甘蔗与滇蔗茅远缘杂交染色体遗传规律获揭示

近日,广东省科学院南繁种业研究所甘蔗育种研究室联合福建农林大学教授邓祖湖团队,综合运用分子标记与基因组原位杂交(GISH)技术,系统揭示了甘蔗与近缘野生种滇蔗茅杂交后代的染色体传递规律。相关成果在线发表于国际期刊Plants。 研究团队依托国家糖料产业技术体系等项目支持,首先基于nrDNA-ITS区域的SNP位点,开发了四引物ARMS-PCR分子标记,能够快速、准确鉴定杂交后代真实性;随后利用GISH技术对后代染色体构成进行可视化分析。 GISH结果显示,甘蔗与滇蔗茅(2n=30)的F?代杂交种含有15条滇蔗茅染色体和40条热带种染色体,表明其染色体传递模式为“n+n”。值得注意的是,由于F1代花粉完全不育,研究以F1代为母本进行回交,发现整套滇蔗茅染色体(15条)完整传递至BC1后代,呈现出非常规的“2n+n”传递模式。 该研究为理解甘蔗属远缘杂交中的染色体遗传机制提供了新视角,同时为滇蔗茅种质在甘蔗育种中的高效利用......阅读全文

染色体荧光原位杂交技术简介

一、定义:在细胞遗传学,分子生物学和免疫学相结合基础上发展的一种新科学,他利用已知的核酸序列作为探针,以荧光素直接标记或以非放射性物质标记后与靶DNA结合,在通过荧光素标记,最后在荧光显微镜下观察杂交信号,从而对标本中的待测核苷酸进行定性,定位和定量分析。二、原理:利用DNA变性后双链解开变成单链,

荧光原位杂交染色体分析技术

  FISH是上世纪80年代中期发展起来并直到现在仍在不断改进、完善的技术。其基本过程是:首先制成染色体标本,和与所感兴趣的目的基因(或染色体片段)互补的探针,并在探针上标记荧光色素,当探针与染色体标本上的靶序列杂交后,利用荧光显微镜观察荧光信号从而获得染色体核型的信息。此技术具有灵敏度强、背景低、

荧光原位杂交的染色体分析

荧光原位杂交的染色体分析(一)标本的制备1.室温下,依次用70%、90%和100%的乙醇脱水5min。2.空气干燥载玻片。3.若短期使用,载玻片可在室温贮存数天。若载玻片要长期保存,应在室温下过夜使组织“老化”(aged),然后放入容器中,该容器密封于含干燥剂的塑料袋内,-70℃保存。根据作者的经验

荧光原位杂交染色体分析技术

  FISH是上世纪80年代中期发展起来并直到现在仍在不断改进、完善的技术。其基本过程是:首先制成染色体标本,和与所感兴趣的目的基因(或染色体片段)互补的探针,并在探针上标记荧光色素,当探针与染色体标本上的靶序列杂交后,利用荧光显微镜观察荧光信号从而获得染色体核型的信息。此技术具有灵敏度强、背景低、

染色体荧光原位杂交和染色体核型分析一样吗

  从定义来看:  荧光原位杂交方法是一种物理图谱绘制方法,使用荧光素标记探针,以检测探针和分裂中期的染色体或分裂间期的染色质的杂交。  染色体核型分析是将待测细胞的染色体依照该生物固有的染色体形态结构特征,按照一定的规定,人为的对其进行配对、编号和分组,并进行形态分析的过程。  从运用场景来看: 

中期染色体和间期核的原位杂交实验

实验材料含有人类中期染色体的载玻片或盖玻片试剂、试剂盒变性液乙醇Cot-1 DNA非同位素标记的 DNA 探针去离子甲醜胺基本杂交混合液甲酰胺SSC生物素检测溶液DAPI适当的抗褪色剂仪器、耗材玻片染色缸水浴箱相差显微镜盖玻片橡皮泥湿盒干燥的玻片盒指甲油实验步骤展开

关于检测染色体和染色体组畸变—荧光原位杂交(FISH)技术的基本介绍

  荧光原位杂交最早由Bauman(1980)建立,后由Lucas(1989)首先应用于染色体畸变分析。其原理是按检测目标准备恰当的DNA序列作为探针,并用生物素标记,对载玻片上待测标本中的DNA杂交,最后通过杂交位点的荧光观察染色体结构或数目的改变。应用特殊染色体和染色体某区域的荧光探针可在体内检

