美科学家制成致命流感病毒引争议可导致流感大流行
美国科学家11日说，他们利用正在野鸭中传播的流感基因片段，制造出与“西班牙流感”病毒极度相似的一种致命病毒。尽管研究人员认为这项成果有助于应对下一场流感大流行，但这个实验仍被一些人批评为“鲁莽”、“疯狂”和“危险”。 “西班牙流感”暴发于1918年，当时曾导致约4000万人死亡，是有史以来对人类打击最大的一次流感大流行。美国威斯康星大学麦迪逊分校研究人员在新一期美国《细胞宿主与微生物》杂志上报告说，他们从野鸭流感病毒中找到8个基因片段，利用它们组合出一种与“西班牙流感”病毒极相似的新病毒，两者只有3％的氨基酸不同。 利用雪貂进行的实验显示，新病毒致病能力高于普通禽流感病毒，但低于“西班牙流感”病毒，不能通过飞沫传播。雪貂由于其呼吸系统的一些特征与人相似，常被用于测试流感病毒的危害。 然而进一步的研究发现，只要让上述新病毒的一些关键蛋白的7个氨基酸变异，它的传播能力就会显著提高，可以轻易通过空气传播感染雪......阅读全文
病毒透射电镜病毒标本制备实验——负染色技术
实验方法原理病毒研究中用磷钨酸染色后发现在黑色背景中病毒粒子如同一个亮晶晶的「空洞」。尔后用磷钨酸对飞噬菌体染色也见到同样的现象，即将这种现象称为「负染色」。负染色是一种反衬染色，即高密度物质如重金属磷钨酸、醋酸铀等在透射电镜下形成黑色的背景反衬低密度的标本如病毒为白色透亮，从而清楚地显示出被衬物的
病毒RNA提取实验方法（protocol）
1，用异硫氰酸胍提取提禽流感病毒的详细步骤，可参考（我提过N次做定量PCR都没问题）：1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管2.加600ul异硫氰酸胍，然后加入对照和样品，再加200ul氯仿，颠倒混匀3.13000rpm离心15min4.在第3步离心快结束时，
病毒的形态学诊断实验
1. 病毒的电镜图像观察观察腺病毒，轮状病毒，单纯疱疹病毒的电镜照片，注意其形态，排列，大小及其结构。2. 病毒包涵体的观察用高倍镜或油镜观察经HE （苏木素伊红染色）染色的狂犬病毒及呼吸道合胞病毒（或麻疹病毒）感染宿主细胞后形成的包涵体，注意包涵体在细胞内的大小，形态，位置及染色性，并绘图表示
动物病毒的鸡胚培养实验
实验方法原理 本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长，经培养后，产生肉眼可见的白色痘疱样病变，似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内，生长后，鸡胚全身皮肤出现出血点，以脑后最显著。实验材料 痘苗病毒（Vavvinia virus）鸡新城疫病
杆状病毒储液制备实验
基本方案 从悬浮培养中制备 基本方案 从单层培养中制备 噬斑试验测定滴度 实验方法原理 实验材料
癌症病毒疗法进入临床实验
用病毒杀死癌细胞的理念很早就被提出，上世纪中叶就曾经有科学家做过尝试。最近由日本宝生物公司、东京大学、冈山大学和Oncolys BioPharma公司开发的病毒疗法已进入临床实验。日本国立癌症研究中心和鸟取大学等团队，已先后通过动物实验验证了自持病毒疗法对治疗胰腺癌有效。杏林大学将病毒疗法与免疫疗法
动物病毒的鸡胚培养实验
实验方法原理本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长，经培养后，产生肉眼可见的白色痘疱样病变，似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内，生长后，鸡胚全身皮肤出现出血点，以脑后最显著。实验材料痘苗病毒（Vavvinia virus）鸡新城疫病毒（
痘苗病毒系统基因表达实验（二）
实验方法原理含有 pT7 控制的外源基因（本实验「重组痘苗病毒（VTF7-3）感染后的脂质体转染」）的重组质粒，通过同源重组可整合到痘苗病毒中,并制备重组病毒储液。将此病毒储液与 vTF7-3 共同感染贴壁或悬浮细胞，在培养过程中，外源基因被高效的 T7 RNA 聚合酶转录，并在感染细胞的细胞质完成
反转录病毒载体的制备实验
实验材料二个反转录病毒包装细胞株反转录病毒载体包含选择性标记试剂、试剂盒PBS细胞染色液组织培养皿仪器、耗材完全的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基低蛋白质结合的纤维素乙酸盐注射器式滤器克隆形成环实验步骤展开
