简述梅毒相关检测方法—分子生物学检测

近年来分子生物学发展迅速,PCR技术广泛用于临床,所谓PCR即多聚酶链式反应,即从选择的材料扩增选择的螺旋体DNA序列,从而使经选择的螺旋体DNA拷贝数量增加,能够便于用特异性探针来进行检测,以提高诊断率。但是,这种实验方法,要求有条件绝对好的实验室和技术一流的技师,而我国很少有这样高水平的实验室。不然有了污染,你放入的是梅毒螺旋体,经过DNA扩增后出现了大肠杆菌,让你哭笑不得。一些小诊所常常赶时髦,挂个PCR实验室的牌子,吃喝拉撒在一起,只能是自欺欺人。其实诊断梅毒不一定要作PCR,作一般的抽血化验即可。......阅读全文

土壤的分子生物学特性介绍

在我们的实验室里,zui难搞的样品类型之一就是土壤。在开发提取土壤中微生物DNA、RNA的试剂盒和构思提取方法的过程中,我们需要收集记录大量各种类型土壤的有机物含量、质地、pH以及采集地。这些因素与土壤微生物含量息息相关,同样地也影响着提取DNA、RNA的得率。下文,我将介绍一些影响土壤DNA、RN

分子生物学实验小技术(二)

1 、 各供应商送货时往往会提供冰袋,在室温下将化冻的大冰袋平整的一面整齐地插入1.5ml 或0.5ml 、0.2ml 的废弃离心管;或将几个化冻后的小冰袋填料塞入一个小泡沫盒中压实,再插入各种大小的试管,放在-20 摄氏度下冻24小时后取出,拔出插入的废管(可加点热水以助拔管)即可做成一个

猪丹毒分子生物学诊断技术

  常规细菌培养检测猪丹毒至少要3天,鉴定血清型大约要lo天,而这种PCR法可在5h内完成。它使用两步扩增法,先用高度特异性引物组M0101-M0102进行初步扩增之后,再添加4种特异性寡核苷酸引物组对4种不同血清型猪丹毒的16SrRNA序列进行扩增。     rRNA基因簇包括16SrRNA、23

分子生物学的应用意义

实践应用意义在应用方面,生物膜能量转换原理的阐明,将有助于解决全球性的能源问题。了解酶的催化原理就能更有针对性地进行酶的人工模拟,设计出化学工业上广泛使用的新催化剂,从而给化学工业带来一场革命。分子生物学在生物工程技术中也起了巨大的作用,1973年重组DNA技术的成功,为基因工程的发展铺平了道路。8

分子生物学课程教学讲义(四)

第四讲 DNA、RNA和蛋白质代谢  DNA是贮藏遗传信息的最重要的生物大分子。DNA分子中的核苷酸排列顺序不但决定了胞内所有RNA及蛋白质的基本结构,还通过蛋白质(酶)的功能间接控制了细胞内全部有效成份的生产、运转和功能发挥。贮藏在任何基因中的生物信息都必须首先被转录生成RNA,才能够得到表达。D

分子生物学课程教学讲义(三)

第三讲 蛋白质合成一.基因与基因表达的一般概念基因作为唯一能够自主复制、永久存在的单位,其生理学功能以蛋白质形式得到表达。DNA序列是遗传信息的贮存者,它通过自主复制得到永存,并通过转录生成mRNA,翻译生成蛋白质的过程控制所有生命现象。编码链(coding strand)又称sense stran

分子生物学常用实验技术(七)

(四) 电泳分析  通常合成的cDNA 第一链和第二链长度为350-6000 碱基,需进行1.4%碱性琼脂糖电泳。将第一链和第二链掺入测定管中的反应液先用酚抽提,乙醇沉淀,方法见本章(二)第二链合成中的9-12 步,一般第一链和第二链上样量相同。1. 标准分子量DNA 参照物的同位素标记(1) 通常

分子生物学常用实验技术(一)

