简述微生物染色的注意事项
微生物检验的重要技能之一就是涂片、染色、镜检。 很多涂片镜检与培养结果不符以及鉴定不准的重要原因就是在涂片操作中不规范造成的,当然技术原因也相当重要。 1、微生物染色— 载玻片的准备,做细菌涂片尤其是做鞭毛染色,应该用经95%酒精浸泡24h以上的新玻片; 2、微生物染色— 涂片,体液应离心集菌,脓、痰、分泌物要求涂到单层细胞厚度(TB要涂厚片),菌落涂片要求菌量要少,因为不止要看染色性状和菌体形状,还要观察菌体排列方式,最好 >10个细菌/油镜视野,初学者大多涂菌过多,这也是挨批的主要原因; 3、微生物染色— 固定,一般要求涂片是自然风干,经火焰固定时不可过热(前面有帖讨论过),鞭毛染色涂片自然风干固定即可。......阅读全文
活力染色
实验方法原理各种细胞操作,包括传代、冻存和原代组织的分离,均能导致细胞死亡。为了确定群体细胞中的存活细胞数,可采用台盼蓝染料排斥实验(Phillips 1973)。正常的健康细胞能排斥染料,但细胞膜完整性丧失后台盼蓝可弥散入细胞内。染料排斥实验是一种粗糙的估计细胞活力的方法,无法区别 10%~20%
活力染色
实验方法原理 各种细胞操作,包括传代、冻存和原代组织的分离,均能导致细胞死亡。为了确定群体细胞中的存活细胞数,可采用台盼蓝染料排斥实验(Phillips 1973)。正常的健康细胞能排斥染料,但细胞膜完整性丧失后台盼蓝可弥散入细胞内。染料
染色技术
由于微生物细胞含有大量水分(一般在80-90%以上),对光线的吸收和反射与水溶液的差别不大,与周围背景没有明显的明暗差。所以,除了观察活体微生物细胞的运动性和直接计算菌数外,绝大多数情况下都必须经过染色后,才能在显微镜下进行观察。但是,任何一项技术都不是完美无缺的。染色后的微生物标本是死的,在染色过
Masson染色
Masson染色,用于显示组织中纤维的染色方法之一。试剂:Regaud 氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml。将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。Masson丽春红酸性复红液: 丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋
染色技术
由于微生物细胞含有大量水分(一般在80-90%以上),对光线的吸收和反射与水溶液的差别不大,与周围背景没有明显的明暗差。所以,除了观察活体微生物细胞的运动性和直接计算菌数外,绝大多数情况下都必须经过染色后,才能在显微镜下进行观察。但是,任何一项技术都不是完美无缺的。染色后的微生物标本是死的,在染
Giemsa染色
实验方法原理培养物用甲醇固定,直接用未稀释的 Giemsa 液进行染色,然后1:10 稀释染液,清洗培养物,在潮湿状态下观察。实验材料D-PBSA D-PBSA:甲醇(1
Giemsa染色
实验方法原理 培养物用甲醇固定,直接用未稀释的 Giemsa 液进行染色,然后1:10 稀释染液,清洗培养物,在潮湿状态下观察。实验材料 D-PBSAD-PBSA:甲醇(1:1)试剂、试剂盒 未稀释的Giemsa染液甲醇去离子水实验步骤 本程序假设用单层细胞进行染色,而固定的悬浮细胞也可以使用,但从
Giemsa染色
实验方法原理培养物用甲醇固定,直接用未稀释的 Giemsa 液进行染色,然后1:10 稀释染液,清洗培养物,在潮湿状态下观察。实验材料D-PBSAD-PBSA:甲醇(1:1)试剂、试剂盒未稀释的Giemsa染液甲醇去离子水实验步骤本程序假设用单层细胞进行染色,而固定的悬浮细胞也可以使用,但从第6 步
糖原染色
原始粒细胞呈阴性,早幼粒及以后各阶段细胞随细胞的成熟,阳性反应逐渐增强。嗜酸性和嗜碱性粒细胞亦为阳性。单核细胞为弱阳性反应,常为细小或弥散的阳性颗粒。淋巴细胞呈阴性反应,少数为弱阳性反应。巨核细胞及血小板为阳性。红细胞系列均属阴性。 【临床意义】 急性粒细胞白血病时,原粒细胞呈阴性,原粒以
Masson染色
实验概要Masson染色由mallory三色染色改造,利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色,与阴离子染料分子大小和组织的渗透性有关。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成份显示出来。主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。主要试剂1. Regaud
铁染色时正常血细胞染色反应
1)细胞外铁:观察骨髓小粒中的铁,呈弥散蓝色、颗粒状、小珠状或块状。根据骨髓小粒中铁的存在方式及量将细胞外铁分为(-)、(+)、(++)、(+++)、(++++)。2)细胞内铁:观察100个中幼红细胞和晚幼红细胞计算出铁粒幼红细胞的百分比。铁粒幼红细胞是指胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细胞,根据蓝色铁颗
细菌染色标本检查常用的染色方法
细菌染色标本检查常用的染色方法是检验主管技师考试辅导的部分内容,以下是医学教育网对这块内容的整理,希望对考生有所帮助: 细菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→染色(初染→媒染→脱色→复染)。 1.单染色法:用一种染料将细菌和周围物体染成同一种颜色。细菌经单染色法处理后,可观察其形态、排列、
铁染色正常血细胞的染色反应
1)细胞外铁:观察骨髓小粒中的铁,呈弥散蓝色、颗粒状、小珠状或块状。根据骨髓小粒中铁的存在方式及量将细胞外铁分为(-)、(+)、(++)、(+++)、(++++)。2)细胞内铁:观察100个中幼红细胞和晚幼红细胞计算出铁粒幼红细胞的百分比。铁粒幼红细胞是指胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细胞,根据蓝色铁颗
瑞氏染色法的染色原理
染色原理物理吸附与化学亲和作用嗜酸性物质→伊红+ Hb、嗜酸性颗粒嗜碱性物质→亚甲蓝+ 细胞核蛋白、L及B胞质
