鲍岚课题组发现炎症因子ATP调节P2X3受体上膜转运的新机制
ATP门控离子通道P2X3受体选择性地表达于初级感觉神经元,对生理性和病理性痛觉调节至关重要。P2X3受体的合成、组装和转运对于其行使正常的功能是必需的。病理条件下大量释放的包括ATP在内的各种炎症因子从多方面调节着P2X3受体的功能。 来自中国科学院上海生化与细胞所的鲍岚课题组前期的研究工作发现ATP可以促进P2X3受体的内吞,进而形成信号内吞体,在初级感觉神经元轴突中逆向转运到胞体,活化转录因子CREB,调节神经元的兴奋性。然而,ATP对P2X3受体上膜转运的调节及机制并不十分清楚。 在此基础上,研究人员进一步发现ATP时程依赖性地促进了重组的以及背根节神经元内源性的P2X3受体的上膜转运,而同家族的P2X1和P2X2受体则没有此效应。ATP激活P2X3受体引起的钙离子内流,可以激活钙/钙调素依赖性蛋白激酶IIα (CaMKIIα),CaMKIIα通过一种三级结构依赖的模式,调节P2X3受体的上膜转运。 ......阅读全文
变性RNA在膜上的转移和固定
多数情况下,为检测特定的靶 mRNA,需先将 RNA 通过琼脂糖电泳分离后,再从胶上转移到二维支持物上,(通常用尼龙膜),再与持异的标记探针杂交。正如在 Nonhem 杂交中讨论的情况,实验者可采用多种试剂和膜用于 RNA 的转移以达到 RNA 和膜紧密结合的效果。本实验来源「分子克隆实验指南第三版
变性RNA在膜上的转移和固定
实验方法原理 多数情况下,为检测特定的靶 mRNA,需先将 RNA 通过琼脂糖电泳分离后,再从胶上转移到二维支持物上,(通常用尼龙膜),再与持异的标记探针杂交。正如在 Nonhem 杂交中讨论的情况,实验者可采用多种试剂和膜用于 RNA 的转移以达到 RNA 和膜紧密结合的效果。我们认为,最
各种生物膜在结构上的联系
细胞内的各种生物膜在结构上存在着直接或间接的联系。内质网膜与外层核膜相连,内质网腔与内、外两层核膜之间的腔相通,外层核膜上附着有大量的核糖体(如图)。内质网与核膜的连通,使细胞质和核内物质的联系更为紧密。在有的细胞中,还可以看到内质网膜与细胞膜相连。内质网膜与线粒体膜之间也存在一定的联系。线粒体
钠钾泵的功能特性
钠钾泵的一个特性是它对离子的转运循环依赖磷酸化过程,ATP上的一个磷酸基团转移到钠钾泵的一个天冬氨酸残基上,导致构象的变化。通过自磷酸化来转运离子的离子泵就叫做P-type,与之相类似的还有钙泵和质子泵。它们组成了功能与结构相似的一个蛋白质家族。
钠钾转运体的转运过程
钠钾泵(也称钠钾转运体),为蛋白质分子,进行钠离子和钾离子之间的交换。每消耗一个ATP分子,逆电化学梯度泵出3个钠离子和泵入2个钾离子。保持膜内高钾,膜外高钠的不均匀离子分布。
转运反应成分的制备实验——转运反应
试剂、试剂盒磷酸肌酸肌酸磷酸激酶ATPGTP仪器、耗材微量离心管实验步骤1. 将反应混合物加入一在冰上放置的微量离心管中。能量重建系统成分如下:5 mmol/L 磷酸肌酸20 单位/ml 肌酸磷酸激酶0.5 mmol/L ATP0.5 mmol/L GTP2. 滴一滴孵育混合物到一片位于带盖子的湿盒
脂肪酸代谢概述(二)
(一)软脂酸的生成 脂肪酸的合成首先由乙酰CoA开始合成,产物是十六碳的饱和脂肪酸即软酯酸(palmitoleic acid)。 1.乙酰CoA的转移 乙酰CoA可由糖氧化分解或由脂肪酸、酮体和蛋白分解生成,生成乙酰CoA的反应均发生在线粒体中,而脂肪酸的合成部位是胞浆,因此乙酰CoA必须
清华大学潘俊敏教授Cell子刊发表研究新成果
来自清华大学的研究人员在新研究中证实,FLA8/KIF3B磷酸化通过调控Kinesin-II与IFT-B互作控制了细胞纤毛内转运蛋白(Intraflagellar transport,IFT)的进入和转向。这一研究发现发表在8月28日的《发育细胞》(Developmental Cell)杂志上。
膜上胰岛素受体数量的测定实验
试剂、试剂盒 结合缓冲液 [125I] 胰岛素 (受体级) 牛血清白蛋白猪胰岛素实验步骤 材料牛血清白蛋白(BSA,1%)猪胰岛素〔17.5/umol/L(0.1 mg/ml) 于 0.001mol/LHC1 中〕(如 Sigma Chemical Co.13505)[125I] 胰岛素 (受体级)
