸馏水混合煮沸，加入洋红再煮20分钟。（2）明矾洋红配方：洋红1g，铵明矾或钾明矾10g，蒸馏水100mL。配法：先将明矾溶于蒸馏水，再加入洋红煮沸，冷却后加入少量防腐剂（水杨酸钠、石炭酸等）。（3）硼砂洋红
抗酸染色配置以及染色方法实验
实验方法原理抗酸染色直接用于痰标本时，可以适当曾加标本涂片的厚度，以提高检出率。染厚涂片时，须掌握复染色时间，如果背景过深，影响镜检。实验步骤碱性复红染色法：（萋纳Ziehl-Neelsen法）一、实验试剂：1. 萋纳石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱和溶液：10ml5％石炭酸溶液： 90m
革兰氏染色配制及染色方法实验
实验方法原理本染色法是最基本的染色法，可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。实验步骤一、实验试剂：1. 结晶紫溶液：A液：结晶紫：2g，95%乙醇：20ml。B液：草酸铵：0.8g，蒸馏水：80ml。需在用前24小时将A液. B液混合，过滤后装入试剂瓶内备用。2.
革兰氏染色配制及染色方法实验
实验方法原理本染色法是最基本的染色法，可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。实验步骤一、实验试剂：1. 结晶紫溶液：A液：结晶紫：2g，95%乙醇：20ml。B液：草酸铵：0.8g，蒸馏水：80ml。需在用前24小时将A液. B液混合，过滤后装入试剂瓶内备用。2.
革兰氏染色法的染色原理
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌，是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。 通过初染和媒染后，细胞内形成了不溶于水的结晶紫一碘大分子复合物。革兰氏阳性细菌由
瑞氏染色法染色原理
瑞氏染色法染色原理： 为了观察细胞内部结构，识别各种细胞及其异常变化，血涂片必须进行染色。瑞氏染色法是血细胞分析最经典和最常用的染色法。瑞氏染料： 是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料。染色原理： 是染料透入被染物并存留其内部的一种过程，此过程既有物理的吸附作用，又有化学的
细菌的简单染色和革兰氏染色
（一）实验目的：学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。（二）实验原理：用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔
姐妹染色单体分化染色法
1. 实验原理 姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation，SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处理技术。1973年Latt在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Bromode Oxyurdine，BrdU），用Hoechst 3
电子染色的染色特点介绍
电子染色（electron stain）是利用某些重金属盐（铀、铅等）能与细胞的某些结构和成分结合，以提高电子密度来增强结构的反差。
活力染色
经验交流（0）实验方法原理各种细胞操作，包括传代、冻存和原代组织的分离，均能导致细胞死亡。为了确定群体细胞中的存活细胞数，可采用台盼蓝染料排斥实验（Phillips 1973)。正常的健康细胞能排斥染料，但细胞膜完整性丧失后台盼蓝可弥散入细胞内。染料排斥实验是一种粗糙的估计细胞活力的方法，无法区