关于慢病毒的相关实验介绍
一、实验目的 对于一些按常规方法难以转染甚至无法转染的细胞，通过病毒介导的实验能够大大提高基因的转导效率，以达到目的基因的高效瞬时表达。 二、实验流程 1. 根据目的基因相关信息（序列，序列号等），构建含有外源基因或siRNA的重组载体； 2. 对于测序正确的重组质粒，提取和纯化高质量的
简述正粘病毒的实验诊断
病毒分离与鉴定采取发病初期（发病3天）病人鼻咽洗液或含漱液,加青、链霉素杀菌后,接种于鸡胚羊膜腔内及尿囊腔中,35℃孵育2-4日,取羊水、尿囊液做血凝试验,检查有无病毒增殖。若试验为阴性,需在鸡胚中盲目传代三次后再试验。若血凝试验为阳性,可用已知流感病毒各型特异性抗体与新分离病毒进行血凝抑制试验
杆状病毒储液制备实验
实验方法原理 实验材料 悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒（野生型的或重组）试剂、试剂盒 含10％胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材 150 mm 培养瓶 27℃ 培养箱 倒置显微镜 带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机 带螺口盖的冻存管 液氮罐 500 ml 旋转细
病毒实验诊断及质量控制
病毒感染病原学诊断在疾病的预防上可了解流行病学情况，疫苗的免疫效果以及采取及时的免疫措施及必要的隔离和防护，在病毒感染的诊断和治疗上可避免不必要的诊断检查，避免滥用抗生素。对某些病毒疾病可选用有效的抗病毒药物，如用阿糖腺苷或无环鸟苷治疗单母子疱疹脑炎，丙氧鸟苷治疗严重的巨细胞病毒感染，病毒唑雾化吸入
超速离心法纯化病毒实验
实验方法原理 不同大小和比重的粒子在沉降速度上存在差别，沉降速度差别（相差）在一个或几个数量级的粒子，可用本法分离提取。实验材料 待纯化的病毒试剂、试剂盒 无仪器、耗材 差速离心机实验步骤 将被分离的样品交替进行低速离心与高速（或超速）离心。差速离心适用于从组织培养液、鸡胚尿囊液或经过红细胞吸附－释
重组杆状病毒的纯化实验
实验材料 杆状病毒试剂、试剂盒 琼脂牛血清仪器、耗材 培养瓶冻存管实验步骤 1. 制备病毒上清的系列稀释液，该病毒上清获得自在无血清完全培养液中转染 pAC360β-gal DNA的细胞。在含150 μg/ml X-gal 的琼脂糖顶层覆盖物下病毒形成蚀斑。 2. 当蚀斑形成后，用灭菌巴斯德吸管
痘苗病毒系统基因表达实验（一）
本节介绍依赖于在哺乳动物细胞质合成噬菌体 T7 RNA 聚合酶的瞬时细胞质表达系统。首先，将感兴趣的基因插入质粒中，使其位于 T7 RNA 聚合酶启动子（PT7）的控制下。应用脂质体转染，重组质粒进入感染了 vTF7-3 的细胞质中，而 vTF7-3 是一种能编码噬菌体T7 RNA聚合酶的重组痘苗病
病毒－DNA－的提取实验——全血细胞中病毒－DNA－的提取
实验材料全血试剂、试剂盒裂解缓冲液 A裂解缓冲液 B蛋白酶 K仪器、耗材离心机水浴锅实验步骤1. 在 750µl 全血中加入等量裂解缓冲液 A,混匀， 12000 r/min 离心 30 s, 弃上清液。2. 用 1.5mL 裂解缓冲液 A 悬起沉淀，再重复离心 1次，弃上清液。3. 用 117µL
病毒透射电镜病毒标本制备实验——悬滴标本法
实验方法原理病毒等微小颗粒标本可取其培养物经稀释或分离提纯后直接滴于附有支持膜的载网上用电镜观察。实验材料病毒试剂、试剂盒稀释液仪器、耗材透射电镜实验步骤悬液应尽量除去杂质如培养基残渣，细胞碎片、糖类及各种盐类的结晶等，这些杂质的存在会干扰染色及电镜观察。用该法的缺点是由于电子穿透能力很弱，只能观察
病毒透射电镜病毒标本制备实验——免疫吸附法
实验方法原理有时由于病毒量少，用普通悬滴法在电镜下难以发现稀少散在的病毒粒子，则可用免疫吸附电镜法。主要是利用相应的病毒抗血清来吸附病毒，用本法检测病毒，快速、灵敏、特异性强，是可靠的电镜病毒诊断技术之一，也可用于病毒快速诊断。实验材料病毒试剂、试剂盒磷钨酸仪器、耗材透射电镜实验步骤将抗病毒血清分别
病毒－DNA－的提取实验——拭子标本中病毒－DNA－的提取