第一章质粒DNA 的分离、纯化和鉴定第二章DNA 酶切及凝胶电泳第三章大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第四章RNA 的提取和cDNA 合成第五章重组质粒的连接、转化及筛选第六章基因组DNA 的提取第七章RFLP 和RAPD 技术第八章聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆第九章分子杂交技术第十章测

分子生物学常用实验技术(十五)

第十章测序技术  在分子生物学研究中,DNA 的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有Sanger 等(1977)发明的双脱氧链末端终止法和Maxam 和Gilbert(1977)发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大,但都是根据核苷酸在某一固定的点开始,随

分子生物学常用实验技术(十三)

2. 从RNA 合成单链cDNA 探针cDNA 单链探针主要用来分离cDNA 文库中相应的基因。用RNA为模板合成cDNA 探针所用的引物有两种: (1)用寡聚dT 为引物合成cDNA 探针。本方法只能用于带Poly(A)的mRNA,并且产生的探针极大多数偏向于mRNA 3'末端序列

分子生物学的研究方法有哪些

分子生物学(molecular biology ):从分子水平上研究生命现象物质基础的学科。研究细胞成分的物理、化学的性质和变化以及这些性质和变化与生命现象的关系,如遗传信息的传递,基因的结构、复制、转录、翻译、表达调控和表达产物的生理功能,以及细胞信号的转导等。分子生物学中最基本的技术是蛋白质的表

分子生物学常用试剂的配制(一)

  1.LB(Luria-Bertani)培养液、平板的配制   配制每升LB培养液,应在950ml去离子水中加入:   细菌培养用酵母提取物(bacto-yeastextract) 5g   细菌培养用胰化蛋白胨(bacto-tryptone)10g   NaCl 10g   

常用的分子生物学基本技术1

DNA重组技术(或基因工程)是20世纪生物学的伟大成就,并已渗透到生命科学包括医学 各个领域,为肿瘤的实验研究和临床诊断及治疗提供了崭新的技术和有用的工具。本附录扼要介绍在分子肿瘤学领域中常用的分子生物学基本技术及其在肿瘤研究中的应用,着重介绍它们的原理和应用。至于具体的技术方法和操作步骤可参阅《分

欧盟采用分子生物学发展育种技术

  对欧盟农户而言,最大的担忧之一来自日益严重的干旱极端环境,有时甚至直接威胁到一整年的农作物收成。2003年的欧洲干旱,造成欧盟农作物产量下降30%的,损失巨大。为此,欧盟第七研发框架计划(FP7)提供900万欧元的资助,总研发投入1170万欧元,由欧盟8个成员国英国(总协调)、法国、德国、意大利

细菌感染的分子生物学检测技术

(一)常用的分子生物学技术1.核酸杂交 常用的杂交技术有:斑点杂交、southern印迹、原位杂交、Northern印迹等。探针的种类有全染色体DNA探针、染色体克隆片段DNA探针、质粒DNA探针、rRNA基因探针、寡核苷酸探针等医`学教育网搜集整理。2.核酸扩增技术 核酸扩增技术是分子生物学中最具

常用的分子生物学基本技术(一)

核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补原成双链。杂交的

常用的分子生物学基本技术(三)

初步应用有关原位PCR技术应用成功的第一篇报道是对感染绵羊中枢神经系统visna病毒在绵羊脉络从一细胞中检查,通过PCR扩增,仅用150碱基对的短探针就可通过ISH检查到了细胞内的visna病毒。从开始在试管内细胞行PCR扩增后再涂片做ISH(原位杂交)检查,已发展到用福尔马林固定、石蜡切片的常规病

分子生物学产品常见问题分析

分子生物学产品常见问题分析问题原因解决办法DNA完全没有被内切酶切割1) 内切酶失活标准底物检测酶活性2) DNA不纯,含有SDS,酚,EDTA等内切酶抑制因子将DNA过柱纯化,乙醇沉淀DNA3) 条件不适(试剂、温度)检查反应系统是否最佳4) DNA酶切位点上的碱基被甲基化换用对DNA甲基化不敏感