膜上胰岛素受体数量的测定实验
膜上胰岛素受体数量的测定实验 试剂、试剂盒 结合缓冲液 [125I] 胰岛素 (受体级)
膜上胰岛素受体数量的测定实验
胰岛素可高亲和性地与其受体结合(KD~109mol/L),这一能力使我们能估测出甚至是相当粗制的制备物中的胰岛素受体数。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒结合缓冲液[125I] 胰岛素 (受体级)牛血清白蛋白猪胰岛素实验步骤材料牛血清白蛋白(BSA,1%)猪胰岛素〔17
细胞生物学名词解释(十)
49. 运输ATPase(transport ATPase)能够水解ATP,并利用ATP水解释放出的能量驱动物质跨膜运输的运输蛋白称为运输ATPase, 由于它们能够进行逆浓度梯度运输, 所以有称为泵。共有四种类型的运输ATPase:① P型离子泵(P-type ion pump),或称P型ATPa
原发性家族性脑钙化研究新进展
6月17日,Neuroscience Bulletin在线发表了题为Mechanisms of PiT2-loop7 Missense Mutations Induced Pi Dyshomeostasis的研究论文。该研究由中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心(神经科学研究所)、神经科学国家
长春应化所揭示-单个葡萄糖分子跨膜转运的动态过程
葡萄糖分子是维持细胞代谢和生命活动的重要能量来源。葡萄糖转运体1(GLUT1)广泛存在于人体细胞表面,对于维持正常生理功能极为重要,其表达和功能异常与很多疾病相关。 然而,GLUT1在细胞膜上的详细定位与分布信息,以及定位分布信息与它们的生理功能之间的联系还未完全解析,尤其是单个葡萄糖分子跨膜
科学家揭示环二核苷酸和叶酸的跨膜转运机制
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2022/10/488073.shtm 北京理工大学生命学院教授高昂团队与中国科学院生物物理研究所研究员张立国团队、高璞团队揭示了溶质载体家族蛋白SLC19A1识别环二核苷酸、叶酸和抗叶酸的分子机制。这项研究将有助于
上海生科院在轴突发育细胞膜转运机制研究上获进展
1月29日,《神经科学杂志》(the Journal of Neuroscience)发表了中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所和神经科学国家重点实验室关于神经元轴突发育过程中细胞膜转运机制的研究成果,论文题目为JIP1 mediates anterograde transport
高产华人科学家Nature解析重要转运蛋白
由华人科学家郑宁(Ning Zheng)领导的一个华盛顿大学研究小组,在新研究中阐明了植物双亲和性硝酸盐转运蛋白NRT1.1的晶体结构。研究结果发表在2月26日的《自然》(Nature)杂志上。 郑宁现为华盛顿大学副教授、霍华德休斯医学研究所研究员,长期从事泛素化机理及其关键蛋白质结构
瑞典研究揭示葡萄糖转运蛋白转运过程
瑞典国家生命科学实验室(SciLifeLab)研究团队成功构建了迄今为止最全面的葡萄糖转运蛋白(GLUT)转运周期,并确定了GLUT蛋白对脂质的敏感性,对于理解人类生理和代谢的基本机制具有重要意义。研究成果发表在《自然》(Nature)。 碳水化合物如葡萄糖和果糖为细胞提供了重要的能量来源。细
转印到膜上的蛋白质检测实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 PBSTween印度墨汁仪器、耗材 摇床实验步骤 1. 将转印膜置于塑料容器中,在旋转摇床中于37℃用Tween 20溶液洗涤3次,每次30 min,然后再于室温用Tween 20溶液洗2次,每次30 min。2. 用印度墨汁溶液染膜3 h或过夜。 3. 在Twe
PVDF膜上蛋白的可逆染色的几种方法
