12月20日《科学》杂志精选

生育的前哨 由于一项在小鼠中的新的研究,人们对保持卵巢内卵子健康的因子又多了一些了解。人们认为,女性在出生时就有了她一辈子会有的所有卵子。科学家们知道,女性只要其卵母细胞池中的卵子持续存在而且健康的话,她就有生殖能力。有特定的基因负责让它们保持良好的状态,尽管调节这些与生育有关基因的因子仍然晦暗不明。 在一则新的报告中,Chao Yu等人对一批被称作CLR4连接酶复合物的多种酶的作用进行了探索;这些酶已知会调节不同的细胞通路。研究人员希望知道它们是否在卵母细胞的维护中也扮演着一种角色。他们报告,CLR4的2个成分是维持小鼠卵子健康所必需的;确实,删除这两种CLR4成分中的任何一种都会引起小鼠在年轻时就无法生育。 此外,设计缺乏这些相同成分的胚胎会造成这些小鼠在出生12周内失去它们生来就有的可产生卵母细胞的滤泡。这些发现提示,健康的CLR4在保护卵母细胞并因此保护女性生殖潜力中起着一种关键性的作用。 更重......阅读全文

二抗孵育时间

二抗孵育时间为1至2小时。参考二抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗。吸尽洗涤液后,立即加入稀释好的二抗,室温在摇床上缓慢摇动孵育1至2小时。回收二抗。二抗的浓度一般要参照抗体说明书选择最适当的比例。一抗二抗的选择直接影响实验结果以及背景的深浅。要严格保证反应时间,

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一抗孵育过夜操作方法:下班时间——孵育一抗——放置在4℃冰箱内——第二天上班拿来孵育二抗时间8~10个小时,都行,

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不用洗膜孵育洗膜、孵育的简单Western-Blot系统介绍

  论实验室基础实验最低投入产出比,谁敢与Western Blot 争锋?数数那些年你做的WB,再数数最后发表用到的WB结果图,绝不低于10:1。虽然产出高,但WB操作步骤多,细节近乎极致,难免不让人抓狂:   摇床转速:封闭和抗体孵育速度稍缓慢,洗涤的时候又要调快;   洗涤:多个WB一起做

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植物基因转化技术

相关知识植物基因转化技术是指将外源基因导入植物细胞或组织,获得转基因植物的技术。植物基因转化技术总体上可分为两大类:1 以生物体为介导的基因转移法;2 DNA直接导入法。前者如农杆菌介导法,植物病毒介导法;后者如基因枪法、电击法、聚乙二醇法、脂质体法及花粉管通道法。其中应用最广的是根癌农杆菌介导法。

植物转基因技术

1)农杆菌介导转化法 将外植体放入含有外源基因的农杆菌(Agrobacteriumtume/ociens)菌液中浸泡,然后转入共培养基,再转入筛选培养基诱导抗性愈伤组织和抗性芽,生根后的抗性植株移栽至营养钵生长。(2)基因枪法 又称微弹轰击法。其基本原理是将外源DNA黏附在微小的金粒或钨粒表面,然后

植物雌雄-基因可辨

   大多数人不知道的一点是,我们在超市里购买的黄瓜是纯粹的“女性”——它们由精心杂交培育的、只生产雌花的植株生长而来。长久以来,农民们都知道“女性”因素对于农作物成功的重要性:雌花比例越高,种子和果实的产量越大。最近,科学家揭示了植物性别决定的分子基础。  在《科学》上发表的一篇文章中,以色列巴伊

WB实战之抗体孵育

  由于抗原和抗体特异性结合的效率是非特异性结合的数百万--数十亿倍,所以当特异性抗体与非特异性'抗体'(不好描述,指添加在抗体稀释液中的封闭蛋白,我们可以把它们看成非特异性的一抗)竞争时,尽管抗体稀释液中封闭蛋白的浓度是一抗浓度20K:1以上,在碰撞几率相同的条件下,由于时间的积累

抗体孵育条件的比较

(1)一抗孵育温度有几种:4度、室温、37度,其中4度效果最佳;孵育时间:这与温度、抗体浓度有关,一般37度1-2h,而4度过夜和从冰箱拿出后37度复温45min。(2)二抗一般室温或37度30min-1h,具体时间需要摸索。

基因枪活体植物基因转染

本实验所用基因传递系统(基因枪)原理:低压基因递送系统(GDS-80 基因枪 U.S. Patent Number: 6,436,709 B1),根据火箭喷嘴原理和空气动力学原理设计,是用于传递生物微粒进入靶细胞的一种新型系统。如图1中所示,当左侧出现输入气体压力时(如:氦气),两个腔室之间将形成巨

红细胞渗透脆性(孵育)实验

实验原理  红细胞在低渗盐溶液中,当水渗透其内部达一定程度时,红细胞发生膨胀、破裂。观察红细胞在不同浓度盐溶液中的溶血程度,可以判断其对低渗盐溶液的抵抗力,这种抵抗能力与红细胞表面积与容积的比值有关,比值小者,红细胞抵抗力较小,脆性增加。反之抵抗力增大。实验方法  材料:  1.171.1mmol/