分子生物学实验室常用设备

分子生物学是从分子水平上研究生物大分子的结构与功能,从而阐明生命现象本质的科学。其研究的主要内容为核酸(DNA,RNA)和蛋白质。来宝商城为广大食品、制药、科研、医疗、高校等领域的实验室用户提供*、质优价低的产品和完善的技术服务,始终坚持以用户为中心,打造更专业、更可靠、更的实验室电商。分子生物学实

常用的分子生物学技术包括哪些

分子生物学技术:PCR、分子克隆、核酸电泳、琼脂糖凝胶电泳测序、DNA, RNA 提取、转化外源DNA、体外转录、逆转录、cDNA文库构建、原位杂交、酵母双杂交、差减杂交、扣除杂交、蓝白斑筛选、抗生素筛选 、基因工程技术大部分都是依据分子生物学原理设计出来的。分子生物学的基本含义分子生物学是从分子水

细胞凋亡的分子生物学检测方法

细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程,染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ²+和Mg²+依赖的核酸内切酶作用下,在核小体单位之间被随机切断,形成180~200bp核小体DNA多聚体。DNA双链断裂或只要一条链

分子生物学在医学中的应用

1. 分子生物学的概述     分子生物学(molecular biology)是在分子水平研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的一门生命学科,是生物学的一个分支。分子生物学技术问世于20世纪80年代中期。这种以核酸、蛋白质等生物大分子为研究对象的新技术自发现以来,已经逐步成为医学领域不可或缺的

分子生物学常用贮存液的配制

  分子生物学常用贮存液的配制   1、30%丙烯酰胺溶液   【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml.用滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。

植物病毒的分子生物学方法检测

分子生物学检测法是通过检测病毒核酸( DNA,RNA) 来证实病毒的存在。由于是从核酸的水平来检测病毒, 所以比血清学方法的灵敏度更高, 可检测到皮克(pg)级甚至飞克(fg)级, 并且特异性更强; 检测病毒的范围更广, 对各种病毒、类病毒都可以检测, 并且可以进行大批量的样本检测。由于分子生物学检

分子生物学常用实验技术(page-1)

第一章质粒DNA 的分离、纯化和鉴定 第二章DNA 酶切及凝胶电泳 第三章大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重组质粒的连接、转化及筛选 第六章基因组DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技术 第八章聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆 第九章分

常用的分子生物学基本技术(二)

PCR-SSCP法 PCR-SSCP法是在非这性聚丙烯酰胺凝胶上,短的单链DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同构象,一个碱基的改变将影响其构象而导致其在凝胶上的移动速度改变。其基本原理为单链DNA在中性条件下会形成二级结构,这种二级结构依赖于其碱基组成,即使一个碱基的不同,也会形成不同的二

分子生物学实验室的构建

分子生物学作为基因工程的上游技术,其实验的成果和准确性将决定下游所有的步骤和终的实验结果。所以构建一个完备的分子生物学实验室是非常重要的,以下就让我们来看看构建一个分子生物学实验室需要哪些仪器。  1. 冰箱: 根据药品、试剂及多种生物制剂保存的需要,必须具备不同控温级别的冰箱,常使用的有:4℃、-

分子生物学常用实验技术(page-3)

分子杂交技术    互补的核苷酸序列通过Walson-Crick 碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA 分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DN

β甘露聚糖酶的分子生物学研究

关 于酶的分子特征和催化机制方面的研究报道还很少。吴襟等利用化学修饰的方法对诺卡氏菌形放线菌产的甘露聚糖酶的结构与功能进行了初步研究,证明了酶蛋白的巯基、酪氨酸残基及色氨酸残基是维持酶活性必需的基团。进一步研究证实蛋白内部的二硫键是影响该酶热稳定性的重要因素。Cann等从Thermoanaeroba

基因诊断的分子生物学基础(一)

基因诊断操作的对象为基因或其片段。基因是遗传学上的一个概念,是在染色体上占有一定的位置,表现一定功能的基本单位。基因的物质基础是脱氧核糖核酸(DNA)(有些病毒的基因是核糖核酸,RNA)。原核细胞(如细菌和病毒)的基因单位较小,其排布一般是连续的。真核细胞的基因一般较大,其排布是不连续的,它被称为插