用比较基因组杂交描述染色体结构异常实验

实验方法原理比较基因组杂交(CGH)是一种能够在一步全基因组筛查程序,描述G带不能发现的细胞遗传物质增加或减少的分子细胞遗传学技术。CGH优于进行全染色体涂染(wcp)的常规荧光原位杂交(FISH)和多色FISH之处,是它不仅能够识别增加的未知片段的染色体来源,而且还可将该片段定位于特定的染色体区带

微阵列—比较基因组杂交技术检测染色体异常

【摘要】近年微阵列一比较基因组杂交(microarraycomparativegenomichybirdization,microarray.CGH)技术被应用到临床细胞遗传学领域。该技术是选择DNA特殊片段作为靶,固化在载体上,形成密集、有序的分子微阵列。然后,从测试标本中提取DNA,将测试DNA

用比较基因组杂交描述染色体结构异常实验(二)

二、正常男性中期染色体标本的制备1.准备一个封闭环境,其相对湿度约55%(可在50%〜60%变化),温度24〜26.5℃。2.将巴斯德吸管置于玻璃载片上方2〜4in处,让一滴细胞悬液滴在玻片的左侧。然后迅速将第二滴细胞悬液滴在玻片右侧(见注释7)3.在固定液全部蒸发前,将玻片浸入盛有新鲜固定液的染色

用比较基因组杂交描述染色体结构异常实验(一)

实验方法原理 比较基因组杂交(CGH)是一种能够在一步全基因组筛查程序,描述G带不能发现的细胞遗传物质增加或减少的分子细胞遗传学技术。CGH优于进行全染色体涂染(wcp)的常规荧光原位杂交(FISH)和多色FISH之处,是它不仅能够识别增加的未知片段的染色体来源,而且还可将该片段定位于特定的染色体区

用比较基因组杂交描述染色体结构异常实验(三)

六、中期染色体标本的变性1.在染色缸中加入大约50mL变性液,将染色缸放于75〜76℃水浴中。预热变性液使其温度达到(73±2)℃。2.从-20℃冰箱中取出实验所需的标本,室温下系列乙醇脱水,各2min。3.室温干燥片子(5min),或在实验室抽风橱中微风吹过标本使标本干燥。4.在37〜40℃电热板

甘蔗与滇蔗茅远缘杂交染色体遗传规律获揭示

  近日,广东省科学院南繁种业研究所甘蔗育种研究室联合福建农林大学教授邓祖湖团队,综合运用分子标记与基因组原位杂交(GISH)技术,系统揭示了甘蔗与近缘野生种滇蔗茅杂交后代的染色体传递规律。相关成果在线发表于国际期刊Plants。  研究团队依托国家糖料产业技术体系等项目支持,首先基于nrDNA-I

遗传发育所在小麦远缘杂交及染色体工程研究中取得进展

  早在上个世纪80年代,两位著名的小麦遗传学家Moshe Feldman和Ernest R. Sears曾提出“未来的谷物改良寄希望于野生基因资源的利用”。小麦育种的最大瓶颈是缺乏新的、可用的遗传资源。为了拓宽与改良小麦遗传资源,中国科学院遗传与发育生物学研究所韩方普研究组一直致力于小麦与野生近缘

微阵列中期分裂相染色体的比较基因组杂交(CGH)-实验

实验方法原理 实验材料 高分子质量基因组DNA EcoR I 或 Dpn II试剂、试剂盒 SSCcDNA阵列dNTP 混合液 dCTP 酵母 tRNADNA 聚合酶 I仪器、耗材 Qiaquick PCR 纯化试剂盒 BioPrime 标记试剂盒Micrcon 30 滤器杂交炉Maxiprep D

微阵列中期分裂相染色体的比较基因组杂交(CGH)-实验

染色体 CGH 的独特优点在于它的全基因筛查功能,与检测单一靶 DNA 剂量改变的低通量方法,如 Southern 分析、PCR 和荧光原位杂交(FISH) 相比,速度显著提高且省力。目前染色体 CGH 是一种比较完善的分子细胞遗传学方法,但是它的两个缺陷限制其作为一种综合性筛查工具的应用。来源:《

多色荧光原位杂交方法同时检测人精子染色体数目畸变...

