分子生物学产品常见问题分析
分子生物学产品常见问题分析问题原因解决办法DNA完全没有被内切酶切割1) 内切酶失活标准底物检测酶活性2) DNA不纯，含有SDS，酚，EDTA等内切酶抑制因子将DNA过柱纯化，乙醇沉淀DNA3) 条件不适（试剂、温度）检查反应系统是否最佳4) DNA酶切位点上的碱基被甲基化换用对DNA甲基化不敏感的同裂酶酶解，重新将质粒DNA转化至dcm-，dam-基因型的细菌菌株5) DNA酶切位点上没有甲基化（如Dpn I）换用不同切割非甲基化位点的同裂酶消化DNA（如San3A I代替Dpn I)，重新将质粒转至dcm+ dam+菌株中扩增6) DNA位点上存在其它修饰将DNA底物与λDAN混匀进行切割验证7) DNA不存在该酶识别顺序换用其它的酶切割DNA或过量酶消化进行验证DNA切割不完全1) 内切酶活性下降用5-10倍量过量消化2) 内切酶稀释不正确用酶贮藏液或反应缓冲液稀释酶3) DNA不纯，反应条件不佳同上4) 内切酶识别的D......阅读全文
分子生物学产品常见问题分析
分子生物学产品常见问题分析问题原因解决办法DNA完全没有被内切酶切割1) 内切酶失活标准底物检测酶活性2) DNA不纯，含有SDS，酚，EDTA等内切酶抑制因子将DNA过柱纯化，乙醇沉淀DNA3) 条件不适（试剂、温度）检查反应系统是否最佳4) DNA酶切位点上的碱基被甲基化换用对DNA甲基化不敏感
石油产品馏程测定常见问题及原因分析
1.测定汽油馏程时，用棉花垫塞住量简口的目的？ 是为了防止冷凝管上凝结的水分落人量简内和减少馏出物的挥发。2.造成馏出液体积过多或过少的原因 （1）造成蒸馏出液体积过多的原因有： ①量取试油时液面高于lOOmL的标线，也就是油量多了; ②zui取试油时，试油温度比室温低;
石油产品馏程测定常见问题释疑
1.测定汽油馏程时，用棉花垫塞住量简口的目的？ 是为了防止冷凝管上凝结的水分落人量简内和减少馏出物的挥发。2.造成馏出液体积过多或过少的原因 （1）造成蒸馏出液体积过多的原因有： ①量取试油时液面高于lOOmL的标线，也就是油量多了; ②zui取试油时，试油温度比室温低;
石油产品馏程测定中常见问题释疑
石油产品馏程测定中常见问题释疑 1.测定汽油馏程时，用棉花垫塞住量筒口的目的？ 是为了防止冷凝管上凝结的水分落入量筒内和减少馏出物的挥发。 2.造成馏出液体积过多或过少的原因 （1）造成蒸馏出液体积过多的原因有： ①量取试油时液面高于lOOmL的标线，也就是油量多了;
水质分析常见问题
24、测定cod用密封管消解行不行? 答：可以的，但是建议使用敞口管消解。密封消解时如果密封盖没有拧紧，在颠倒摇匀的时候，可能会让溶液洒出，导致测值结果不准，甚至可能会造成人身伤害;部分水样在消解时会释放大量的气体，此种水样不可密封消解，如水里的次氯酸根太高，消解时会释放出大量氯气，密封消解会导
水质分析常见问题
21、BOD缓冲剂液化还能用吗?答：BOD缓冲剂时间稍长后会出现液化的现象，这是正常情况，不影响使用。22、仪器测总氮时空白和标液正常，测水样显示(9999)什么原因?答：仪器测标样没问题，仪器一般不会有问题，可能是水样浓度太高需要稀释，总氮直测范围0.05-10mg/L，275nm波长下的吸光度尽
水质分析常见问题
26、配总磷过硫酸钾，由于不好溶，加塞子水浴加热到了10秒左右，塞子不是很紧，过硫酸钾还能使用吗?答：如果进水不建议使用，可以做标准溶液试一试。过硫酸钾不好溶可以多搅拌或超声，不建议加热，控制不好温度过高后会导致过硫酸钾失效。另过硫酸钾最佳保存温度25-30℃，冷藏容易结晶。27、用3B做甲醛之前做
水质分析常见问题
13、请问做氨氮实验时，为什么加入N3试剂出现大量白色浑浊，加入N2试剂后下层红色上层青色不断有小气泡上升?答：钙镁离子高，应做絮凝沉淀预处理。水样带色或浑浊以及含其他一些干扰物质，影响氨氮的测定。因此，在分析时需做适当的处理。对较清洁的水，可采用絮凝沉淀发;对污染严重的水或工业废水，则用蒸馏法消除
