新技术可高效生产“高亲和”纳米抗体

抗体是一种由免疫系统释放的防御性蛋白质,用来识别和抵御入侵者,此外,它们也是生物学和医学中最有用的工具,比如用于分子标记研究或破坏病变细胞等。 纳米抗体也能完成相同的任务,其瘦小身躯更易到达大分子禁区,因而显出更诱人的前景,但科学家们缺少有效方法去识别它们。这一难题被美国洛克菲勒大学的研究人员发明的新技术成功解决,用他们的方法能确保纳米抗体显著地满足几乎所有研究领域的需求,相关成果发表在今天的《自然·方法学》杂志上。 “我们希望更容易获得高亲和力纳米抗体并开发出更多新用途。”论文作者、细胞和结构生物学实验室主任米歇尔·洛特说,“关键是找到相对快捷的方式来测定与目标物最亲和的纳米抗体的基因序列。一旦获得了那些序列,很容易利用细菌大量生产这种纳米抗体。” 据物理学家组织网11月3日报道,研究人员首先为美洲驼接种GFP和mCherry,帮助免疫系统产生对抗这两种外来蛋白质的抗体;其次,从美洲驼骨髓抗体生成细胞里提取RNA,用......阅读全文

纳米抗体在医疗中的应用

纳米抗体被人们寄予厚望,因为它在许多疾病的治疗中都表现出了优异的应用价值和前景:研究表明,将纳米抗体与阴沟肠杆菌β内酰胺酶相结合,它能选择性地激活抗癌前体药物,有效地与结肠腺癌细胞上的癌胚抗原相结合,在原位杀伤肿瘤,且无毒副作用。纳米抗体还可以阻碍抗原和受体的连接反应,如 EGF-EGFR 纳米抗体

纳米抗体可减轻炎症和痛苦

  欧洲研究人员开发出了一种新类型的生物分子,被称为纳米抗体,或微型抗体。该纳米抗体可阻断炎症和降低小鼠疼痛。该纳米抗体被描述为针对炎性疾病的面向未来的技术。在对小鼠的实验中,纳米抗体能更有效地控制炎症,比任常规抗体或消炎药效果都好,研究人员说。该纳米抗体可能会发展成为针对慢性疼痛,炎性肠病,多发性

高亲和力单克隆抗体制备问题及对策

1,细胞长的慢或细胞死亡正常生长情况下,细胞一天传代一次,生长越好,贴壁越多对策:①培养基配方不对;② 接种密度太低,低于10的4次方;③污染了支原体或者其他不明细菌,支原体的现状是出现小黑点;细菌污染是浑浊;霉菌污染是出现白色肉眼可见菌落;不明细菌污染出现砂状平铺背景,视野发暗。④细胞瓶刷洗不干净

纳米抗体将用于治疗罕见凝血疾病

   9月3日,法国制药商赛诺菲(Sanofi)已获得欧洲药品管理局批准,将使用纳米抗体治疗罕见的凝血疾病。  Caplacizumab市场用名为Cablivi,由比利时生物制药公司Ablynx研发,将用于治疗患有获得性血栓性血小板减少性紫癜(aTTP)的成年人。而今年早些时候法国制药商赛诺菲以39

科学家发现强效HIV纳米抗体

南京大学医学院教授吴稚伟、研究员吴喜林课题组通过羊驼免疫和高通量噬菌体展示技术,成功从羊驼体内分离出一系列CD4纳米抗体,其中的Nb457在治疗HIV感染方面展现出巨大潜力。日前,相关研究成果发表在《自然—通讯》上。近年来,抗逆转录病毒疗法在抑制HIV复制方面取得了显著进展,显著延长了艾滋病患者的寿

我国学者发现全人源纳米抗体

中新网上海3月16日电 (孙国根 陈静)记者16日获悉,中国学者发现并筛选到抗新冠病毒的全人源纳米抗体,该抗体可同时靶向病毒上两个不同的“极隐蔽”部位,并高效中和包括奥密克戎病毒在内的各种流行变异株。该抗体的优良特性使其有望被制成广谱全人源纳米抗体药物,并实现雾化给药,用于新冠肺炎的特效治疗。目前,

标记亲和素生物素法(BAELISA)实验——检测未知抗体

实验方法原理包被抗原:用0.05 mol/L pH9.6碳酸盐缓冲液将已知的抗原作适当稀释,于聚苯乙烯酶标板的孔中加0.1 ml,于4 ℃放置18~24 h。用洗涤缓冲液洗3次,每次3 min。 加样:加适当稀释的待检样品(未知抗体)于反应孔中,同时作空白、阴性和阳性对照孔。37 ℃孵育1 h,洗涤