色素类染色实验_黑色素染色
实验方法原理黑色素不正常情况下,可在全身各处形成含有黑色素的沉着物。黑色素组织易保存,常规固定剂与石蜡组织切片均不会丢失,其形态特点为大小不等的颗粒状物质,经过 Masson Fontana 的氨银液作用一定时间后,能够较好地显示黑色素。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水硝
色素类染色实验_脂褐素染色
实验方法原理脂褐素是一种衰老或破坏的线粒体和内质网等细胞器结构经过溶酶体消化未完的残余物,多见于老年入或患慢性消耗性疾病患者的组织细胞,常用 Schmorl 反应方法染色。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水铁氰化钾三氯化铁中性红乙酸仪器、耗材滴管玻片实验步骤试剂配制三氯化铁
荧光染色显示Y染色质法
实验方法原理在间期细胞核中,女性X染色质和男性Y染色质均可用特殊染色法显示出来。女性的两个X染色体中的一个,在间期时的染色质呈异固缩(Heteropyconosis),呈深染的小体称Barr氏体。Barr氏体位于间期细胞核内面,呈三角形或半月形小体,易为碳酸复红或硫堇等染料着色。正常女性Barr氏体
血细胞染色—吉姆萨染色法
吉姆萨(Giemsa)染色法吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为
色素类染色实验_胆色素染色
实验方法原理在不正常的情况下,如血红蛋白分解产物和代谢发生的障碍等情况,使胆红素的含量增多,在组织中形成大小不等的颗粒或团块状物质,通过 Hall 胆红素反应,能够清楚地显示胆色素。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯乙醇蒸馏水三氯乙酸三氯化铁丽春红 S 水溶液苦味酸饱和液中性树胶仪器、耗材滴管玻
细菌染色标本的抗酸染色法
抗酸染色也可将细菌分为两大类:即抗酸性细菌和非抗酸性细菌。因为临床上绝大多数病原菌为非抗酸性细菌,所以抗酸染色不作为临床上常规的细菌检查项目,只针对性用于结核病、麻风病等的细菌检查。疑似结核分枝杆菌感染的标本,经抗酸染色后以油镜检查,即可作出初步鉴定。将有肺结核症状病人的痰标本,制成涂片后,作萋
色素类染色实验_含铁血黄素染色
实验方法原理含铁血黄素是一种血红蛋白源性色素,常规染色为棕黄色大小不等的颗粒,呈点状和团块状分布于细胞内或细胞外。有的存在于血管内。染色反应是由于三价铁离子从蛋白质中被盐酸分离出来,再与亚铁氡化钾反应,生成蓝色的亚铁氰化铁物质,通常用普鲁士(Perls)蓝反应。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯
姬姆萨染色法:染色原理
姬姆萨染液由天青、伊红组成。染色原理和结果与瑞氏染色基本相同。
脂质染色实验_油红-O-染色
实验材料冰冻切片试剂、试剂盒油红 O乙醇二甲苯蒸馏水甘油明胶苏丹 III仪器、耗材弯钩玻璃棒5 ml 染色缸载玻片插板实验步骤油红 O-乙醇染色液:油红 O(oil red O,上海试剂三厂)2.5 g,70% 乙醇 500 ml,混合后间隔摇动多次,待 24 h 形成饱和液,即可使用。置室温中可保
神经组织染色实验——神经髄鞘染色
实验方法原理神经纤维可分为有髄和无髄神经纤维,有髄神经纤维包括轴突、髄鞘和神经膜。髄鞘是一层很厚的管状结构,是一种脂蛋白,可称为糖脂,常用 Loyez 苏木精染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒苏木精纯乙醇蒸馏水碳酸锂饱和水溶液盐酸乙醇二甲苯中性树胶铁明矾水溶液实验步骤碳酸锂-苏木精染色液:苏
细菌染色标本检查常用的染色方法
细菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→染色(初染→媒染→脱色→复染)。 1.单染色法:用一种染料将细菌和周围物体染成同一种颜色。细菌经单染色法处理后,可观察其形态、排列、大小及简单的结构,但不能显示各种细菌染色性的差异。 2.复染色法:用两种或两种以上的染料染色的方法,称为复染色法或鉴别染
神经组织染色实验——神经纤维染色
实验方法原理神经纤维是由神经元的轴突和树突等成分组成,经过银染后,再用还原剂处理,使银颗粒沉着于纤维和细胞中。常用 Bielschowsky 染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒硝酸银水溶液无水乙醇浓氨水蒸馏水二甲苯乙醇中性树胶氯化金水溶液甲醛硫代硫酸钠仪器、耗材滤纸37℃ 温箱实验步骤氨银溶液
尼氏染色试剂盒的染色原理
神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒,即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏
锥虫蓝染色剂的染色步骤
步骤:1、4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。(也可买Gibco的成品);2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。(终浓度0.04%)4、计数
尼氏染色试剂盒的染色原理
神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒,即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏
鞭毛染色实验——改良-Leifson-氏染色法
实验方法原理鞭毛染色的基本原理,是在染色前先用媒染剂处理含使它沉积在鞭毛上,使鞭毛直径加粗,然后再进行染色。实验材料苏云金芽孢杆菌假单胞菌金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒Leifson 氏鞭毛染色液0.01% 美蓝水溶液仪器、耗材载玻片盖玻片凹载玻片无菌水凡士林显微镜实验步骤1. 载玻片的准备 菌种材料的