著名华人教授PNAS发表癌细胞遗传性状新发现
来自北京大学生科院,哈佛大学等处的研究人员发表了题为“Reproducible copy number variation patterns among single circulating tumor cells of lung cancer patients”的文章,发现血液中的肿瘤细胞尽管存在遗传特性的差异,但是同一位患者的癌细胞中遗传变异存在相似性。 这一研究成果公布在《美国国家科学院院刊》(PNAS)杂志上,文章的通讯作者分别是著名的华人科学家谢晓亮教授,以及北京大学的白凡副研究员和王洁教授。其中谢晓亮教授为美国华裔院士,是单分子生物物理化学和相干拉曼散射显微成像的开拓者之一,其研究组在离体实验及活细胞内生物系统在单分子水平的动力学研究方面取得了不少重要的成果,尤其是单分子荧光显微技术,比如相干拉曼显微成像技术(CARS、SRS)等方面成果斐然。 去年年底Science列出的2013年六大值得关......阅读全文
原代细胞分离技术
1. 悬浮细胞的分离方法 1) 将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。 2) 去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分钟。此步重复两次。 3) 用培养基重悬,调整适当细胞浓度后分瓶培养。 4) 如选用悬液中某种细胞,
流式细胞技术
流式细胞技术(flow cytometry,FCM)是一项集激光技术、光电测量技术、计算机技术、流体力学以及细胞免疫荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技细胞分析技术。概括地说,流式细胞技术就是对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数的、快速的、准确的定性分析和分选的技术。该技术的
免疫细胞电镜技术
免疫细胞化学技术为在细胞水平上研究免疫反应做出了贡献,但由于光学分辨率的限制,不可能从细胞超微结构水平观察和研究免疫反应。因此,Singer于1959年首先提出用电子密度较高的物质铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,为在细胞超微结构水平研究抗原 抗体反应提供了可能。在此基础上,相继发展了杂交抗
红细胞分析技术
现行的血细胞分析仪一般可对白细胞进行分群或分类,但是对红细胞的体积大小和每个红细胞内血红蛋白含量的多少进行分析和分群则是更加特殊的技术。早在上世纪80年代开始Technicon公司采用激光分析技术制作的血液分析仪就可以做到这些,目前BAYERADVIA120也是唯一可对红细胞的体积和色素含量进行
细胞瞬时转染技术
原理:通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。应用:观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(短时间即可进行观察,但效应会很快丢失)。一般流程:1)细胞接种:转染实
原代细胞分离技术
实验概要本文介绍了原代细胞分离技术,包括悬浮细胞的分离方法和实体组织材料的分离方法。实体组织材料的分离方法有机械分散和消化分离两种。实验步骤1. 悬浮细胞的分离方法 1) 将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。 2) 去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的P
原代细胞复苏技术
. 原代细胞冻存复苏技术简介在ELISPOT检测的应用中,往往需要用到冻存的淋巴细胞样品作为检测细胞。由于ELISPOT检测的是细胞的免疫功能,不仅仅需要保持细胞的存活率,而且还要保证细胞的功能不发生变化。传统的细胞冻存方法通常是为了保存细胞株,对细胞存活率的要求不高,更没考虑保持细胞原有的免疫状态
细胞化学技术组成
细胞化学技术不是单一的技术,而是一整套有关联的技术,包括酶细胞化学技术,免疫细胞化学技术,放射自显影技术,示踪细胞化学技术等。
血细胞分离技术
实验概要血细胞是免疫学研究或临床检验常用的检测对象或试验材料,分离和纯化血细胞是实验室中的基本技术。目前分离血细胞的技术大多是根据各种细胞群特有的大小、沉降率、粘附性和吞噬能力等设计而成。实验原理外周血液中的红细胞与白细胞的比例在几百甚至上千比一,两类细胞的大小和密度不同,其沉降速度也就不同,红细胞
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
细胞化学技术4
6、基本实验过程 用于大分子合成过程研究的放射自显影技术: 同位素标记示踪化合物→注入动物体内→ 取下器官或组织→切片→ 涂乳胶膜→自显影→显影和定影→染色→观察 用于大分子定位研究的放射自显影技术: 组织固定包埋→切片 ↓ 细胞化学反
血细胞分离技术
采血 (一)材料与试剂 1.抗凝剂 (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其钠盐或钾盐,它能阻止凝血酶原转化为凝血酶,进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,从而阻止血液凝固。常用的肝素溶液浓度为1 000U/ml,市售肝素多为100U~126U/mg。 (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是
细胞学技术
概述及注意事项:细胞学检查包括有细胞的涂片与染色技术,其来源先于组织切片技术,目前是较为常用的病理检查方法之一。它所运用的范围也很广泛,如女性生殖系统、食管、胃、肺、浆膜腔积液、泌尿管道、鼻咽部等部位的脱落癌细胞,以及胸、腹腔的肿块、淋巴结、乳腺、和其它组织器官的细胞学诊断。标本采集注意事项::1、
细胞分离纯化技术
Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞实验方法原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(