FcRn亲和层析HPLC法可用于评估IgG抗体质量属性

  IgG抗体与新生儿Fc受体(FcRn)的结合力与抗体的血清半衰期相关。细胞通过胞饮作用以非特异性方式将IgG抗体摄入。在初级内体囊泡(early endosome vesicle)的低pH下,IgG抗体能够以pH依赖性方式与FcRn结合,随后再循环回到细胞表面上,而不是在溶酶体中被降解。一旦这种

“纳米适配子”技术助力新型抗体药物研发

近日,华南理工大学生物医学科学与工程学院教授王均、副教授沈松团队在国家自然科学基金等项目的资助下,通过创新“纳米适配子”技术成功构建融合蛋白-聚合物复合型纳米多特异性抗体(FP-NA),为克服传统抗体药物疗效局限提供了全新解决方案。相关成果发表于《自然-生物医学工程》。在肿瘤免疫治疗领域,针对免疫检

抗链霉亲和素IgG抗体干扰抗环瓜氨酸肽(CCP)IgG

血液中抗环瓜氨酸肽(抗CCP)IgG抗体的检测主要用于类风湿性关节炎的诊断。在实验室中,研究人员怀疑由于抗链霉抗生物素蛋白IgG抗体导致的抗CCP抗体IgG抗体错误升高。在本研究中,我们以标准化方法评估了初级保健机构中抗链霉抗生物素蛋白IgG抗体的流行情况以及抗链霉抗生物素蛋白IgG抗体对来自三个不

研究人员发表抗体亲和力体内定向进化系统“EASINESS”

  上海交通大学系统生物医学研究院陶生策团队,开发了一种基于大肠杆菌的抗体亲和力体内定向进化系统“EASINESS”,可以在一周内将目标抗体亲和力提升1-2个数量级,且无需复杂的机械装置与人工操作。该研究基于一种易错DNA聚合酶I选择性地突变ColE1质粒实现体内抗体突变库的构建,以及来自mDHFR

亲和层析--生物素/亲和素纯化

低耐压:生物素琼脂糖微球生物素琼脂糖凝胶是用于纯化或去除亲和素或链霉亲和素样本的产品,生物素是通过间隔臂以多种共价结合的方式固定在基材上的,最大限度避免配基脱落。 这种结合非常紧密,可以应用于不可逆结合(如:从某个样本中去除亲和素组分)高耐压:链霉亲和素 HC 琼脂糖微球 ABT Streptavi

亲和偶联--氨基

 固相技术是一种将配基(酶、抗体、亲和蛋白等)偶联到支持结构(如琼脂糖)上的技术,该技术提供了高稳定性和易于重复使用的固定化分子。亲和配体的偶联及其在层析中的应用已经扩展到了许多领域,包括纯化程序,去除污染组分和生物催化。 ABT 提供种类繁多的预活化凝胶,旨在通过稳定的偶联配体和不带电荷的共价键,

亲和偶联--羧基

固相技术是一种将配基(酶、抗体、亲和蛋白等)偶联到支持结构(如琼脂糖)上的技术,该技术提供了高稳定性和易于重复使用的固定化分子。亲和配体的偶联及其在层析中的应用已经扩展到了许多领域,包括纯化程序,去除污染组分和生物催化。ABT 提供种类繁多的预活化凝胶,旨在通过稳定的偶联配体和不带电荷的共价键,最大

羊驼VHH-SingleB®纳米抗体快速发现案例分享

纳米抗体(nanobody, Nb),即重链抗体VHH(variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody)——骆驼体内存在着天然缺失轻链的重链抗体(heavy-chain antibody, HCAb),克隆其可变区而得到的只由一个重链可变

多羟基反应单克隆抗体的鉴定、生产和使用——免疫亲和层析

实验步骤 一、多羟基反应单克隆抗体 我们最先使用了一类特殊的单克隆抗体, 并将其用于免疫亲和层析。这些抗体可以用于温和的免疫亲和层析, 因为洗脱条件只需要联合使用无离液盐和低分子质量的多羟基化合物 (多元醇),此条件下蛋白质呈非

