卢欣院士、郭亚军教授Nature子刊揭示阻遏癌症的开关
自牛津大学、第二军医大学等机构的研究人员,发现了支配上皮细胞在坚硬的、高度结构化及固定不移的状态与柔软的、可移动的状态之间切换的一个关键机制。他们的研究发表在10月26日的《自然细胞生物学》(Nature Cell Biology)杂志上,证实了一个叫做ASPP2的肿瘤抑制蛋白充当分子开关控制了这一过程及它的逆转过程――两者在许多的生物学现象,包括伤口愈合、胚胎发育、尤其是癌症的转移中均发挥了至关重要的作用。 牛津大学临床医学系肿瘤遗传学教授、Ludwig肿瘤研究所所长、英国皇家病理学院院士卢欣(Xin Lu)及第二军医大学肿瘤研究所所长、国家973计划首席科学家郭亚军(Yajun Guo)教授共同领导了这项研究。 卢欣说:“我们试图鉴别出控制上皮细胞可塑性的分子开关。这样的可塑性是癌症的一个标志。为了能够转移,定居癌细胞必须放松其结构,摆脱限制,然后迁移至身体的另一个部位,一旦到达那里便定居下来形成克隆。上皮间质转化(......阅读全文
BioTechniques:无细胞表达究竟哪家强?
无细胞表达系统让研究人员能够快速生成蛋白质,从而受到人们的青睐。来自真核细胞的裂解物能够对蛋白质进行翻译后修饰,但不同翻译系统的细微差别也会导致蛋白生产的变化。无细胞表达究竟哪家强?亚利桑那州立大学的研究人员近日在《BioTechniques》上发表了他们的比较结果。 在目前的无细胞蛋白合成而
单个脑细胞的基因表达谱
科研人员报告了一种根据基因表达谱为人类大脑的单个细胞分类的方法。人类大脑含有许多种类的细胞,它们的基因表达模式有差别。此前为这些细胞类型分类的方法一直限于使用几个基因或蛋白质标记物以及分析整个细胞群。Stephen Quake及其同事使用单细胞RNA测序分析了来自人类大脑组织的466个个体细胞的
稳定表达细胞株的建立
1、将转染后的细胞按照一定的比例接种到6孔板中(一般选用1:10和1:100两个梯度),分别采用1200mg/ml,1000mg/ml和800mg/ml的G418进行筛选;以转染携带EGFP质粒载体的细胞作为阳性对照,以未转染质粒载体的细胞作为阴性对照;2、每3~4天换液一次;3、筛选20~30天,
BioTechniques:无细胞表达究竟哪家强?
无细胞表达系统让研究人员能够快速生成蛋白质,从而受到人们的青睐。来自真核细胞的裂解物能够对蛋白质进行翻译后修饰,但不同翻译系统的细微差别也会导致蛋白生产的变化。无细胞表达究竟哪家强?亚利桑那州立大学的研究人员近日在《BioTechniques》上发表了他们的比较结果。 在目前的无细胞蛋白合成而
充满差异的单细胞蛋白表达
哈佛大学谢晓亮小组的最新研究结构显示,蛋白的数量(绿色)与mRNA的数量(红色)在各个细胞中有很大差异。 科学家们近日首次实现了对物种在整个表达谱范围内的蛋白表达噪声测量。该项成果是单分子技术与系统生物学交互融合的典范,预示了单细胞基因表达分析时代的来临。 在基因表达研究领域,传
无细胞蛋白表达系统的选择
图1. 与细胞内蛋白表达相比,无细胞蛋白表达系统能够显著地节约时间。 与基于细胞的蛋白表达系统相比较,无细胞蛋白表达系统具有独特的优势,包括节约时间、提高具有功能的、可溶的、全长蛋白的总体产量。本文介绍了根据模板类型、期望产率以及下游实验等因素来选择无细胞蛋白表达系统的标准。
杆状病毒昆虫细胞表达系统
实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成
杆状病毒昆虫细胞表达系统
实验步骤一、杆状病毒表达载体最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成,其位于病毒基因组多角体座位,替代了非必需的野生型多角体基因。在实验室中
抑制肿瘤转移研究获进展
近日,华东师大生命医学研究所、上海市调控生物学重点实验室、“千人计划”刘明耀教授领衔的课题组发现了一种新型抗肿瘤体内生长和转移的抑制剂。国际肿瘤学期刊《美国国立癌症研究所杂志》日前发表了这一成果。 随着全球肿瘤发病率的显著提高,我国已成为世界上肿瘤发病和死亡的大国。预计到2030年,世界上
Science开发创新基因表达研究方法
