研究揭示细菌逆转录酶介导新型免疫机制
近日，中国科学院武汉病毒研究所团队，揭示了新型细菌抗病毒防御系统DRT4的工作机制。研究发现，在遭遇噬菌体入侵时，带有DRT4防御系统的细菌通过“自杀式防御”策略，牺牲被感染个体以保全群体。这一防御系统的启动“钥匙”来自于病毒自身编码的一种核酸结合蛋白。 研究团队综合运用生物化学、生物物理学及微生物学等多种研究手段，从分子层面解析了DRT4系统的防御机制。团队发现，该机制具有独特的“无模板”DNA合成能力，尽管DRT4被定义为原核生物逆转录酶家族，但其具有不依赖模板合成随机序列的单链DNA的酶活性。这一非典型聚合酶活性是其执行防御功能的核心基础。同时，DRT4上高度保守的酪氨酸残基（Tyr125）作为DNA合成的起始位点，揭示了其利用蛋白作为引物合成单链DNA的机制。 研究发现，病毒蛋白为系统“触发器”，T5噬菌体编码的单链DNA 3‘末端结合蛋白ORF55，是激活防御的“扳机”。在未感染状态下，细菌体内的3‘—5‘核酸......阅读全文
研究揭示细菌逆转录酶介导新型免疫机制
近日，中国科学院武汉病毒研究所团队，揭示了新型细菌抗病毒防御系统DRT4的工作机制。研究发现，在遭遇噬菌体入侵时，带有DRT4防御系统的细菌通过“自杀式防御”策略，牺牲被感染个体以保全群体。这一防御系统的启动“钥匙”来自于病毒自身编码的一种核酸结合蛋白。 研究团队综合运用生物化学、生物物理学及
细菌第六型分泌系统介导的杀细菌效应的新研究
2013年10月，著名的'细胞'杂志社(Cell Press)接收了来自南开大学生命科学院博士、哈佛大学医学院博士后研究员傅暘博士的最新科研成果--"转座子突变测序法霍乱弧菌肠道定殖必需基因研究以及由此揭示的宿主体内细菌第六型蛋白分泌系统介导的杀细菌作用的激活"，并作为12月主推高光文章发表
Nature：CRISPR/Cas系统介导细菌躲避宿主免疫系统
CRISPR/Cas（规律成簇的间隔短回文重复）是细菌用来抵御病毒的一个基因系统，该系统在基因工程领域的应用潜力巨大，由此吸引了许多科学家的注意。而埃默里大学（Emory University）的研究人员发现，这一系统还能帮助细菌躲避哺乳动物的免疫系统，相关研究论文刊登在了近期出版的《自然》（N
AEM：趋磁细菌介导的过高热或可有效抑制耐药性细菌感染
随着金黄色葡萄球菌对抗生素的耐药性越来越强，科学家们迫切需要开发出可以有效杀灭耐药性菌株的新方法，近日一项刊登于国际杂志Applied and Environmental Microbiology上的研究论文中，来自中国科学院的研究人员在啮齿类动物中进行实验，通过利用磁性纳米晶体产生过高热（Hy
邵峰课题组破解细菌感染介导自噬的机制
2019年7月18日，北京生命科学研究所邵峰课题组在Cell杂志发表了题为A Bacterial Effector Reveals the V-ATPase-ATG16L1Axis that Initiates Xenophagy的研究文章，通过研究沙门氏菌III型分泌系统效应蛋白SopF，
研究揭示喹诺酮抗性蛋白介导的细菌耐药机制
细菌抗生素耐药性是预防传染病的重大威胁，通常是由质粒转移或基因突变引起的。当细菌暴露于抗生素环境中会通过提高细菌的突变率筛选出适应抗生素环境的基因突变，结果导致临床环境中耐药菌株的出现。质粒驱动抗生素抗性基因的水平转移，引发细菌耐药性的产生。此外，质粒和细菌染色体之间的相互作用会影响抗生素抗性的
细菌感染触发VATPase复合物招募ATG16L1，进而介导细菌自噬
2019年7月18日，北京生命科学研究所邵峰课题组在Cell发表了题为A Bacterial Effector Reveals the V-ATPase-ATG16L1Axis that Initiates Xenophagy的研究文章，通过研究沙门氏菌III型分泌系统效应蛋白SopF，揭示了细
逆转录酶原位－PCR－实验
实验方法原理 原位 PCR 仪，盖玻片，培养箱，湿盒，RT-PCR 试剂盒，Permount 实验材料 组织样品和细胞培养物
逆转录酶的活性介绍
①RNA指导的DNA聚合酶活性；以RNA为模板，催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物，多为色氨酸的tRNA，在引物tRNA3′－末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性，因此没有校正功能，所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比较高 。②RNase H活性；
