浙江大学黄俊教授Cell子刊发表最新成果
细胞基因组的完整性，持续受到多种内外因素的挑战，例如复制叉崩溃、氧化应激和电离辐射等等。并由此引发一系列细胞学反应。DNA的损伤类型很多，其中以DNA双链断裂（DSB）最为严重。DSB会随着年龄的增长不断累积。可以说我们的健康在很大程度上依赖于细胞发现和修复DNA损伤的能力。 DSB具有高度的毒性，当断裂链试图再度连接时，由于没有模板可循，很容易导致染色体易位和基因组重排。DSB修复的缺陷不仅会使基因组不稳定，还会引起多种疾病，包括发育障碍、过早老化和癌症等等。为此，细胞演化出了许多DNA修复系统来，同源重组修复就是一种主要的方式。 通过同源重组修复DSB，需要切除DSB末端（5′-3′）。在脊椎动物中，这种切除是由CtIP和MRE11-RAD50-NBS1复合体协作启动的。不过，人们并不清楚这一过程是如何在染色质环境下发生的。 为此，浙江大学的黄俊教授领导研究团队展开了研究。他们发现，人SRCAP染色质重塑复合体，是......阅读全文
Nature：首次实时观察染色体末端修复
维护染色体的两端——称为端粒，可让细胞不断分裂，并实现永生。宾夕法尼亚大学医学院肿瘤生物学副教授Roger Greenberg说：“端粒就像鞋带末端的塑料帽，它们能防止DNA受到磨损。”本周在《Nature》发表的一项新研究中，资深作者Greenberg和他的同事们首次开发了一个系统，可观察新合
Nature：首次实时观察染色体末端修复
维护染色体的两端——称为端粒，可让细胞不断分裂，并实现永生。宾夕法尼亚大学医学院肿瘤生物学副教授Roger Greenberg说：“端粒就像鞋带末端的塑料帽，它们能防止DNA受到磨损。”本周在《Nature》发表的一项新研究中，资深作者Greenberg和他的同事们首次开发了一个系统，可观察新合
染色体断裂，如果修复不当会导致细胞死亡
染色体断裂是对细胞最有害的DNA损伤。如果不进行修复，它们会阻止染色体的复制和分离，停止生长周期并导致细胞死亡。这些断裂经常出现在肿瘤细胞中，并在遗传物质的复制过程中自然发生。为了修复遗传物质中的这种损害，细胞将信息从未受损的子本拷贝转移到断裂的副本，这被称为姊妹染色单体之间的重组。图片来源于网
抗原修复的作好免疫组化染色必须注意的问题
I、为达到免疫组织化学技术的要求，组织固定越新鲜越好。在免疫组化最后结果的判断时，常可见到均匀一片的似非特异性染色的现象，经多方研究认为，它是一种假性非特异性的染色。因为肿瘤组织中含有的抗原较易发生扩散弥散，肿瘤细胞无限制的生长和生长过速，导致肿瘤中间部分组织血液供给困难，造成缺血坏死，坏死细胞中的
DNA修复技术重组修复过程介绍
此过程也叫复制后修复。对于DNA双链断裂损伤，细胞必须利用双链断裂修复，即重组修复，通过与姐妹染色单体正常拷贝的同源重组来恢复正确的遗传信息。人重组修复中原损伤没有除去，但若干代后可逐渐稀释，消除其影响。所需要的酶包括与重组及修复合成有关的酶，如重组蛋白A、B、C及DNA聚合酶、连接酶等。
DNA修复技术诱导修复过程介绍
DNA严重损伤能引起一系列复杂的诱导效应，称为应急反应，包括修复效应、诱变效应、分裂抑制及溶原菌释放噬菌体等。细胞癌变也可能与应急反应有关。应急反应诱导切除和重组修复酶系，还诱导产生缺乏校对功能的DNA聚合酶，加快修复，避免死亡，但提高了变异率。单链DNA诱导重组蛋白A，可水解Lex A蛋白，使一系
SOS修复系统修复DNA损伤的介绍
是SOS反应的一种功能。SOS反应是DNA受到损伤或脱氧核糖核酸的复制受阻时的一种诱导反应。在大肠杆菌中,这种反应由recA-lexA系统调控。正常情况下处于不活动状态。当有诱导信号如 DNA损伤或复制受阻形成暴露的单链时，recA蛋白的蛋白酶活力就会被激活，分解阻遏物lexA蛋白,使SOS反应
DNA修复的切除修复的相关介绍
（一）细胞内有多种特异的核酸内切酶,可识别DNA的损伤部位,在其附近将DNA单链切开,再由外切酶将损伤链切除,由聚合酶以完整链为模板进行修复合成,最后有连接酶封口。 （二）碱基脱氨形成的尿嘧啶、黄嘌呤和次黄嘌呤可被专一的N-糖苷酶切除,然后用AP（apurinic/apyrimidinic,缺
关于DNA修复的光修复的介绍
这是最早发现的DNA修复方式,是指细胞在酶的作用下,直接将损伤的DNA进行修复。 [1] 修复是由细菌中的DNA光解酶（photolyase）完成,此酶能特异性识别紫外线造成的核酸链上相邻嘧啶共价结合的二聚体,并与其结合,这步反应不需要光；结合后如受300-600nm波长的光照射,则此酶就被激活
糖类染色实验——糖原染色
