关于免疫细胞的功能检测—细胞介导的细胞毒试验的介绍
一种细胞通过直接接触将另一种细胞杀伤的现象，称为细胞介导的细胞毒作用。在人体内有两种能直接杀伤靶细胞的细胞，即自然杀伤细胞(NK细胞)和特异性杀伤T细胞(特异性Tc细胞)。NK细胞存在于未受抗原刺激的正常人体，对某些受感染的细胞、肿瘤细胞或正常的未成熟造血细胞有杀伤活性。特异性Tc细胞存在于受过特异抗原刺激的机体内，能杀伤带特异抗原的感染细胞、异体细胞、自身组织细胞或肿瘤细胞。这两种杀伤细胞借不同的机制在抗感染免疫、抗肿瘤免疫、自身免疫病及移植免疫的过程中发挥重要作用。两种杀伤细胞在体外的功能检测结果可作为杀伤细胞功能强弱的指标。......阅读全文
磷酸钙介导的真核细胞转染实验
实验材料 真核细胞试剂、试剂盒 CaCl2HEPES缓冲液氯化铯PBS仪器、耗材 培养箱锥形管离心管实验步骤 1. 在转染前一天将细胞分入10 cm 组织培养平板中。当被转染的细胞是贴壁细胞，倍增时间为18~24 h时，一般按1：15从长满的培养皿中分细胞效果较好，转染的当天，细胞应在培养
细胞化学词汇无义介导的mRNA衰变
中文名称：无义介导的mRNA衰变英文名称：nonsensemediated mRNA decay;NMD定 义：真核生物细胞质中广泛存在的、 保守的信使核糖核酸(mRNA)质量监视系统。 降解异常的mRNA，如含有提前终止密码子(无义突变)、移码突变、剪接不完全(含部分内含子)、3′非翻译区过长的
T细胞介导的血小板输注无效
患者血小板输注无效是输血服务面临的一个挑战。针对血小板组织相容性抗原（MHC）、ABO血型抗原和人血小板抗原-1的抗体历来被认为是引起血小板输注无效的原因。然而，其他潜在的原因也可导致血小板输注无效。近期，在一项发表在Blood杂志上的研究中，研究组将健康小鼠与抗体抑制B细胞缺陷小鼠的血小板输注无效
磷酸钙介导的真核细胞转染实验
磷酸钙法 高效转染法 实验材料 真核细胞 试剂、试剂盒
细胞介导细胞毒作用检测法1：Cr释放法
4小时51Cr释放法检测CMC活性1）用51Cr铬酸钠标记靶细胞短期标记法1．用RPMI-1640培养液洗涤107靶细胞，去上清液。用0.5ml不含碳酸氢钠的完全培养液悬浮细胞。加入100μCi（3.7MBq）51Cr铬酸钠，37℃水浴中标记1小时，每5～10分钟摇晃一次，混匀细胞。2．如上用RPM
细胞介导细胞毒作用检测法3：LDH释放法
LDH释放法1）测定方法1．用含5％小牛血清的RPMI-1640培养液将靶细胞调整到5×104～2×105/ml，此浓度需根据情况预先标定。2．在96孔圆底细胞培养板中加入靶细胞，每孔加100μl。3个效应细胞自然释放对照孔不加靶细胞，只加100μl培养液。3．向各孔加100μl效应细胞，效应细胞与
细胞介导的细胞毒作用（CMC）检测法：效应细胞和靶...