水质分析常见问题
05、做总磷实验时，过硫酸钾结晶了，影响检测结果吗，该怎么解决?答：过硫酸钾配制时较难溶解，使用超声波帮助其溶解。如果没有超声波，尤其是冬季室温较低，可以加热使其溶解(温度不能超过60℃，否则过硫酸钾会分解)，放冷后会有析出，因为溶液为过饱和，再加热溶解是可以使用的，不影响总磷的测定。06、请问在做
水质分析常见问题
19、含氯酸钠废水COD如何检测?答：含氯酸钠废水的COD检测水样的原水COD很高，用户使用了氯酸钠来处理，氯酸钠具有氧化性，能降低COD，但这种废水，使用正常方法无法检测，经过查找资料及连华技术人员的建议，我们进行了方法测试，找到解决方案。1)取2.5ml水样，加入4.8ml的E试剂，注意速度不要
水质分析常见问题
水质分析常见问题水质分析又称水化学分析。即用化学和物理方法测定水中各种化学成分的含量。水质分析过程中常见的问题有哪些呢？01、BOD缓冲剂液化了还能用吗?答：BOD缓冲剂时间稍长后会出现液化的现象，这是正常情况，不影响使用。02、我们测氨氮，是以氮元素计还是以铵根离子计?答:氨氮是指水中以游离氨和铵
水质分析常见问题
11、请问定量器为什么吸不起来?答：定量器内有两个玻璃柱，吸液时弯头附近玻璃柱会将底部封死，溶液会吸上来;排液时下面玻璃柱会将底部封死让溶液从弯头排出。两个玻璃柱相当于两个单向阀。新定量器使用时吸不上来就是弯头附近玻璃柱底部没完全密封，可用手指轻弹几下或用洗耳球将溶液吸到弯头玻璃柱处就可以了。12、
水质分析常见问题
24、测定cod用密封管消解行不行?答：可以的，但是建议使用敞口管消解。密封消解时如果密封盖没有拧紧，在颠倒摇匀的时候，可能会让溶液洒出，导致测值结果不准，甚至可能会造成人身伤害;部分水样在消解时会释放大量的气体，此种水样不可密封消解，如水里的次氯酸根太高，消解时会释放出大量氯气，密封消解会导致消解
水质分析常见问题
15、测总磷，洗衣液稀释100倍，加热后水样变黄色，对测量结果有没有影响?答：消解后如果水样没有颜色，则不干扰实验结果。水中有颜色的物质会在消解时被消解成无色的，不影响测量结果。16、连华5B-3F水质测定仪如何恢复出厂设置?答：仪器在关闭的状态，一手按住“校正”键，一手打开开关，待屏幕上显示“99
芯片常见问题分析
1 芯片实验和定量PCR的优劣比较? 基因表达谱芯片实验可以对大量基因一次性进行定量研究,定量PCR则对大量基因需逐一进行定量研究。 2 在芯片制作过程中的PCR原液是否可以为客户保存? 可以抽干冷冻保存一年。 3 可否用DNA和芯片杂交? 不可以，因为芯片上的样品是cDNA而真核基因D
水质分析常见问题
08、请问BOD营养盐有黄色不溶物正常吗?答：正常，营养盐配好是淡黄色不完全溶解的溶液，用前需摇匀。09、请问N2试剂前一天配出来没什么问题，为什么放一天后变棕黄色变浑?答：N2试剂配好后应转移到聚乙烯瓶中密封、避光、低温储存。如果放到矿泉水瓶内，时间稍长会出现变质。如果未密封保存，空气中的有机气体
eds分析常见问题
Q1:能谱的缩写是EDS还是EDX？ 开始的时候能谱的缩写有很多，比如EDS，EDX，EDAX等。ED就是Energy Dispersive，后面因为X-ray Analysis和Spectrum这几个词的不同用法，导致了缩写的不同。而且相应的汉译也有很多，比如能量色散谱，能量散射谱等等。不过
PH计常见问题分析
常见问题及解决方案1.同一样品，两次测量的 pH值不一样？温度变化或样品本身发生了化学反应，都会引起 pH值的变化。所以，应尽量保持温度一致，并且避免化学反应。2.同一样品，同时在两台 pH计上测量，读数不一致？由于两台 pH计的校正条件不一样（如，不同时间做的校正），造成测量值有差异。所以要用同一
PCR克隆常见问题分析