实验方法原理糖原由多糖衍化而来，是单纯的多糖。糖原易溶于水，所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原，常用高碘酸（periodic acid）-Shiff 反应（PAS）染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠（偏重亚硫酸钠）双重蒸馏水
土壤修复技术之－玻璃化修复技术
玻璃化技术源于20世纪五六十年代核废料的玻璃化处理技术，近年来该技术被推广到污染土壤的治理，1991年美国爱达荷州工程实验室把各种重金属废物及挥发性有机组分填埋于地下0.66m后，使用原位玻璃化技术，证明了该技术可行性。 该技术分原位和异位两种。 一、原位玻璃化技术 原理：通过向污染土壤插
电池修复仪的－操作说明和修复范围
电池修复仪主要是针对铅酸蓄电池进行修复的，对于蓄电池的非物理性损坏比如蓄电池化学反应中造成的硫化、盐化、极板老化、软化、失水、热失控、极板活性物质脱落等现象具有较好的 修复效果，通过等离子共振，将硫化铅结晶体转化为自由移动的游离子参加化学反应，从而达到修复的目的。 操作说明 ①
DNA损伤修复的切除修复方法介绍
又称切补修复。最初在大肠杆菌中发现，包括一系列复杂的酶促DNA修补复制过程,主要有以下几个阶段：核酸内切酶识别DNA损伤部位，并在5'端作一切口，再在外切酶的作用下从5'端到3'端方向切除损伤；然后在 DNA多聚酶的作用下以损伤处相对应的互补链为模板合成新的 DNA单链片
人类染色体姊妹染色单体差别染色
姊妹染色单体区分染色法(Sister chromatid differentiation，SCD）是70年代中期发展起来的染色体处理技术。Latt（1973）在培养的细胞中加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU），当用Hoechst33258 荧光染料染色时，发现了姊妹染色单体的色差反映和它们
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理 细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷（5-Bromodeoxyuridine：BUdR）的培养基中，当细胞在DNA 合成时，BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷（Thymidine：TdR）被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时，由于半保留复制的机制，中期染色体的每条染色单体
姐妹染色单体分化染色方法
姐妹染色单体差别染色可使中期染色体显示深浅不同的两条单体，能借以观察姐妹染色单体互换（SCE）现象。SCE是两条染色单体在DNA合成中核苷酸序列发生互换而表现出来一种现象。即是细胞分裂是DNA同源重组的结果。SCE既是一种无害的变化（有生理波动），也可受射线、致突和致癌物三因素等作用而升高。SCE一
糖类染色实验——黏液物质染色
实验方法原理在人体和动物体中能够分泌黏液物质，依其物质中含有的酸基不同，所以分为中性黏液、酸性黏液和混合性黏液，也可被称为中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖，常用 Mowry 阿尔辛蓝高碘酸 Shiff 反应（ABPAS）染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒阿尔辛蓝 8 GS冰醋酸蒸馏水麝香
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷（5-Bromodeoxyuridine：BUdR）的培养基中，当细胞在DNA 合成时，BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷（Thymidine：TdR）被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时，由于半保留复制的机制，中期染色体的每条染色单体D
姐妹染色单体分化染色实验
实验概要本文介绍了姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation，SCD)的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation，SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处
革兰氏染色液染色法