1. 氨基黑染色 染液:0.5% Amido Black (w/v), 25% isopropanol (v/v) and 10% Acetic acid. 染色:将PVDF膜置于染液中染色数钟,ddH2O 脱色。 2. 考马氏亮蓝染色 染液:0.1% Coomassie Brilliant Blu
关于线粒体膜上的Bcl2的作用介绍
(1)Bcl-2能改变线粒体巯基的氧化还原状态来控制其膜电位从而调控细胞凋亡。在细胞凋亡中,线粒体的巯基可能组成了胞内氧化还原电位的传感器,Bcl-2可能是通过抑制谷胱甘肽(GSH)的外泄,降低胞内的氧化还原电位,来抑制细胞凋亡的; (2)Bcl-2能调节粒体膜对一些凋亡蛋白前体的通透性。Bc
上腭恶性外周神经鞘膜瘤病例报告
恶性外周神经鞘膜瘤(Malignant peripheral nerve sheath tumor,MPNST)是一种起自周围神经的神经鞘膜肿瘤,恶性程度较高。其组成成分复杂,诊断相对困难。在此笔者报道1例发生于患者上腭部的恶性神经鞘膜瘤,为临床诊断提供参考。 1.病例资料 患者男,50岁,4年前发
脂肪酸FA在体内参与吸收关键调控机制的重要作用
脂肪酸(FA)在体内具有重要功能,可作为能量来源,并参与生物膜合成和能量存储。然而,脂肪酸如何跨过细胞膜进入细胞内,目前仍不太清楚。与葡萄糖和氨基酸不同,脂肪酸具有疏水性,这使得其运动难以追踪。有人认为,脂肪酸是经过被动扩散穿过细胞膜,但越来越多的证据表明,脂肪酸是在蛋白的参与下完成代谢组织的跨膜转
什么是磷酸化与去磷酸化
磷酸化,将磷酸基团加在中间代谢产物上或加在蛋白质(protein)上的过程。其中除去磷酸基团的酶称为磷酸酶。 蛋白质磷酸化可发生在许多种类的氨基酸(蛋白质的主要单位)上,其中以丝氨酸为多,接着是苏氨酸。去磷酸化:磷酸基团的除去,对许多生物起着“开/关”作用。防止质粒载体的自身连接,最常用于质粒进行单
南开大学长江特聘教授陈佺自噬研究成果刊登Cell-Research
生物通报道:自噬需要多种多样的膜来源,并涉及mATG9(ATG家族中唯一的膜蛋白)的膜转运。然而,mATG9转运以启动自噬的分子调控,仍不明确。目前,来自南开大学、中科院动物研究所和广东医科大学的研究人员,确定了两个保守的经典接头蛋白,分选mATG9胞质N末端的信号,这介导了mATG9从质膜和反
方案14-电印迹膜上的蛋白质消化实验
实验材料含有电泳分离的目标蛋白质的凝胶试剂、试剂盒乙酸胺黑(Amido Black)10B染料(0.1%)的水溶液 乙酸 甲醇消化缓冲液NaOH丽春红S染料PVP-40仪器、耗材电印记装置小离心管硝酸纤维膜或 PVDF 膜RP-HPLC 层析柱实验步骤一、电印迹和染蛋白1.将蛋白质电印迹到硝酸纤维膜
线粒体膜上的Bcl2抑制凋亡的过程介绍
(1)Bcl-2能改变线粒体巯基的氧化还原状态来控制其膜电位从而调控细胞凋亡。在细胞凋亡中,线粒体的巯基可能组成了胞内氧化还原电位的传感器,Bcl-2可能是通过抑制谷胱甘肽(GSH)的外泄,降低胞内的氧化还原电位,来抑制细胞凋亡的;(2)Bcl-2能调节粒体膜对一些凋亡蛋白前体的通透性。Bcl-2蛋
X射线晶体学揭示代谢调控新机制
来自普渡大学、霍华德休斯医学研究所的研究人员,运用X射线晶体学方法,揭示了大肠杆菌抑制麦芽糖转运蛋白摄入麦芽糖的机制,相关论文公布在6月16日的《自然》(Nature)杂志上。 领导这一研究的是普渡大学生物学系陈觉(Jue Chen)教授,其早年毕业于上海同济大学,2002年受聘于普渡
细胞膜完整性及膜转运功能检测实验—乙酰乙酸染色法
实验方法原理FDA是一种无荧光的酯酶底物,能被活细胞摄取并在细胞内被酯酶水解形成荧光素。常用方法是将FDA与PI 同时孵育细胞,测定活细胞与死亡细胞比例。实验步骤1. 主要试剂的配制FDA(Molecularprobes,In.OR,USA)保存液 1 mg/ml 的丙酮溶液。PI(Sigma,MO
转运RNA的功能
主要是携带氨基酸进入核糖体,在mRNA指导下合成蛋白质。即以mRNA为模板,将其中具有密码意义的核苷酸顺序翻译成蛋白质中的氨基酸顺序(见蛋白质的生物合成、核糖体)。tRNA与mRNA是通过反密码子与密码子相互作用而发生关系的。在肽链生成过程中,第一个进入核糖体与mRNA起始密码子结合的tRNA叫起始