实验材料拭子标本试剂、试剂盒TE 缓冲液裂解液蛋白酶K仪器、耗材离心机棉签实验步骤预操作：将采有口腔、鼻腔或生殖道等处分泌物标本的棉签置于 2 ml 生理盐水中，洗下标本。若标本在 4 h 内处理，可置于室温保存，否则需 4℃保存。1. 将生理盐水中的标本以 2 000 r/min 离心 5 min
重组腺相关病毒载体的生产实验
瞬时转染 293 细胞制备无腺病毒重组腺相关病毒载体实验材料293组织培养细胞系pSub201质粒pXX2质粒pXX6质粒试剂、试剂盒完全DMEM 10%FBS培养基完全IMDM 10%FBS培养基CaCl2纯DMEM 2%FBS 培养基干冰 乙醇浴硫酸铵饱和硫酸铵乙醇PBS仪器、耗材组织培养板—次
MERS冠状病毒疫苗动物实验成功
美国马里兰州国立卫生研究所的研究人员报告称，他们开发出了一种有潜力的中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）疫苗。在小鼠和猕猴实验中，新疫苗展现了对该病毒约旦N3毒株产生免疫的能力。 中东呼吸综合征冠状病毒自2012年被发现以来，发病数量超过了1000例，已经产生了400多死亡病例。对于这
病毒非实验室变异和传播
本来天然环境中病毒变异为高危害病毒应是一种小几率事件，是否由于某些原因造成了这种几率的变大?实验室病毒变异有意向性和可控性，天然环境却是不可预见和控制。 看看天然环境的变化 1，重金属污染 越来越多的重金属残留在水，土壤，食品及我们体内。重金属在生化反应中的特殊地位是不容怀疑的，虽然没有任
EB病毒诱导淋巴细胞实验步骤
实验步骤：1、EB病毒液的制备复苏B95.8细胞株，使用培养基为10% FCS RPMI-1640逐步添加培养基至细胞长至对数生长期细胞计数，调节细胞数量为1×10^6个/ml在CO2培养箱中继续续培养10天，中间不换液至第10天收集培养上清，1800rpm，4℃离心15分钟0.22μm滤器过滤，1
风疹病毒及实验室检查
风疹遍及世界各地，为气候温和地区的地方性疾病，发病高峰为春季至初夏。风疹病毒可通过呼吸道传播，以鼻咽分泌物为主要传染源。该病毒通过接触传染能力不强，偶尔接触未必形成感染，其潜伏期为10~21天，此后表现为咳嗽、流涕、咽部疼痛、头痛、发热、食欲不佳等临床症状。面部可首先出现皮疹，一个月内遍部全身
流感病毒实验室检查技术
一、标本的采集与处理（一）标本的采集1、病毒分离标本的采集病毒分离成功与否很大程度上取决于采集标本的质量，及其保存、运输等环节。多数标本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次为气管和支气管分泌物，有时也采用肺活检材料等。标本采集后应立即放入适当的采样液中低温保存，常用的采样液为：普通肉汤，pH7.4-7.6的
重组病毒的蛋白质分析实验
实验材料 Sf细胞试剂、试剂盒 胎牛血清PBSSDS蛋白酶抑制剂裂解缓冲液仪器、耗材 培养瓶培养箱离心机转子水浴锅实验步骤 1. 接种2.5×108 Sf9细胞于含5 ml 完全培养液/10%胎牛血清的25 cm2 培养瓶中，27℃温育≥ 2 h。从含无血清完全培养液和重组蚀斑的1 ml
吸附法纯化病毒实验_凝胶吸附法
实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒凝胶材料仪器、耗材烧杯实验步骤磷酸钙凝胶：这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮，置千 4℃ 4~5小时使之充分沉淀后应用
病毒免疫荧光实验_荧光抗体染色
实验材料细胞小玻片标本试剂、试剂盒荧光抗体实验步骤荧光抗体染色按不同反应机制，可有以下几种：1.直接法 用已知特异性病毒抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应病毒抗原结合，在荧光显微镜下即可见病毒或病毒抗原存在部位呈现特异性荧光。此法特异简便，但一种荧光抗体只能检查一种抗原，特
裸眼筛选重组杆状病毒实验
实验材料 杆状病毒试剂、试剂盒 琼脂糖仪器、耗材 解剖显微镜倒置显微镜实验步骤 解剖显微镜下筛选 1. 倒转蚀斑平皿，使其处于显微镜的黑色背景下，以锐角向平皿照射一束亮光。2. 检查野生型病毒感染的细胞中含有包涵体的蚀斑，这种蚀斑看上去折光性强，带有轻微的黄色。3. 检查β-gal 重组病毒感