多色荧光原位杂交方法同时检测人精子染色体数目畸变和结构畸变背景与目的:建立可以同时检测人精子染色体数目畸变和结构畸变的多色荧光原位杂交技术。材料与方法:使用2条1号染色体探针(着丝粒和末端探针),2条18号染色体着丝粒探针,分别用地高辛或生物素标记,与人精子核dna进行荧光原位杂交,用cy3-链亲和

荧光原位杂交用于基因染色体定位和基因图谱绘制

  目前应用的基因定位的主要方法是FISH。分离到的DNA序列直接通过FISH,同时采用多种颜色荧光素的标记探针,结合中期染色体和间期细胞方面的信息,可快速确定一-系列DNA序列之间的相互次序和距离,完成基因制图。用不同颜色炎光索标记2个不同的DNA链,而且他们在染色体上的距离大于1Mbp时,可以依

关于荧光原位杂交用于染色体数目与结构异常的介绍

  在细胞遗传学检在中,重复序列的探针应用最多,包括a卫星DNA探针、β卫星DNA探针和经典卫星DNA (elassic -stllite DNA )探针。a卫星DNA探针主要检测人染色体的着丝粒。β卫星DNA探针位于顶端着丝粒染色体及染色体的异染色质周围。经典卫星DNA探针有AATCG短片段重复,

多色荧光原位杂交方法同时检测人精子染色体数目畸变

背景与目的:建立可以同时检测人精子染色体数目畸变和结构畸变的多色荧光原位杂交技术。材料与方法:使用2条1号染色体探针(着丝粒和末端探针),2条18号染色体着丝粒探针,分别用地高辛或生物素标记,与人精子核dna进行荧光原位杂交,用cy3-链亲和素检测生物素探针杂交信号;用与fitc结合的抗地高辛抗体检

基本方案2-G-显带后的染色体原位杂交实验

实验材料未封片或 Entdlan 封片 G 显带的中期细胞试剂、试剂盒二甲苯浓度梯度乙醇丙酮 甲醇固定剂2 X SSC仪器、耗材全染色体涂染探针Coplin 缸实验步骤

利用单拷贝基因组探针及染色体彩绘方法荧光原位杂交

            实验材料 SSC D-PBSA 糖原 RNase 多聚甲醛 甲酰胺 试剂、试剂

利用单拷贝基因组探针及染色体彩绘进行荧光原位杂交

实验材料SSCD-PBSA糖原RNase多聚甲醛甲酰胺试剂、试剂盒固定液乙醇杂交缓冲液标记探针橡胶乳黏剂封固剂实验步骤含有重复序列探针的沉淀:大分子量黏粒探针往往含有重复序列,如果在杂交前不能封闭这些序列,将导致严重的非特异性杂交背景。人 Cot1 DNA 富含重复序列,可对黏粒的重复序列产生竞争性

利用单拷贝基因组探针及染色体彩绘进行荧光原位杂交

            实验材料 SSC D-PBSA 糖原 RNase 多聚甲醛 甲酰胺 试剂、试剂

单拷贝基因组探针及染色体彩绘方法进行荧光原位杂交

            实验材料 SSC D-PBSA 糖原 RNase 多聚甲醛 甲酰胺 试剂、试剂

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

区别:研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA,而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

区别:研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA,而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

区别:研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA,而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段

分子杂交技术Northern杂交的简介

  Northern杂交与Southern杂交很相似。主要区别是被检测对象为RNA,其电泳在变性条件下进行,以去除RNA中的二级结构,保证RNA完全按分子大小分离。变性电泳主要有3种:乙二醛变性电泳、甲醛变性电泳和羟甲基汞变性电泳。电泳后的琼脂糖凝胶用与Southern转移相同的方法将RNA转移到硝

杂交育种的杂交方式介绍

单杂交即两个品种间的杂交(单交)用甲×乙表示,其杂种后代称为单交种,由于简单易行、经济,所以生产上应用最广,一般主要是利用杂种第一代。复合杂交即用两个以上的品种、经两次以上杂交的育种方法。如果单交不能实现育种所期待的性状要求时,往往采用复合杂交,其目的在于创造一些具有丰富遗传基础的杂种原始群体,才可