逆转录酶的活性特点
①DNA聚合酶活性；以RNA为模板，催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物，多为赖氨酸的tRNA，在引物tRNA 3'－末端以5'→3'方向合成DNA。反转录酶中不具有3'→5'外切酶活性，因此没有校正功能，所以由反转录酶催化合成的DNA出错率比
关于逆转录酶的简介
多反转录酶都具有多种酶活性，主要包括以下几种活性 。 ①RNA指导的DNA聚合酶活性；以RNA为模板，催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物，多为色氨酸的tRNA，在引物tRNA3′－末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性，因此没有校正功能，所以由反
逆转录酶原位－PCR－实验
实验方法原理 原位 PCR 仪，盖玻片，培养箱，湿盒，RT-PCR 试剂盒，Permount实验材料 组织样品和细胞培养物试剂、试剂盒 Nuclear Fast Red甲醛缓冲液检测溶液DEPC 处理的水PBSKH2P04二甲苯乙醇牛血清白蛋白SSC NBT BCIP 显色剂胃蛋白酶DNA
逆转录酶原位－PCR－实验
这一部分介绍了一种原位 PCR，特别是逆转录酶原位 PCR 的简略方法。详细讨论了其中的每个实验程序。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。实验方法原理原位 PCR 仪，盖玻片，培养箱，湿盒，RT-PCR 试剂盒，Permount实验材料组织样品和细胞培养物试剂、试剂盒Nuc
逆转录酶的合成步骤
1、使用前每个组份轻轻混匀，然后2000rpm离心20s2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管，依次加入2～5μgRNAnμL3、65℃保温5min，然后冰浴5min；4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份RNase抑制剂（40u/μL）0.5μL10×M-MLVReactionBuff
逆转录酶的作用过程
逆转录酶的作用是以dNTP为底物，以RNA为模板，tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物，在tRNA3'-末端上，按5'→3'方向，合成一条与RNA模板互补的cDNA单链，它与RNA模板形成RNA-cDNA杂交体。随后又在反转录酶的作用下，水解掉RNA链，再以cDNA为模板合
逆转录酶的特点和用途
逆转录酶 是一种依赖RNA的DNA聚合酶。此酶首先是1970年从鼠白血病毒和劳氏肉瘤病毒中发现的。这两个课题组的论文都发在了同一期的《Nature》杂志上。最普遍使用的是从鸟类骨髓母细胞瘤病毒（AMV）分离出来的。活性：一种可以有效地将mRNA反转录成DNA的酶，其产物称为cDNA(compleme
武汉物数所等细菌双组分系统介导pH调控机制研究获进展
双组分信号转导系统（Two-component signal transduction system，TCS）是细菌体内最重要的信号转导系统，调控着细菌的大部分生命活动。作为潜在的新型抗菌药物靶标，细菌的TCS长久以来都是相关领域研究的热点。 TCS由组氨酸激酶（Histidine Kin
武汉物数所细菌双组分系统介导的pH调控机制研究获进展
双组分信号转导系统（Two-component signal transduction system，TCS）是细菌体内最重要的信号转导系统，调控着细菌的大部分生命活动。作为潜在的新型抗菌药物靶标，细菌的TCS长久以来都是相关领域研究的热点。沙门氏菌侵染宿主细胞示意图沙门氏菌中，受pH调控的组氨
补体介导的细胞毒实验——补体介导法
细胞毒实验可应用于：（1）检查细胞膜抗原；（2）鉴定抗体的特异性。实验方法原理带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料（例如：伊红-Y、台盼蓝）可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色，故可用于指示死
关于AMV逆转录酶的基本介绍