脱落细胞检查技术
一、标本采集 正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键之一,故要准确地选择部位,尽可能在病变区直接采集细胞。采集的标本必须保持新鲜,尽快制得,以免细胞自溶或腐败。尽可能避免血液、粘液等混入标本内,采集方法应简便,操作轻柔,避免病人痛苦和引起严重并发症及促进肿瘤扩散,下面介绐几种常用的标本采集方法
细胞分离纯化技术
实验方法原理 常用来分离人外周血单个核细胞(PBMC)的分层液比重是 1.077±0.001 的 聚 蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F/H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体,呈中性,水性高,平均分子量为400000,当密度为1.2 g/ml仍未超出正常生理性
细胞培养技术
实验概要细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。主要设备细胞培养设施和基本条件 1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染
细胞融合技术
细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)是指真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。人工的细胞融合开始于20世纪50年代, 60年代到70代作为一门新兴的技术, 发展非常快, 应用范围也极为广泛, 除了同种类细胞间可以
细胞分选技术介绍
中文名称细胞分选英文名称cell sorting定 义根据细胞的属性,将混合细胞分为具有不同特性的几个不同类群的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
原代细胞分离技术
取人或动物体内(或胚胎)的组织,将其剪碎至1mm3的组织块,再采用的如下方法进行分离培养:一、悬浮细胞的分离方法1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中,1000rpm/分钟离心5分钟。2、去掉上清,离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分钟。此步重复两次。3、用培养基
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
单细胞分离技术
单细胞测序日趋火爆的原因很大程度上得益于单细胞分离技术的不断完善。这一讲,我们将跟大家一起回顾传统的单细胞分离技术,并重点介绍单细胞分离技术的新宠微孔芯片技术及微流控技术。图1为目前常见单细胞分离设备。图1:目前常见单细胞分离设备传统单细胞分离技术相信许多实验人员,都见过下面我们要介绍的传统的单细胞
细胞化学技术3
三、放射自显影技术放射自显影(radioautography)是利用放射性核素(同位素)的射线作用于感光材料的卤化银晶体,产生潜影,然后通过显影过程把“像”显示出来,以研究用放射性核素标记的物质在生物体内的定位和定量的一种技术。放射自显影技术有光镜和电镜两个层次。光镜放射自显影研究同位素标记物在组织
原代细胞传代技术
一、贴壁细胞的消化法传代1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或与EDTA混合液)轻轻摇动培养瓶,使瓶底细胞都浸入溶液中。3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察,发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形,在还未漂起时,弃去消化液,加入培养液终止消化。4、用吸管将贴壁的细胞吹打
细胞化学技术2
二、 免疫细胞化学技术 免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)是根据免疫学原理,利用抗原抗体特异结合的特性定位组织和细胞中特异大分子的一类技术。它包括光镜水平(简称免疫组化)和电镜水平(简称免疫电镜)的免疫细胞化学技术。应用免疫细胞化学技术可在原位检测细胞的各种大分子,
脱落细胞检查技术
脱落细胞检验医生除要熟练掌握细胞形态学特点外,还必须掌握各项操作和染色技术及观察方法,所以脱落细胞学检查技术是重要的学习内容之一。它包括标本采集、制片、固定和染色、镜下观察方法及诊断要领等。第一节 标本采集和涂片制作方法 一、标本采集 正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键之一,故要准确地选择部
可控的单细胞细胞核注射技术—最新贴壁活细胞注射技术
可控的单细胞细胞核注射技术——最新的贴壁活细胞注射技术 微量细胞注射自从70年代问世一直以来,就成为蛋白、核酸、多肽、药物、微粒子等进入细胞的重要手段。但是该技术对于操作者的要求过高,用于注射的显微注射针难以制备又成为了它难以广泛应用的技术壁垒。现如今FluidFM技术的出现,攻克了这一技术壁垒。F
青岛能源所单细胞拉曼流式分选技术研究获进展
日前,中国科学院青岛生物能源与过程研究所单细胞研究中心在基于微流控的单细胞拉曼流式分选技术研究中取得新进展,相关成果于2月5日在线发表在Analytical Chemistry (Zhang PR, et al, Anal Chem, 2015)。 单细胞拉曼分选(RACS)是一种极具潜力的活
熊伟:新型质谱技术让神经化学研究进入单细胞时代
世界上没有两片完全相同的叶子,细胞也是。然而,科学家们在进行现代生物学研究时,大多时候都考察的是细胞群体,而忽略了细胞异质性。 就拿神经细胞来说,大脑中有亿万个神经细胞,这些神经细胞在细胞形态,突触连结,细胞结构,电生理以及生理功能上具有高度的多样性。不同种类的神经细胞中,其基因组、蛋白组、化