细胞介导的细胞毒作用（CMC）检测法：效应细胞和靶细胞的制备CMC中效应细胞的制备：1）用淋巴细胞分离液分离PBMC：1、抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中，加2倍量磷酸盐（PBS）悬浮细胞。将此悬液小心加在淋巴细胞分离液上，400×g离心30分钟。2、离心后红细胞在管底，PBMC在血浆和淋巴细胞分离
关于免疫细胞的功能检测—细胞介导的细胞毒试验的介绍
一种细胞通过直接接触将另一种细胞杀伤的现象，称为细胞介导的细胞毒作用。在人体内有两种能直接杀伤靶细胞的细胞，即自然杀伤细胞(NK细胞)和特异性杀伤T细胞(特异性Tc细胞)。NK细胞存在于未受抗原刺激的正常人体，对某些受感染的细胞、肿瘤细胞或正常的未成熟造血细胞有杀伤活性。特异性Tc细胞存在于受过
腺病毒介导EGFP基因转染神经干细胞
摘要： 本实验从新生SD大鼠海马组织中分离神经干细胞，并通过观察携带EGFP基因的腺病毒（Ad/ EGFP）转染NSCS后EGFP表达规律及转染对NSCS的活力、增殖、分化等的影响，探讨EGFP作为NSCS的示踪标志物的可行性，为进一步的NSCS移植研究提供体外研究
细胞因子受体介导的通路的作用机制
细胞因子受体介导的通路称为JAK-STAT信号通路，基本步骤如下。首先，细胞因子的结合改变了受体的构象并导致二聚化，使各自结合的JAK相互靠近并发生交叉磷酸化，从而提高了它们的酪氨酸激酶结构域的活性。接着，活化的JAK磷酸化受体胞内段酪氨酸残基，使其成为STAT的锚定位点。STAT通过SH2结构域与
细胞介导细胞毒作用检测法：时间分辩荧光分析法
1）铕荧光检测法：标记靶细胞：1、EuCl3的制备：称取58.08mg Eu2O3，用少量1N HCl搅拌至溶解，再用1N NaOH调节pH至4.0。加双蒸水配成33～100mmol/L的保存液，4℃保存备用。2、用预冷的标记液将靶细胞浓度调整到5×106/ml，加50μl 10mg/ml硫酸葡聚糖
李懿：高亲和T细胞受体介导细胞治疗捕捉病毒免疫逃逸
6月18日，由生物谷举办的2016（第七届）细胞治疗国际研讨会在武汉欧亚国际交流酒店隆重召开。中科院广州生物医药与健康研究院李懿教授为我们带来了《高亲和T细胞受体介导的细胞治疗捕捉病毒免疫逃逸》的专题演讲。 李懿教授一开始用一段生动的视频为我们简单展示了T细胞对癌症细胞的杀灭过程。随后他介绍，
细胞介导细胞毒作用检测法6：荧光法检测CMC
荧光法检测CMC1．用含10％小牛血清和抗生素的RPMI-1640培养液将K562细胞配成1×105/ml浓度。用同样培养液将PBMC配成1×106/ml浓度。2．取96孔圆底细胞培养板，每孔加0.1ml K562细胞悬液；每孔加适量PBMC使效靶比为1：1～5：1，每种处理3个复孔；3个对照孔只加
Ⅱ型变态反应的抗体介导的细胞功能异常
患者体内存在抗某种受体的自身抗体，抗体与靶细胞表面的特异性受体结合从而导致靶细胞的功能异常。由于不结合补体，因而不破坏靶细胞亦无炎症反应。例如重症肌无力（myasthenia gravis），是由于患者体内存在抗乙酰胆碱受体的自身抗体，此抗体可与骨骼肌运动终板突触后膜的乙酰胆碱受体结合，削弱神经
发现介导癌细胞关键生命活动的蛋白质
蛋白质是生命的组成部分——在细胞内，蛋白质结合成大型的大分子复合物，即蛋白质的联合体，它们相互协作以完成特定的功能。大量的癌症研究集中在寻找这些蛋白质复合物的抑制剂。像mTOR和ATR这样的激酶，以及像端粒酶这样在肿瘤中过度表达的酶，都属于这类复合物。 有一些蛋白质(称为伴侣蛋白和共同伴侣蛋白
磷酸钙介导的质粒－DNA－转染真核细胞实验
实验材料 指数生长的哺乳动物细胞 试剂、试剂盒 CaCl2 氯喹 Giemsa 染液
PEG介导的动物细胞融合（cell－fusion）技术
细胞融合（cell fusion）或细胞杂交（cell hybridization）是指真核细胞通过介导和培养，两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。人工的细胞融合开始于20世纪50年代, 60年代到70代作为一门新兴的技术, 发展非常快, 应用范围也极为广泛, 除了同种类细胞间可以融合,
磷酸钙介导的质粒－DNA－转染真核细胞实验
实验材料 指数生长的哺乳动物细胞试剂、试剂盒 CaCl2氯喹Giemsa 染液甘油HEPES 盐缓冲液甲醇磷酸盐缓冲液丁酸钠TE质粒 DNA细胞生长培养基仪器、耗材 组织培养皿（60 mm) 或 12 孔板实验步骤 材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。稀释贮存液至所需浓度。CaCl
扬州大学成功研制“精原干细胞介导法”