1、克隆PCR产物的最优条件是什么？ 最佳插入片段：载体比需实验确定。1:1（插入片段:载体）常为最佳比，摩尔数比1:8或8:1也行。应测定比值范围。连接用5ul 2X连接液, 50ng质粒DNA,1Weiss单位的T4连接酶，插入片段共10ul。室温保温1小时，或4℃过夜。在
QPCR常见问题及其分析
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400
测序常见问题及其分析
1、PCR 产物测序时出现重叠峰 问题图1（模板中有碱基缺失，往往是单一位点（1-1）或两个位点（1-2）碱基缺失导致测序 结果移码） 解决方法：将PCR 产物克隆到质粒（如T 载体）中挑单克隆测序，或将PCR 产物进行PAGE 纯化（至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化）后再进
测序常见问题及其分析
1、PCR 产物测序时出现重叠峰 问题图1（模板中有碱基缺失，往往是单一位点（1-1）或两个位点（1-2）碱基缺失导致测序 结果移码） 解决方法：将PCR 产物克隆到质粒（如T 载体）中挑单克隆测序，或将PCR 产物进行PAGE 纯化（至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化）后再进
TA克隆常见问题分析
现象可能原因解决方案 转化后无菌落生长 感受态细胞已经失效用pUC18质粒进行转化，确认细胞的感受态效率。1ng pUC18质粒至少应得到1000个以上的转化子。如有问题，重新制备感受态细胞。 平板所用抗性不对pBS-T载体为amp抗性，工作浓度 100 ug/ml 连接中使用了不恰当的vector
QPCR常见问题及其分析
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为10
QPCR常见问题及其分析
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓
QPCR常见问题及其分析
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400
测序常见问题及其分析
1、PCR 产物测序时出现重叠峰问题图1（模板中有碱基缺失，往往是单一位点（1-1）或两个位点（1-2）碱基缺失导致测序结果移码）解决方法：将PCR 产物克隆到质粒（如T 载体）中挑单克隆测序，或将PCR 产物进行PAGE纯化（至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化）后再进行测序。问题图2（PCR 产物不纯，
石油产品分析
教材共分七章，包括课程引导知识、汽油质量检验、柴油质量检验、喷气燃料质量检验、润滑油质量检验、其他油品质量检验和生物燃料质量检验。各章前后分别设有学习指南(知识目标、能力目标)和本章小结、阅读材料与习题;书内附有20个油品质量检验记录(报告)单和操作规程评分标准。各油品测定试验方法，均采用国家或行
细胞培养常见问题分析
细胞常见问题分析1、冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放放37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可以超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另外冻管由液氨桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。2、可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使
PCR常见问题分析与对策
1.PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 2.假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白