时毅:纳米抗体研究新突破-对Delta等多种新冠变种有效

来势汹汹的新冠病毒Delta变种,除了对疫苗的效果产生影响,也给中和抗体的预防和治疗效果带来了挑战。从康复患者血液样本中筛选、分离出的中和单克隆抗体,以新冠病毒刺突蛋白的受体结合位点为主要目标而发挥作用,然而病毒变种在刺突蛋白上发生的突变,可能让有些中和抗体不再那么有效。不过,有一些特殊的纳米抗体,

亲和层析常见亲和对及支持物介绍

在一对有专一的相互作用的物质中,把其中之一联结在支持物上,用于纯化相对的另一物质。常见的亲和对如:酶和抑制剂,抗原和抗体,激素和受体等。支持物为琼脂糖或纤维素等。

青岛能源所开发出纳米抗体诊断试剂关键制备技术

  纳米抗体是目前已知的可结合目标抗原的最小单位,分子量只有15 KD,是传统抗体的十分之一。作为新一代抗体代表的纳米抗体,具有传统抗体无可比拟的优势。纳米抗体性质非常稳定,在严苛条件下仍然保持生物活性,这将彻底解决生物制剂冷链运输和储存的难题;纳米抗体亲和力高、特异性强,能识别传统抗体不能识别或不

高亲和力高纯度零污染的细胞培养级抗体制备指南

单克隆抗体(monoclonal antibody,MAb),是针对专一的抗原决定簇产生的抗体,单克隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年,主要原理是利用产生抗体的B细胞与骨髓瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞,生产抗体。目前大量制备单抗的方法主要有两种方法:一种是动物体内生产法(腹水制备),在小鼠腹腔内接种

双特异性纳米抗体可有效避免免疫逃逸

  双特异性纳米抗体是一种能够同时识别两种不同抗原或者表位,具有更强的特异性、靶向性和更低的脱靶毒性的靶向治疗药物。  近日,天津大学化工学院教授、国家重点研发计划首席科学家黄鹤团队在《中国生物工程杂志》上发表了一篇题为《双特异性纳米抗体的研究进展及其应用》的文章,介绍和分析了双特异性纳米抗体在感染

纳米抗体喷雾剂,喷一喷,防新冠!

  近日,美国匹兹堡大学医学院(UPMC)的时毅教授与匹兹堡大学疫苗研究中心(Center for vaccine research)的合作者在Science Advances发表文章,展示了一种基于纳米抗体的抗新冠病毒(SARS-CoV-2)喷雾疗法。在仓鼠实验中,这种喷剂可以防治新冠病毒感染引起

亲和标记的应用

有人用亲和标记技术直接鉴别结合部位的氨基酸残基。其做法是将一化学性质活跃的侧链连接到半抗原上,当此带有侧链的半抗原与相应抗体结合后,侧链即与邻近的氨基酸形成共价键,也就是说,结合部位邻近的氨基酸残基被标记了。也有人用叠氮基作侧链连接到半抗原上,并与相应抗体结合,经紫外线照射后,叠氮基转变成活化的硝基

亲和色谱法

一、基本理论(一)原理  在生物体内,许多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有与某些相对应的专一分子可逆结合的特性。例如抗原和抗体、酶和底物及辅酶、激素和受体、RNA和其互补的DNA等,都具有这种特性。生物分子之间这种特异的结合能力称为亲和力,根据生物分子间亲和吸附和解离的原理,建立起来的

亲和标记的意义

亲和标记(affinity labeling):指对酶的活性部位、受体的结合位点进行特异标记的方法。试剂A-X的A基团和X基团可分别与不同的位点进行结合,从而将两种物质交联在一起。

亲和标记的原理

亲和标记指用对具有特异的亲和性物质中导入化学反应基团的试剂,有选择地修饰存在于活体高分子的对应结合部位的官能基。因根据亲和标记的目的而设计的试剂,对相应的活体高分子具特异的亲和性,故形成试剂与活体高分子的特异的复合体,结果在结合部位试剂之浓度特别高,因而结合部位的官能基得到良好的修饰。例如,对以芳香

亲和色谱法

亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。中文名:亲和色谱法外文名:affinity chromatography所属学科:生物应用领域:实验例如利用酶与基质(或抑制剂)

亲和标记的概念

亲和标记(affinity labeling):指对酶的活性部位、受体的结合位点进行特异标记的方法。试剂A-X的A基团和X基团可分别与不同的位点进行结合,从而将两种物质交联在一起。

亲和色谱法

亲和色谱法( affinity chromatography),将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相,利用与固定相不同程度的亲和性,使成分与杂质分离的色谱法。

亲和层析实验

可溶性抗原或膜结合抗原的分离             实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