来自卡罗林斯卡学院和瑞典皇家理工学院(KTH)的科学家们,开发出了一种高分辨率的新方法来研究组织中活化的基因。这种方法可用于所有的组织类型,对于临床前研究和癌症诊断均具有价值。他们的研究结果发布在7月1日的《科学》(Science)杂志上。 疾病会改变组织中一些RNA分子和蛋白质的表达。在实验
生化与细胞所雄激素受体对附睾基因表达调控研究获进展
10月13日,内分泌领域权威期刊Molecular Endocrinology杂志在线发表了中科院上海生命科学研究院生化与细胞所张永莲研究组取得的最新研究成果:雄激素受体在小鼠附睾基因组结合位点的鉴定。 附睾结构和功能的维持以及基因表达均高度依赖于雄激素,雄激素的作用是由雄激
哺乳动物细胞真核表达系统为科学研究提供助力
哺乳动物细胞真核表达系统是哺乳动物细胞经过翻译和再加工后产生的外源蛋白,在活性上远优于原核表达系统和酵母、昆虫细胞等真核表达系统,更接近天然蛋白。哺乳动物细胞表达系统可以提供较接近自然状态的重组人蛋白的翻译后修饰。在蛋白质表达过程中,会形成接近天然蛋白质的蛋白质折叠和聚合,具有活性蛋白质所必需的
康九红教授研究组JBC发现癌细胞转移新机制
2013年7月29日,国际生化领域著名杂志The Journal of Biological Chemistry(JBC)在线发表了同济大学生命科学与技术学院表观遗传学实验室HDAC10 suppresses cervical cancer metastasis through inhi
研究发现通过干细胞介导的线粒体转移实现眼病功能恢复
中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员刘兴国团队与中山大学中山眼科中心教授张清炯团队合作,研究发现通过干细胞介导的线粒体转移实现眼病功能恢复。相关成果近日发表于《中国科学》(英文版)(Science China Life Sciences)。论文共同通讯作者刘兴国表示,该研究表明,间充质干细胞可以
研究-Th2细胞中lncRNA通过促进翻译调控细胞因子IL4的表达
1月4日,国际学术期刊Journal of Biological Chemistry 发表了中国科学院上海营养与健康研究院常兴研究组的研究成果“Single-cell RNA-Seq analysis identifies a noncoding interleukin 4 (IL-4) RNA
巨噬细胞外泌体源miR223对胃癌细胞转移能力的影响研究
河南省人民医院郑培明, 高慧洁, 李俊蒙, 等.选择巨噬细胞及其外泌体分别与胃癌细胞共培养(未加为对照组),检测miR-223表达量并观察其对胃癌细胞转移能力的影响。荧光显微镜观察巨噬细胞是否通过外泌体传递miR-223至胃癌细胞。巨噬细胞转染miR-223拮抗剂,分离外泌体与胃癌细胞共培养,t
Cell:新研究表明靶向表达protogenin的癌症干细胞样细胞可让第3组髓母细胞瘤萎缩
在一项新的研究中,来自贝勒医学院、德克萨斯儿童医院和多伦多病童医院等研究机构的研究人员发现并确定了一个干细胞样细胞(stem-like cell)群体,该细胞群体在发育中的大脑中启动并维持第3组髓母细胞瘤(Group 3 medulloblastoma, Gr3-MB),其中Gr3-MB是儿童脑
胞质杂种和重建细胞的基因表达
1、去核的小鼠成纤维细胞与分化的大鼠肝癌细胞融合后,胞质杂种看上去丧失了合成白蛋白的能力。在融合形成后10-20小时,大多数胞质杂种的合成能力被抑制。这是一个明显的暂时现象,因为在融合48小时后又可以检测出大量的白蛋白。由此可以得出结论,合成能力的消失是通过一种短寿命的调节因子实现的。这种因子不能在
建立茎尖细胞特异基因表达图谱
基因差异表达是细胞分化和不同细胞类型形式特异功能的基础。细胞特征的转录图谱对于了解不同类型细胞如何生长发育、响应环境至关重要。但植物细胞由细胞壁固着,不易分离,很难获得细胞类型特异的转录数据。 中国科学院遗传与发育生物学研究所焦雨铃研究组在之前的工作中建立了器官边界区的细胞特异表达图谱 (Ti
胞质杂种和重建细胞的基因表达
为了更直接地研究核、质相互作用对细胞核基因表达变化的作用,运用了“细胞质杂交”(cybridization)和细胞重建(细胞核移植)技术。胞质杂种是由一个无核细胞或去核细胞与一个完整细胞融合而成的,开始时这个混合细胞质内只含有一个细胞核。细胞核的遗传标记(如抗溴脱氧尿苷)和线粒体标记(如抗氯霉素)的