amv逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒，其方法由houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157kd的αβ全酶。amv逆转录酶经高度纯化，完全无核酸酶污染。amv逆转录酶可用于cdna合成，也可用于rna和dna的双脱氧测序。amv逆转录酶以总rnd或polya+rnd为模板，具有以r
关于逆转录酶的合成步骤介绍
1、使用前每个组份轻轻混匀，然后2000rpm离心20s 2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管，依次加入2～5μgRNAnμL 3、65℃保温5min，然后冰浴5min； 4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份 RNase抑制剂（40u/μL）0.5μL 10×M-MLV
逆转录酶抑制剂的作用
NRTI均为DNA的天然底物的衍生物,其中AZT和d4T为脱氧胸苷的类似物；ddC和3TC为脱氧胞苷的类似物；ddI和TNF为脱氧腺苷的类似物；ABC为脱氧鸟苷的类似物,均需在细胞内转化为活性的三磷酸衍生物,通过胸苷激酶、胸苷酸激酶的磷酸化作用,形成活化型三磷酸体(AZTTP)。AZTTP为HIV-
逆转录酶抑制剂的应用
(1)对于抗病毒治疗失败者,病毒反弹缘于患者的依从性差和对药物的耐受性,因此及时应用其他逆转录酶抑制剂更换,为选择适宜的替代药,确定药物相关不良反应是由哪种药所致尤为重要。(2)鉴于对胎儿的安全性数据尚不充分,逆转录酶抑制剂对幼、婴儿可能有不利的影响,并通过乳汁分泌,因此对妊娠、哺乳期妇女慎用；对儿
逆转录酶抑制剂的分类
1.核苷类逆转录酶抑制剂上市的HIV-1核苷类逆转录酶抑制剂(NRTI)按结构可以分为三类 :(1)2',3'-二脱氧核苷类在糖基部分被修饰,包括:AZT,d4T和ABC；(2)2',3'-二脱氧核苷类在糖基部分没有被修饰,包括:ddI和ddC；(3)2'
逆转录酶抑制剂的作用
NRTI均为DNA的天然底物的衍生物,其中AZT和d4T为脱氧胸苷的类似物；ddC和3TC为脱氧胞苷的类似物；ddI和TNF为脱氧腺苷的类似物；ABC为脱氧鸟苷的类似物,均需在细胞内转化为活性的三磷酸衍生物,通过胸苷激酶、胸苷酸激酶的磷酸化作用,形成活化型三磷酸体(AZTTP)。AZTTP为HIV-
关于逆转录酶的医学发展介绍
细胞的衰老和老化被认为和染色体末端由重复的DNA（TTAGGG）序列所组成的端粒序列的丢失相关。随着细胞的每次分裂，端粒会丢失50～200bp，当端粒缩短到一定程度就不再保护染色体免受重组或降解，细胞分裂的控制点就此得到信号而产生作用，可使细胞分裂停止并进入老化过程致细胞死亡。端粒长度的维持即重
逆转录酶抑制剂的分类
1.核苷类逆转录酶抑制剂上市的HIV-1核苷类逆转录酶抑制剂(NRTI)按结构可以分为三类 :(1)2',3'-二脱氧核苷类在糖基部分被修饰,包括:AZT,d4T和ABC；(2)2',3'-二脱氧核苷类在糖基部分没有被修饰,包括:ddI和ddC；(3)2',3
病毒介导基因转移
病毒介导基因转移：前述的化学和物理方法都是通过传染方式基因转移。病毒介导基因转移（viral mediatedgene transfer）是通过转换方式完成基因转移，即以病毒为载体（vector），将外源目的基因通过基因重组技术，将其组装于病毒上，让这种重组病毒去感染受体宿主细胞，这种病毒称为病毒运
Science：有比CRISPRCas更安全的技术吗？基于retroelement的基因组编辑工具
在一篇展望文章中，Stephen Tang和Samuel Sternberg讨论了基于retroelement的基因编辑作为CRISPR-Cas方法的一种更安全的替代方法。 精确的基因组编辑技术改变了现代生物学。可编程DNA靶向的能力已经迅速提高，这主要是由于细菌RNA引导的CRISPR-Ca
关于逆转录酶的注意事项介绍
在进行RT反应之前，应考虑以下几个方面： 1、RNA 成功的cDNA合成来自高质量的RNA，高质量的RNA至少应保证全长并且不含逆转录酶的抑制剂，如EDTA或SDS。在提取RNA的过程中，要特别防止RNase的污染，同时在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。R