1．葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液。 2．结晶紫染色液。 3．革兰氏碘液。 4．95％酒精。 5．番红染液。 6．载玻片。方 法 一、涂片标本的制备（见实验一） 二、革兰氏染色法 1．初染：在上述已固定的涂片上，滴加结晶紫染液，染色1分钟，水洗
间接染色步骤（细胞表面染色）
实验概要间接标记需要两个孵育步骤，先与一抗再与合适的第二抗体孵育，二抗（不是一抗）结合了荧光染料（FITC、PE、Cy5 等）。请注意这是一个普遍的程序，您可以根据自己的使用情况进行调整。实验步骤1. 收集并洗涤细胞，然后确定细胞总数。细胞通常在聚苯乙烯的圆底 12 x 75 mm2 Falcon
染色质染色体和染色单体的区别
（1）、染色质和染色体的主要成分都是DNA和蛋白质，它们之间的不同，不过是同一物质在细胞分裂间期和分裂期的不同形态表现而已。 染色质出现于间期，呈丝状。它们在核内的螺旋程度不一，螺旋紧密的部分，染色较深，有的螺旋松疏染色较浅，染色质在光镜下呈现颗粒状，不均匀地分布于细胞核中。细胞分裂时染色质细
关于DNA损伤修复的重组修复方法介绍
重组修复从 DNA分子的半保留复制开始，在嘧啶二聚体相对应的位置上因复制不能正常进行而出现空缺,在大肠杆菌中已经证实这一DNA损伤诱导产生了重组蛋白,在重组蛋白的作用下母链和子链发生重组,重组后原来母链中的缺口可以通过DNA多聚酶的作用,以对侧子链为模板合成单链DNA片断来填补,最后也同样地在连
血细胞化学染色的染色法—铁染色的介绍
（1）血细胞化学染色的染色法—铁染色的原理：人体内有一定量的以铁蛋白和含铁血黄素形式贮存的铁元素，这些铁在酸化的低铁氰化钾溶液中反应，生成蓝色的亚铁氰化铁沉淀（普鲁士蓝），定位于含铁的部位。 （2）血细胞化学染色的染色法—铁染色的操作方法：将染色液滴加在骨髓小粒丰富的骨髓涂片上，室温20～30
血细胞化学染色的染色方法—－糖原染色（PAS）的介绍
（1）血细胞化学染色的染色方法— 糖原染色（PAS）的原理：过碘酸将血细胞内的糖原氧化，生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合，形成紫色化合物，定位于细胞质中。 （2）血细胞化学染色的染色方法— 糖原染色（PAS）的操作方法：干燥涂片，滴加甲醛固定液固定10分钟，流水冲洗，晾干。滴加过碘酸溶液
抗酸染色配置以及染色方法实验
实验方法原理抗酸染色直接用于痰标本时，可以适当曾加标本涂片的厚度，以提高检出率。染厚涂片时，须掌握复染色时间，如果背景过深，影响镜检。实验步骤碱性复红染色法：（萋纳Ziehl-Neelsen法）一、实验试剂：1. 萋纳石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱和溶液：10ml5％石炭酸溶液： 90m
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤 改良Ryui法一、实验试剂：A液：5％石炭酸： 10ml鞣酸： 2g饱和硫酸铝钾液：10mlB液：结晶紫酒精饱和液应用液：A液10份，B液1份，混合，室温存放。二、染色方法：1. 玻片的处理：要求用新的载玻片，用前须在95％酒精中浸泡24小时以上，用时从酒精中
革兰氏染色法的染色原理
革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌（G-）两大类，是细菌学上最常用的鉴别染色法。该染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌，是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊化学组分进行染色的。 通过初染和媒染后，细胞内形成了不溶于水的结晶紫一碘大分子复合物。革兰氏阳性细菌由
细菌的简单染色和革兰氏染色
（一）实验目的：学习细菌的简单染色法和革兰氏染色法。 （二）实验原理：用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类。碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合。因细菌蛋白质等电点较低，当它生长于中性、碱性或弱酸性的溶液中时常带负电荷，所以通常采用碱性染料（如美蓝、结晶紫、碱性复红或
瑞氏染色法染色原理
瑞氏染色法染色原理： 为了观察细胞内部结构，识别各种细胞及其异常变化，血涂片必须进行染色。瑞氏染色法是血细胞分析最经典和最常用的染色法。瑞氏染料： 是由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料。染色原理： 是染料透入被染物并存留其内部的一种过程，此过程既有物理的吸附作用，又有化学的