原核细胞的基因表达具有什么特点
由于原核生物大都为单细胞生物,缺乏核膜,因此极易 受外界环境的影响,需要不断地调控基因的表达,以适应 外界环境的营养条件和克服不利因素,提高生物的应变与 适应能力以完成生长发育与繁殖的过程。这种调控大多以 操纵子为单位进行。
外源基因在原核细胞表达技术
原核细胞*用IPTG诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因 含重组表达载体的大肠杆菌菌株的构建1.PCR修饰或限制性内切酶消化分离DNA片段,片段5’端和3’端带有与IPTG诱导表达载体对应的限制酶位点。2.含靶cDNA/基因的DNA片段与表达载体连接。3.重组质粒转化有lacIq 等位基因的大肠杆菌
华人教授:细胞基因表达调控新见解
最近,康奈尔大学的研究人员,通过在纳米级的精密度上追踪蛋白质在活细胞中的运动,对细胞调节其基因表达的方式,获得了新的认识。 每个活细胞里的DNA都包含着“基因蓝图”,指导细胞制造所需要的蛋白质。当需要一种特定的蛋白质时,一个调节蛋白会结合到DNA链上适当的位置,从而导致相邻的基因被“表达”而制
外源基因在真核细胞表达技术
生化方法* 磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞转染前24 h,通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以1×105至4×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养皿或12孔板上。于含5%~7% CO2的37℃温箱孵育20~24 h。转染前1 h换液。2.按照下属方法制备磷酸钙-DNA沉淀:
杆状病毒昆虫细胞表达系统3
七、杆状病毒表达载体的新一代昆虫细胞宿主最早的鳞翅类昆虫细胞的遗传转化技术出现在1990年(Jarvisetal.,1990)。那时,研发该技术的初衷在于构建一个稳定转化的昆虫细胞系,它旨在能够持续生产目标重组蛋白而无需使用杆状病毒进行感染。然而, 构建这个生产用细胞系所用的载体及方法也为构建具有新
外源基因在原核细胞表达技术
原核细胞l 用IPTG诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因 含重组表达载体的大肠杆菌菌株的构建1. PCR修饰或限制性内切酶消化分离DNA片段,片段5’端和3’端带有与IPTG诱导表达载体对应的限制酶位点。2. 含靶cDNA/基因的DNA片段与表达载体连接。3.
Science:新型单细胞基因表达检测技术
发表在最新一期《科学》(Science)杂志上的一篇研究论文,证实了一种新型的大规模平行测序技术可借助于新一代测序(NGS)在单细胞水平上检测基因表达。 论文作者、来自Cellular Research, Inc公司的Christina Fan博士、Glenn Fu博士以及Stephen Fo
外源基因在真核细胞表达技术
生化方法l 磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞1. 转染前24 h,通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以1×105至4×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养皿或12孔板上。于含5%~7% CO2的37℃温箱孵育20~24 h。转染前1 h换液。2.
杆状病毒昆虫细胞表达系统2
五、亲代杆状病毒基因组的改进就像转移质粒的改进,对亲代杆状病毒基因组的改进也是为了满足各种不同的需要。起初,最主要的目的是找到克服重组杆状病毒载体构建和分离低效率的方法,这也是最初的杆状病毒-昆虫细胞系统存在的主要问题。现在已经知道这个问题的根源在于, 在共转染的昆虫细胞系中,转移质粒和亲代杆状病毒
T细胞基因的转录激活及其表达
TCR/CD3复合物与配体结合后,经多种信号转导途径传递信号,最终导致T细胞活化和增殖。信号转导中所涉及的基因根据其活化时间可以分为早早期、早期、晚期基因三种类型(表8-5)。早早期基因的转录不需蛋白的合成,而早期及晚期基因的转录则需蛋白的合成。早早期及早期基因转录在有丝分裂期之前,而晚期基因转