二抗孵育久了会怎样

孵育过夜一般多见于封闭液。二抗孵育过夜比较少见。因为二抗中酶的活性可能容易受到影响,并且如果在二抗孵育阶段有微生物滋生,后续洗涤步骤少,容易干扰显色。二抗浓度太高、孵育时间太长了 。洗膜不够,可以尝试3次,每次15min 。如果片子全黑,要考虑胶片是不是已经曝光了。

植物基因转化常用方法

一 植物遗传转化的方法  植物遗传转化技术可分为两大类:一类是直接基因转移技术,包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等,其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法,主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法,其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转

植物基因转化常用方法

一. 植物遗传转化的方法 植物遗传转化技术可分为两大类:一类是直接基因转移技术,包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等,其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法,主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法,其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转

转基因植物中的筛选基因

基因工程(DNA重组技术)是在离体条件下对不同生物的遗传物质(DNA)进行人为“加工”,并按照人们的意愿重新组合,以改变生物的性状和功能,然后再通过适当的载体将重组DNA转入生物体或细胞内,并使其在生物体内或细胞中表达,从而获得新的生物机能。这种利用基因工程技术获得的植物一般称为“基因工程植物”。自

深海章鱼孵育其鱼卵4年多比任何已知动物的孵育时间都更长

  这条深海章鱼(北方太平洋谷蛸)在蒙特利峡谷底部附近的一个礁石上花了4年半时间孵育其鱼卵,那里位于海平面以下约1400米(4600英尺)。  蒙特利湾水族馆研究所(MBARI)的研究人员观察到一条深海章鱼对其卵孵育了4年半--这比任何已知动物的孵育时间都要长。在此整个时期中,该雌性章鱼保持这些鱼卵

孵育振荡器具有哪些特点?

  微孔板振荡器主要用于酶标板、细胞培养板中的溶液在适当温度下进行混匀或细胞的培养孵育。可应用于免疫测定和染色实验等。  MicBio-II型酶标板孵育振荡器采用微处理技术结合智能化PID 控制能够在达到目标温度后快速的保持稳定,可节省等待的时间而形成的酶标板恒温振荡器,产品设计紧凑而严密,

微孔板孵育器你了解多少?

微孔板孵育器产品简述:BK100-4A微孔板恒温孵育器采用微处理技术结合PID控制方式而形成的微孔板恒温孵育器。它具有体积小、重量轻;温度、时间LCD显示,美观大方,操作简单等特点。主要用于酶标板(96孔/384孔板)、细胞培养板(24孔板、48孔板、96孔板等)等溶液在适当温度下进行培养孵育,常用

植物转基因的相关介绍

  植物转基因是基因组中含有外源基因的植物。它可通过原生质体融合、细胞重组、遗传物质转移、染色体工程技术获得,有可能改变植物的某些遗传特性,培育高产、优质、抗病毒、抗虫、抗寒、抗旱、抗涝、抗盐碱、抗除草剂等的作物新品种,如玉米稻 、转基因三倍体毛白杨。而且可用转基因植物或离体培养的细胞,来生产外源基

植物转基因技术的特点

  利用植物来生产疫苗的最大优点是他可以作为食品直接口服。通过各种植物转基因技术将多台疫苗基因转入植物,从而得到表达多肽疫苗的转基因植物。随着抗体基因工程能将抗体基因(从小的活性单位到完整抗体的重、轻链基因)从单抗杂交瘤中分离出来,人们就开始想办法利用转基因植物来表达这些抗体。  1989年Hiat

植物基因转化常用方法4

1.2 其它的基因附加工程在水稻、棉花、马铃薯、番茄和其它作物上也进行了δ-内毒素工程,获得昆虫抗性也不仅仅是指有着一种方法。蛋白酶抑制剂也是较好的选择,它可以一只昆虫肠道内的蛋白酶活性,阻止或减缓害虫生长,许多植物能产生蛋白酶抑制剂,如豇豆和common bean, 他们的基因已经被成功的转移到其

植物基因转化常用方法2

(二)Ti质粒转化植物细胞的战略  1 . Ti质粒的改造  有以下理由使天然的Ti质粒不能作为表达载体使用:  a. 生长在培养基上的植物转化细胞产生大量的生长素和分裂素阻止了细胞再生长为整株植物,因此,必须除去生长素和分裂素基因。  b. 有机碱的合成与T-DNA的转化无关,而且可能会影响植物细

植物基因沉默怎么搞?

  “植物的种子时期,大量基因都被沉默,直到植物成年以后才按需活化,”植物生化和光合作用研究所(IBVF)的Myriam Calonje Macaya博士解释道。细胞分裂后,基因沉默状态还会传递给子细胞,从而建立细胞记忆。多梳蛋白家族(Polycomb-group proteins,PcG蛋白)参与

植物基因转化常用方法3

(三)改良植物性状的策略  基因克隆技术提供了一种新的改良植物的方法,它可以直接的改变植物的基因型。有两种策略可以应用。  1) 基因附加:通过添加1个或多个基因改变植物的性状。  2) 基因扣除:利用基因工程技术使一个或多个植物已经存在的基因失活。  灭活植物基因是通过反义技术来实现的。将外源基因