来自扬州日报的消息，扬州大学动科学院博士生导师李碧春教授率领的攻关组经过4年的努力，成功研究出精原干细胞介导法，这一方法可广泛运用于家禽的转基因，而且成功率提高了10倍。专家介绍，国内外还没有这一高效转基因方法的报道，为首创性技术。目前，课题组已申报4项技术ZL，正进入公示期。 现在，转基因
磷酸钙介导的质粒－DNA－转染真核细胞实验
本方法中介绍的磷酸钙介导的质粒 DNA 转染贴壁细胞是对 Jordan 等建立的方法 (1996) 的改进。Jordan 等大大优化了磷酸钙介导的中国仓鼠卵巢细胞与人胚肾 293 细胞的转染方法。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料指数
细胞介导细胞毒作用检测法4：时间分辩荧光分析法
时间分辩荧光分析法1）铕荧光检测法标记靶细胞1．EuCl3的制备：称取58.08mg Eu2O3，用少量1N HCl搅拌至溶解，再用1N NaOH调节pH至4.0。加双蒸水配成33～100mmol/L的保存液，4℃保存备用。2．用预冷的标记液将靶细胞浓度调整到5×106/ml，加50μl 10mg/
脂质体介导的真核细胞转染实验——哺乳动物细胞选择标记
哺乳动物细胞的选择标记实验材料哺乳动物实验步骤一、腺苷脱氨酶（ADA） 1. 选择条件：培养液中加10 μg/ml 胸腺嘧啶脱氧核苷，15 μg/ml 次黄嘌呤，4 μmol/l 腺嘌呤-9-β-D-呋喃木糖苷（Xyl-A），及0.01~0.3 μmol/l 2‘-脱氧助间型霉索（dCF）。胎牛血
中性粒细胞驱动非常规T细胞介导抗肿瘤免疫机制
近日，来自意大利Humanitas University的Alberto Mantovani和Sebastien Jaillon在Cell杂志上发表文章Neutrophils Driving Unconventional T Cells Mediate Resistance against Mu
Diabetes：脂滴介导的细胞器协作调控脂肪细胞能量代谢
来自清华大学生命学院，清华-北大生命科学联合中心的研究人员发表了题为“Coordination Among Lipid Droplets, Peroxisomes and Mitochondria Regulates Energy Expenditure Through the CIDE-ATG
细胞介导细胞毒作用检测法5：用MTT检测法测定CMC
用MTT检测法测定CMC1． Fen细胞培养于含10％小牛血清的RPMI-1640培养液中，在625px2培养瓶中生长到接近汇合。用含0.05％胰蛋白酶，0.02％ EDTA的PBS消化细胞5分钟，洗涤后，用细胞培养液将细胞配成1×105/ml。2． 取96孔细胞培养板，每孔加0.1ml细胞悬液，在
简述激素细胞膜受体介导的信号转导途径
细胞表面受体可以分成四大类，各自不同（1）离子通道型受体：结合配体后通过调控离子通道的开放，使细胞内外离子流进/出，完成跨膜信号转导（2）g蛋白偶联型受体通过胞内偶联的g蛋白，激活下游信号分子（3）催化性型受体二聚化，激活胞内激酶活性，传递信号（4）酶偶联型受体变构激活胞内区偶联的酶（如酪氨酸激酶）
磷酸钙介导的真核细胞转染实验——高效转染法
实验材料真核细胞试剂、试剂盒完全培养液TEBES仪器、耗材培养箱平板实验步骤1. 转染前一天接种呈指数生长的细胞，密度为5×105/10 cm 平板。加10 ml 完全培养液，在开始转染时细胞数应＜106/平板，以留足够供细胞扩增至少2倍的表面积。2. 用TE缓冲液稀释质粒DNA至1 μg/μ
科学家发现介导肿瘤细胞免疫逃逸的重要分子
细胞毒性T淋巴细胞（CTL）在识别肿瘤细胞后，释放穿孔素（Perforin）和颗粒酶（Granzymes）损伤肿瘤细胞的细胞膜并诱导其凋亡。然而，肿瘤细胞可通过修复细胞膜的损伤等途径逃避CTL的杀伤，但其修复膜损伤的具体机制尚不明确。 近日，来自基因泰克（Genentech）的研究人员发现内吞
peg介导的细胞融合率受哪些因素影响
细胞膜有内外两层，细胞融合首先发生在外层，然后再到内层，由此就出现了两种融合通道，细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时，只出现一种融合通道，即导致融合的基因只能在病毒中找到，而在目标细胞中却找不到。通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程，需要EFF-1出现在两个相互融合的
抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用是什么意思？
抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用是指表达IgGFc受体的NK细胞、巨噬细胞和中性粒细胞等，通过与已结合在病毒感染细胞和肿瘤细胞等靶细胞表面的IgG抗体的Fc段结合，而杀伤这些靶细胞的作用。